酿酒酵母钙通道膜蛋白Cch1p、Mid1p和Yvc1p抗原、抗体、制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及酿酒酵母钙通道膜蛋白Cch1p、Mid1p和Yvc1p抗原、抗体、制备方法和应用，属于基因工程技术领域。主要技术方案如下：酿酒酵母钙通道膜蛋白Cch1p、Mid1p和Yvc1p抗原的氨基酸序列分别为SED ID NO:1、SED ID NO:2、SED ID NO:3，基因序列分别为CCH1‑300、MID1‑190、YVC1‑236。制备的三种抗体分别为Anti‑Cch1p‑300、Anti‑Mid1p‑190、Anti‑Yvc1p‑236。本发明专利技术为钙通道膜蛋白Western blot检测研究提供实验保障，也有利于解决目前缺少商品化抗钙通道膜蛋白抗体的问题。

Antigen, antibody, preparation and application of cch1p, mid1p and yvc1p

【技术实现步骤摘要】
酿酒酵母钙通道膜蛋白Cch1p、Mid1p和Yvc1p抗原、抗体、制备方法和应用
本专利技术属于基因工程
，具体涉及酿酒酵母钙通道膜蛋白Cch1p、Mid1p和Yvc1p抗原、抗体、制备方法和应用。
技术介绍
酿酒酵母是生产乙醇的重要工业微生物，其代谢产物--生物乙醇是重要的石油替代品；此外，酿酒酵母还是真核模式菌。因此，对其钙离子通道调控机制的研究，不仅有利于提高菌体生产乙醇的能力，也为其它真核生物的代谢研究奠定基础。酿酒酵母钙通道膜蛋白主要包括电压门控钙通道膜蛋白(Cch1p)、牵张敏感性钙通道膜蛋白(Mid1p)和瞬时受体电位钙通道膜蛋白(Yvc1p)，前二者调控细胞外钙内流入细胞质，后者调控液泡中内钙外流入细胞质。随着分子生物学和生物化学的发展，蛋白质印迹技术(Westernblot)被逐渐用于离子通道调控机制的研究中。Westernblot技术是以特异性抗体检测某一特定抗原的一种蛋白质检测技术，从而获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达的信息。但是，在酿酒酵母钙通道膜蛋白的Westernblot研究中，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.酿酒酵母钙通道膜蛋白Cch1p、Mid1p和Yvc1p抗体制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)确定适合做抗原片段的氨基酸序列SED ID NO:1、SED ID NO:2、SED ID NO:3；根据氨基酸序列推导出基因序列CCH1-300、MID1-190、YVC1-236；/n(2)利用原核表达系统对酿酒酵母的Cch1p-300、Mid1p-190和Yvc1p-236区域蛋白进行重组表达；/n(3)利用Ni

【技术特征摘要】
1.酿酒酵母钙通道膜蛋白Cch1p、Mid1p和Yvc1p抗体制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)确定适合做抗原片段的氨基酸序列SEDIDNO:1、SEDIDNO:2、SEDIDNO:3；根据氨基酸序列推导出基因序列CCH1-300、MID1-190、YVC1-236；
(2)利用原核表达系统对酿酒酵母的Cch1p-300、Mid1p-190和Yvc1p-236区域蛋白进行重组表达；
(3)利用Ni2+-NTA树脂亲和层析技术获得重组蛋白；
(4)将三种重组纯化蛋白Cch1p-300、Mid1p-190和Yvc1p-236分别免疫小鼠，并通过细胞融合技术制备抗体，经筛选、纯化，获得效价高的3株抗体。


2.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：董晓宇，唐乾，王仁军，姜南，邱宇，
申请(专利权)人：大连大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21