用于抑制细胞粘附至RGD结合位点或引导诊断剂或治疗剂至 RGD结合位点的方法技术

本发明专利技术涉及用于抑制细胞粘附至RGD结合位点或引导诊断剂或治疗剂至RGD结合位点的组合物和方法。本发明专利技术公开了包括R‑G‑磺基丙氨酸(即R‑G‑NH‑CH(CH

Methods for inhibiting cell adhesion to RGD binding sites or guiding diagnostic or therapeutic agents to RGD binding sites

【技术实现步骤摘要】
用于抑制细胞粘附至RGD结合位点或引导诊断剂或治疗剂至RGD结合位点的方法本申请是国际申请日为2010年11月10日的国际申请PCT/US2010/056277进入中国、申请号为201080061074.6的题为“用于抑制细胞粘附至RGD结合位点或引导诊断剂或治疗剂至RGD结合位点的组合物和方法”的专利技术专利申请的分案申请。相关申请根据35U.S.C.119(e)，本申请要求2009年11月10日提交的题名为CompositionsAndMethodsForInhibitingCellularAdhesionToRGDBindingSites(用于抑制细胞粘附至RGD结合位点的组合物和方法)的美国临时专利申请顺序号61/259,748的优先权，其完整公开内容通过引用明确结合到本文中。
本专利技术总的来说涉及化学和医学领域，更具体地讲涉及可用于抑制细胞粘附至Arg-Gly-Asp(“RGD”三肽)结合位点的组合物和方法以及以下病症的相关治疗：例如炎症、伤口愈合、防止瘢痕形成、血栓形成、癌症转移和肿瘤、增殖性或非增殖性糖尿病视网膜病、玻璃体液液化、诱导玻璃体视网膜后部脱离(PVD)、玻璃体视网膜疾病的发病机制，例如飘浮物、特发性黄斑裂孔、玻璃体黄斑牵引、年龄相关性黄斑变性、湿性黄斑变性、脉络膜新生血管形成、玻璃体视网膜手术、静脉闭塞、角膜新生血管形成、缺血性视神经、虹膜发红(rubiosisiridis)和青光眼手术中防止瘢痕形成。
技术介绍
RGD三肽序列存在于许多蛋白质中，其中其在细胞粘附中发挥作用。其中存在RGD三肽序列的蛋白质的实例包括胶原、纤连蛋白、玻连蛋白、冯维勒布兰德因子(VWF)、某些解联蛋白和某些网柄菌凝素。整联蛋白是异二聚体细胞表面受体，其通过与具有暴露的RGD序列的配体结合而介导细胞与胞外基质(ECM)间的粘附。认为正常的整联蛋白-RGD结合在参与细胞生长、迁移和存活的基因表达中起作用。这种细胞生长、迁移和存活的错误调节可导致许多疾病状态，包括血栓形成、炎症和癌症。因此，作为细胞粘附蛋白潜在模拟物研究了RGD肽，并针对其与整联蛋白结合的能力、针对治疗目的(例如抑制细胞凋亡、血管生成、肿瘤发生)、针对以其多聚体形式作为内部放射治疗药以及癌症成像剂的用途及其携带抗癌药物的能力进行了研究。在眼中，整联蛋白影响包括眼发育、细胞迁移、愈合在内的许多过程和一些病理过程。整联蛋白还可在眼组织中介导炎症和血栓形成。另据报道，在动物模型中，玻璃体内注射RGD肽引起玻璃体视网膜后部脱离，因此，可用于治疗某些视网膜病症和/或在玻璃体切除术中促进玻璃体的摘除。[参见Olivera，L.B.等，RGDPeptide-AssistedVitrectomytoFacilitateInductionofaPosteriorVitreousDetachment：aNewPrincipleinPharmacologicalVitreolysis(有利于诱导玻璃体后部脱离的RGD肽辅助的玻璃体切除术：药理学玻璃体溶解的新原理)；CurrentEyeResearch(8)：333-40(2002年12月25日)]。
技术实现思路
本专利技术提供包括R-G-磺基丙氨酸(即R-G-NH-CH(CH2-SO3H)COOH或Arg-Gly-NH-CH(CH2-SO3H)COOH)及其衍生物(包括药学上可接受的盐、水合物、立体异构体、多聚体、环状形式、线性形式、药物缀合物、前药及其衍生物)的新的化合物。本专利技术还提供用于在人或动物受试者中抑制细胞粘附至RGD结合位点或将其它诊断剂或治疗剂递送到RGD结合位点的组合物，和用于通过将有效量的包含R-G-磺基丙氨酸肽或其衍生物(包括药学上可接受的盐、水合物、立体异构体、多聚体、环状形式、线性形式、药物缀合物、前药及其衍生物)的组合物给予受试者，而在人或动物受试者中抑制细胞粘附至RGD结合位点或将其它诊断剂或治疗剂递送到RGD结合位点的方法。本专利技术的R-G-磺基丙氨酸肽的具体实例包括Arg-Gly-NH-CH(CH2-SO3H)COOH的线性形式(在本文称为化合物1的实例)和Arg-Gly-NH-CH(CH2-SO3H)COOH)的环状形式(在本文称为化合物2的实例)。本专利技术的R-G-磺基丙氨酸衍生物的通式包括但不限于具有下列通式I-VII的化合物：通式I：其中X选自：H、C1-C6烷基、Ph或SO3H，Y＝OH或NH2。通式II：其中X选自：H、C1-C6烷基、Ph或SO3H。通式III：其中X选自：H、C1-C6烷基、Ph或SO3H，其中Z选自：H或SO3H。通式IV：其中X选自：H、C1-C6烷基、Ph或SO3H；Y选自OH或NH2。通式V：其中X选自：H、C1-C6烷基、Ph或SO3H。通式VI：其中X选自：H、C1-C6烷基、Ph或SO3H。通式VII：X1-R-G-磺基丙氨酸-X其中X和X1选自：环状或线性的-Phe-Val-Ala、-Phe-Leu-Ala、-Phe-Val-Gly、-Phe-Leu-Gly、-Phe-Pro-Gly、-Phe-Pro-Ala、-Phe-Val或以下氨基酸的D-异构体或L-异构体的任何组合的任何盐：Arg、Gly、磺基丙氨酸、Phe、Val、Ala、Leu、Pro、Thr。通式VII的环状形式的实例包括但不必限于：其中X’选自：H、C1-C6烷基、Ph或SO3H；Z选自H或Me；Y选自OH、NH2。磺酸是强于相应羧酸的酸类。磺酸基团的这种较高极性导致较强的分子间结合。例如，R-G-磺基丙氨酸(其具有更极化的O-H键)可与整联蛋白结合位点中蛋白质的酰胺基团形成比R-G-天冬氨酸(RGD肽)(其具有相对较不极化的O-H键)强的氢键和/或与整联蛋白结合位点中络合的金属离子具有较强的相互作用。如本文其它部分更详细描述的一样，合成了通式VII的一个具体实例甘氨酰(Glycinyl)-精氨酰-甘氨酰-磺基丙氨酸-苏氨酰-脯氨酸-COOH(GRG磺基丙氨酸TP；下文称为化合物1)，并在动物中进行了测试，发现其通过抑制整联蛋白-胞外基质(ECM)相互作用，而有效地诱导视网膜表面上的玻璃体后部脱离(PVD)。另如本文其它部分更详细描述的一样，使用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，在伤口愈合模型中对化合物1进行了试验，并且表明其与环状-RGD肽抑制(40％)相比，在12小时内抑制细胞粘附达74％。这些研究表明和证实了甘氨酰-精氨酰-甘氨酰-磺基丙氨酸-苏氨酰-脯氨酸-COOH甚至可比RGD肽本身更强地与整联蛋白结合的基本原理。可呈L-形式或D-形式的R-G-磺基丙氨酸肽序列是整联蛋白-ECM相互作用的竞争性抑制剂。R-G-磺基丙氨酸肽序列可以是蛋白酶抗性衍生物或环状衍生物或前药衍生物或与药物递送系统有关或为单克隆抗体。本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.药物组合物在制备用于治疗由眼疾病引起的炎症、异常细胞粘附或细胞凋亡，或用于减少病理性整联蛋白-胞外基质相互作用、抑制成纤维细胞和胞外基质的糖蛋白组分间的病理性相互作用、减少病理性血管生成、诱导治疗性玻璃体后部脱离、引起治疗性玻璃体溶解、减少对视网膜和视网膜血管的病理性牵引或拉力或减少瘢痕形成的药物中的用途，所述药物组合物包含i)包含甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-磺基丙氨酸-苏氨酸-脯氨酸-COOH的肽，或ii)具有下式的肽：/nX1-R-G-磺基丙氨酸-X/n其中X和X1选自：Phe-Val-Ala、-Phe-Leu-Ala、-Phe-Val-Gly、-Phe-Leu-Gly、-Phe-Pro-Gly、-Phe-Pro-Ala、-Phe-Val；或选自Arg、Gly、磺基丙氨酸、Phe、Val、Ala、Leu、Pro、Thr及其盐、组合、D-异构体和L-异构体。/n

【技术特征摘要】
20091110 US 61/2597481.药物组合物在制备用于治疗由眼疾病引起的炎症、异常细胞粘附或细胞凋亡，或用于减少病理性整联蛋白-胞外基质相互作用、抑制成纤维细胞和胞外基质的糖蛋白组分间的病理性相互作用、减少病理性血管生成、诱导治疗性玻璃体后部脱离、引起治疗性玻璃体溶解、减少对视网膜和视网膜血管的病理性牵引或拉力或减少瘢痕形成的药物中的用途，所述药物组合物包含i)包含甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-磺基丙氨酸-苏氨酸-脯氨酸-COOH的肽，或ii)具有下式的肽：
X1-R-G-磺基丙氨酸-X
其中X和X1选自：Phe-Val-Ala、-Phe-Leu-Ala、-Phe-Val-Gly、-Phe-Leu-Gly、-Phe-Pro-Gly、-Phe-Pro-Ala、-Phe-Val；或选自Arg、Gly、磺基丙氨酸、Phe、Val、Ala、Leu、Pro、Thr及其盐、组合、D-异构体和L-异构体。


2.根据权利要求1的用途，其中所述肽具有以下结构式：<...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·J·麦克尔，J·帕克，
申请(专利权)人：急速制药公司，
类型：发明
国别省市：美国;US