一种白芨多个有效成分的分离制备方法技术

本发明专利技术属于中药材领域，具体涉及一种白芨多个有效成分的分离制备方法。通过预处理白芨块茎后烘干、超声提取、沉降分离、滤渣纯化、滤液纯化的工艺分别制备出了高含量的白芨多糖组分和含有多酚的抗氧化组分，避免资源浪费的同时提高了白芨活性物质的提取效率。

A method for the separation and preparation of several effective components of Bletilla striata

【技术实现步骤摘要】
一种白芨多个有效成分的分离制备方法
本专利技术属于中药材领域，具体涉及一种白芨多个有效成分的分离制备方法。
技术介绍
白芨为兰科植物白芨Bletillastriata(Thunb.)Reichb.f.的干燥块茎，作为传统中药制剂使用已有两千多年历史。其味苦、甘涩，性微寒，可用于治疗肺伤咳血、疮疡肿毒、外科创伤、胃及消化道溃疡疼痛等症状。白芨的主要活性成分为白芨多糖，在白芨中的含量高达40％以上，具有较强的DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的清除能力，本领域技术人员也常将白芨多糖制备为白芨胶使用。此外，白芨中还含有多酚类、黄酮类、联苄类、菲类及其衍生物等多种活性物质，具有很高的药用价值。目前对于白芨的活性组分的提取多集中于单一组分的提取，如文件CN201910265025.7公开了一种白芨多酚的制备方法，在制备过程中需除去多糖，文件CN201910217453.2公开了一种白芨多糖提取物及其制备方法，在提取液中提纯多糖，都达到了良好的提取效果，但是这类提取单一组分而丢弃其他活性组分的方法对于白芨宝贵的药用价值来说是一定程度上的浪费。所以本文件旨在提供一种白芨活性成分的提取方法，可以在提取后纯化出白芨多糖和含有白芨多酚的组分。
技术实现思路
本专利技术为解决上述技术问题，提供了一种白芨多个有效成分的分离制备方法。具体是通过以下技术方案来实现的：一种白芨多个有效成分的分离制备方法，所述制备方法包括以下步骤：(1)烘干白芨经预处理后置于50～60℃烘箱干燥3～4h，粉碎后过200目筛；(2)超声提取白芨块茎粉末以料液质量比1：12～16与溶剂混合超声4～6h；(3)沉降分离步骤(2)中超声液体经过滤，干燥浓缩后加入三倍体积量的乙醇溶液，在特有条件下沉降，经过滤分离滤液和滤渣(4)滤渣纯化：滤渣水洗后后滤，经微波干燥5～8分钟即得；(5)滤液纯化：①滤液挥去乙醇后，添加质量分数5～8％的复合酶制剂，55～65℃下超声1.5～2h后，改变为于80～90℃加热30～40min；②纯化液①中加入质量分数5～10％的吸附剂，80～120R/min搅拌30～40min；③进行超滤；④干燥；所述超声提取中使用的溶剂为乙醇的离子液体，乙醇含量为20～36％，离子液体为0.6～0.9mol/L氯化铵；所述预处理为：白芨块茎洗净后置于药液A中浸泡2～3h后置于B药液中浸泡3～4h；所述药液A由0.10～0.15mol/L谷氨酸钠，0.20～0.25mol/L氯化钙，水组成；所述药液B由5～8％g/g吐温80，0.5～1％g/g没食子酸，0.20～0.0.35g/gL-半胱氨酸，水组成；所述特有条件为调节pH至5.5～6.5，加入5～8％硅胶干燥剂静置5～6h，4000～6000r/min离心30～45min；所述复合酶制剂为α-淀粉酶、蛋白酶、金属离子溶液的混合物；所述金属离子溶液为0.15～0.25mol/LFe3+,0.12～0.18mol/LCa2+的盐溶液；所述吸附剂为经预处理的坚果壳与沸石、聚丙烯酰胺质量比5～3:2～4:1～2的混合物；所述预处理为：坚果壳在质量为30％磷酸、10％氯化钙、10％氯化钠的混合溶液中浸泡24～36h，在300～350℃下焙烧1～2h，粉碎过200目筛；所述干燥为微波干燥5～8分钟后，转至真空干燥20～30min；所述超声功率为120～150W；所述超滤的超滤膜孔径大小为0.15～0.25μm；所述微波干燥工艺参数为300～600W，液面高度2～3cm；所述真空干燥工艺参数为温度55～65℃，真空度-0.06～-0.02MPa；所述水为纯净水、蒸馏水或去离子水中一种。有益效果：1.提高了白芨活性物质的提取效率。白芨块茎干燥前有药液A浸泡出去了部分淀粉和碱性杂质，药液B浸泡则有助于有效成分的保留，如L-半胱氨酸通过与多酚氧化酶结合保护白芨中多酚的活性。离子液体由于化学稳定性高、可调节的密度、黏度、极性等原因，与其它常见溶剂的有良好混溶性以及对各种化合物有着较强的萃取性，所以本文件选择题离子液体作为溶剂进行萃取；从可获取的难易程度和提取物质的性质出发，本文件选择了季铵盐溶液氯化铵，一方面可以发挥离子溶液的作用，另一方面可以在提取过程中中和提取出的碱性物质，有助于提取物的纯化。而离子液体的强萃取性主要是对于亲水性的物质而言的，但是不仅是白芨，植物中的天然活性物质，很大一部分是疏水性物质，所以为了能提取到这部分物质，本文件选择了在离子液体中添加乙醇溶液的方法；经本文件前期研究发现，提取液中乙醇的浓度影响多糖的萃取，在20～36％浓度时能萃取到最多的白芨多糖，所以氯化铵与乙醇的组合使得白芨中的亲水和疏水性成分都得以大量萃取出，在相同的萃取条件和时间里，萃取产物的量是普通有机溶剂的4～5倍，提高了提取效率。2.多组分同时制备，避免资源浪费。尽管白芨多糖是白芨中含量最多且药效显著的活性物质，但白芨中其他组分的药用价值同样不可忽视，如酚类，联苯衍生物等，经研究表明，这些组分含有抗氧化、抗炎的活性。因此，出于对白芨资源的充分利用，本文件在提取后的分离纯化组分的处理中针对物质间性质的不同，设计了不同的方法，经本文件前期研究得知40～50％乙醇能析出最多的白芨多糖，醇沉后经过水洗并干燥得以纯化白芨多糖，方法简便且白芨多糖提取率理想，纯度高；醇沉后上清液的处理，本文件提供了酶解除杂-吸附纯化-超滤-干燥的技术路线，酶解除杂中提供了一种复合酶制剂，通过引入金属离子增加α-淀粉酶和蛋白酶的活性，超声辅助加快了酶解进程，增强了对液体中的淀粉和蛋白的去除效果。通过特制的吸附剂清除液体中的杂质，如皂和色素，而吸附剂中添加的金属离子有利于增强对色素的吸附，比起同等用量的活性炭具有更好的色素吸附效果；在干燥时本文件选择了微波干燥与真空干燥的组合，是由于对于微波干燥过程来说，在干燥的前期阶段大量水分得以快速除去，但后期由于水分含量减少，在除去水分的同时也会带走有效物质，因此本文件在干燥后期选择真空干燥，保护了活性组分的含量。具体实施方式下面对本专利技术的具体实施方式作进一步详细的说明，但本专利技术并不局限于这些实施方式，任何在本实施例基本精神上的改进或代替，仍属于本专利技术权利要求所要求保护的范围。实施例1一种白芨多个有效成分的分离制备方法，所述制备方法包括以下步骤：(1)烘干白芨经预处理后置于50℃烘箱干燥3h，粉碎后过200目筛；(2)超声提取白芨块茎粉末以料液质量比1：12与溶剂混合超声4h；(3)沉降分离步骤(2)中超声液体经过滤，干燥浓缩后加入三倍体积量的乙醇溶液，在特有条件下沉降，经过滤分离滤液和滤渣(4)滤渣纯化：滤渣水洗后后滤，经微波干燥5分钟即得；(5)滤液纯化：①滤液挥去乙醇后，添加质量分数5％的复合酶制剂，5本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种白芨多个有效成分的分离制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：/n(1)烘干白芨经预处理后置于50～60℃烘箱干燥3～4h，粉碎后过200目筛；/n(2)超声提取白芨块茎粉末以料液质量比1：12～16与溶剂混合超声；/n(3)沉降分离步骤(2)中超声液体经过滤，干燥浓缩后加入三倍体积量的乙醇溶液，在特有条件下沉降，经过滤分离滤液和滤渣；/n(4)滤渣纯化：/n滤渣水洗后过滤，经微波干燥5～8分钟即得；/n(5)滤液纯化：/n①滤液挥去乙醇后，添加质量分数5～8％的复合酶制剂，55～65℃下超声1.5～2h后，改变为于80～90℃加热30～40min；/n②纯化液①中加入质量分数5～10％的吸附剂，80～120R/min搅拌30～40min；/n③进行超滤；/n④干燥。/n

【技术特征摘要】
1.一种白芨多个有效成分的分离制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
(1)烘干白芨经预处理后置于50～60℃烘箱干燥3～4h，粉碎后过200目筛；
(2)超声提取白芨块茎粉末以料液质量比1：12～16与溶剂混合超声；
(3)沉降分离步骤(2)中超声液体经过滤，干燥浓缩后加入三倍体积量的乙醇溶液，在特有条件下沉降，经过滤分离滤液和滤渣；
(4)滤渣纯化：
滤渣水洗后过滤，经微波干燥5～8分钟即得；
(5)滤液纯化：
①滤液挥去乙醇后，添加质量分数5～8％的复合酶制剂，55～65℃下超声1.5～2h后，改变为于80～90℃加热30～40min；
②纯化液①中加入质量分数5～10％的吸附剂，80～120R/min搅拌30～40min；
③进行超滤；
④干燥。


2.如权利要求1所述一种白芨多个有效成分的分离制备方法，其特征在于，所述超声提取中使用的溶剂为乙醇的离子液体，乙醇含量为20～36％，离子液体为0.6～0.9mol/L氯化铵。


3.如权利要求1所述一种白芨多个有效成分的分离制备方法，其特征在于，所述预处理为：白芨块茎洗净后置于药液A中浸泡2～3h后置于B药液中浸泡3～4h。


4.如权利要求3所述一种白芨多个有效成分的分离制备方法，其特征在于，所述药液A由0.10～0.15mol/L谷氨酸钠，0.20～0.25mo...

【专利技术属性】
技术研发人员：苗云峰，
申请(专利权)人：贵州道庄生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：贵州;52