马蔺子种仁中的新低聚茋类化合物及其提取方法和用途技术

本发明专利技术公开了马蔺子种仁中的新低聚茋类化合物及其提取方法和用途，对马蔺子种仁的碱提酸沉物进行放大制备，采用乙腈水溶液做流动相，通过两次制备即可得到本发明专利技术新低聚茋类化合物S11(VitisinA‑13b‑o‑glucoside)。本发明专利技术还提供了新化合物S11在制备预防和/或治疗脂代谢紊乱的药物中的应用，通过对化合物S11进行进行活性研究，验证了化合物S11能够抑制细胞成脂分化和脂质生成，从而用于制备预防或治疗肥胖症、高血脂等脂代谢紊乱疾病的药物。

New oligomeric compounds in iris seed kernel and their extraction methods and Applications

【技术实现步骤摘要】
马蔺子种仁中的新低聚茋类化合物及其提取方法和用途
本专利技术涉及马蔺子种仁中低聚茋类化合物及其医药用途领域，特别是涉及马蔺子种仁中的新低聚茋类化合物及其提取方法和用途。
技术介绍
茋类化合物是具有1,2-二苯乙烯骨架以及其组成的聚合物的一类化合物的总称。主要存在于植物的木质部，最早是从蓼科植物大黄中发现，包括二苯乙烯、二苯乙基、菲类单体及其聚合物。低聚茋类化合物属于非黄酮的多酚类化合物，存在于龙胆香科、芍药科、买麻藤科、蔷薇科、莎草科、豆科、桑科、蝶形花科、鸢尾科、葡萄科等。近年来研究报道茋类化合物具有多种生物活性，如神经保护、抗病毒、抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化，抗艾滋病及保肝等作用。马蔺(IrislactealPall.var.chinensis(Fisch.)Koidz.)，别名马莲、马兰、兰花草等，是被子植物门(Angiospermae)鸢尾科(Iridaceae)鸢尾属(Iris)的多年生草本宿根植物。马蔺广泛分布于我国的西北、华北、华东和东北等地，同时中西亚、俄罗斯、蒙古及朝鲜也有分布。马蔺是一种传统的中草药，据《中华本草》中记载，马蔺为植物马蔺的全草，其性味苦、微甘，性微寒。归肾、膀胱、肝经。其具有清热解毒，利尿通淋，活血消肿的功能，用于治疗喉痹，淋浊，关节痛，痈疽恶疮等症，且马蔺的叶、花、根和种子也均可入药。马蔺花晒干后即可入药，性咸，味酸、苦，微凉，有清热凉血的功能，用于咽喉肿疼、吐血等症的治疗；马蔺根性平、味甘，具有清热解毒等功效，用于治疗牙痛、急性传染性肝炎、咽炎等症；其种子有清热解毒、利湿止血的功效，可用于黄疸、白带、泻痢、吐血等疾病的治疗。现代药理学表明马蔺具有多种药理作用，如放射增敏性、抗生物、增强免疫、抗癌、改善糖脂代谢等作用。到目前为止，已经从马蔺中分离得到多种化学成分，包括黄酮类、类黄酮类、苯醌类、茋类、甾醇和挥发油等。茋类，是二苯乙烯类化合物或者其寡聚体。但从马蔺中分离得到的茋类化合物微乎其微，数量极少。目前关于茋类化合物的提取分离方法及相关含量测定研究报道较少，其相关成分的活性研究也比较少。如候微采用95％乙醇回流提取法和半制备型液相色谱法从马蔺子中分离出r-2-viniferin和trans-ε-viniferin；吕欢欢等人采用高速逆流色谱从马蔺子中分离纯化得到VitisinA，VitisinB和VitisinC。因此，需要在现有的研究基础上对马蔺的其他新的化学成分及药理作用进行更加深入、细微的研究与活性机制探讨。肥胖、高血压、高血脂、心血管疾病等脂代谢紊乱疾病正逐渐侵害着人们的健康，而长期服用传统治疗药物会对患者的身体产生副作用影响，因此，急需开发出更安全有效的天然植物来源的药物。
技术实现思路
本专利技术提供从马蔺中提取得到新的低聚茋类化合物及其在制备预防和/或治疗脂代谢紊乱相关疾病药物中的用途，所述化合物具有抑制细胞成脂分化、抑制细胞脂质生成的功效。本专利技术提供一种马蔺中的新的低聚茋类化合物，所述化合物结构式如式S11：现有的对马蔺中活性物质的提取分离方法多需要大量的有机溶剂如甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等，然而有机溶剂价格较高，易挥发，生产安全性差。茋类化合物结构上具有酚羟基，具有一定的弱酸性，可以与碱结合，提高水溶解能力，但是难溶于酸性溶液。本专利技术对马蔺采用碱提酸沉提取分离，经过一维、二维核磁鉴定，意外地得到新的茋类化合物S11，命名为VitisinA-13b-O-葡萄糖苷(VitisinA-13b-o-glucoside)。本专利技术还提供了化合物S11的制备方法，包括如下内容：(1)将马蔺子种仁提取物通过制备色谱制备，得到组分S1；其中，所述制备色谱条件包括：色谱柱：C18色谱柱；优选为规格为20mm*250mm，10μm；流动相：5～30％乙腈水溶液；采用如下程序进行梯度洗脱：0min，5～10％乙腈水溶液；35～45min，20～30％乙腈水溶液；进一步地，采用如下程序进行梯度洗脱：0min，5％乙腈水溶液；40min，30％乙腈水溶液；以色谱图中峰高最高的特征峰为参照峰(如图1中为40.593min)，相对于该参照峰，所述组分S1的相对保留时间为0.71～0.77，优选相对保留时间为0.74～0.75；所述S1的相对保留时间是指：将组分S4作为参考组分，并以组分S4的保留时间作分母，将组分S1的保留时间作分子，与组分S4的保留时间的比值即为组分S1的相对保留时间，即：S1的相对保留时间＝S1的保留时间/S4的保留时间。在本专利技术的一个具体实施方式中，所述组分S1为保留时间为29～31min对应的组分，更具体地，所述组分S1为保留时间为30.333min对应的组分。(2)将组分S1进行半制备分离，得到化合物S11；其中，所述半制备分离的条件包括：色谱柱：C18色谱柱；优选为规格为20mm*250mm，10μm；流动相：20～30％乙腈水溶液；等度洗脱。S11为制备色谱中的最强峰。在本专利技术的具体实施方式中，所述制备色谱或半制备分离还包括以下条件中的至少一种：检测波长：210nm；柱温：25～35℃；流速：40～50mL/min。在本专利技术的具体实施方式中，所述马蔺子种仁提取物为马蔺子种仁碱提酸沉物。进一步地，所述马蔺子种仁碱提酸沉物的制备方法包括如下内容：①马蔺子种仁用碱溶液提取，得到碱提取液；②向碱提取液中加酸至沉淀产生完全，收集沉淀物；③将沉淀物溶于醇后，除去溶剂，即得马蔺子种仁碱提酸沉物；所述醇选自甲醇和/或乙醇。进一步地，所述碱溶液为质量分数为1～10％的NaOH溶液，优选质量分数为5％的NaOH溶液。进一步地，所述加酸至沉淀产生完全是加酸调节溶液pH值不大于3。进一步地，所述酸选自稀硫酸和/或盐酸。所述稀硫酸是指溶质质量分数小于或等于70％的硫酸的水溶液，本专利技术中不再进一步限定其浓度，只要能满足实验条件均可，所述盐酸同理。进一步地，所述乙醇为体积浓度为95～100％的乙醇水溶液。所述乙醇为体积浓度为95～100％的乙醇水溶液，是指，所述乙醇可以为体积浓度大于等于95％的乙醇水溶液，也可以是纯乙醇。在实践中，常用的是95乙醇，即体积浓度为95％的乙醇水溶液。进一步地，步骤(1)中，将马蔺子种仁碱提酸沉物溶于甲醇后，将得到的甲醇提取液上样。马蔺子种仁碱提酸沉物的甲醇提取液，可参考现有技术中溶剂溶解浸提的多种方式获得。在本专利技术的具体实施方式中，是将马蔺子种仁碱提酸沉物溶于甲醇后，再通过有机膜过滤得到的过滤上清液即为其甲醇提取液。进一步地，所述马蔺子种仁碱提酸沉物与甲醇的料液比为0.2～1g/ml；更进一步地，所述马蔺子种仁碱提酸沉物与甲醇的料液比为0.4g/ml。本专利技术提供上述低聚茋类化合物在制备预防和/或治疗脂代谢紊乱的产品中的应用。C2C12细胞是一种鼠源肌前体细胞系，是本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种低聚茋类化合物，其特征在于，结构如式S11所示：/n

【技术特征摘要】
1.一种低聚茋类化合物，其特征在于，结构如式S11所示：





2.权利要求1所述的化合物的制备方法，其特征在于，包括如下内容：
(1)将马蔺子种仁提取物通过制备色谱制备，得到组分S1；
其中，制备色谱的条件包括：
色谱柱：C18色谱柱；优选为规格为20mm*250mm，10μm；
流动相：5～30％乙腈水溶液；采用如下程序进行梯度洗脱：0min，5～10％乙腈水溶液；35～45min，20～30％乙腈水溶液；进一步地，采用如下程序进行梯度洗脱：0min，5％乙腈水溶液；40min，30％乙腈水溶液；
以色谱图中峰高最高的特征峰为参照峰，相对于该参照峰，所述组分S1的相对保留时间为0.71～0.77，优选相对保留时间为0.74～0.75；
(2)将组分S1进行半制备分离，得到化合物S11；
其中，所述半制备分离的条件包括：
色谱柱：C18色谱柱；优选为规格为20mm*250mm，10μm；
流动相：20～30％乙腈水溶液；等度洗脱。
进一步地，所述制备色谱或半制备分离还包括以下条件中的至少一种：
检测波长：210nm；
柱温：25～35℃；
流速：40～50mL/min。


3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述马蔺子种仁提取物为马蔺子种仁碱提酸沉物；进一步地，所述马蔺子种仁碱提酸沉物的制备方法包括如下内容：
①马蔺子种仁用碱溶液提取，得到碱提取液；
②向碱提取液中加酸至沉淀产生完全，收集...

【专利技术属性】
技术研发人员：王洪伦，铁芳芳，
申请(专利权)人：中国科学院西北高原生物研究所，
类型：发明
国别省市：青海;63