一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法以及郁金香杂交育种方法技术

本发明专利技术公开了一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法以及郁金香杂交育种方法。一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法，包括以下步骤：(1)花粉采集(2)对采集的花粉取样进行活力鉴定(3)选择萌发率大于5％、萌发速度大于5的花粉保存，保存温度为‑20℃～5℃。本发明专利技术郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法通过快速活力鉴定，挑选活力较好的花粉进行保存，低温进行保存，保存时间长，花粉能长时间保持活力，有效解决郁金香杂交育种的花期不遇问题，为亲本选择提供科学依据。

A collection, identification and preservation method of tulip pollen and a hybrid breeding method of tulip

【技术实现步骤摘要】
一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法以及郁金香杂交育种方法
本专利技术涉及花粉采集及保存
，特别是涉及一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法以及郁金香杂交育种方法。
技术介绍
郁金香(TulipagesnerianaL.)是百合科郁金香属的多年生草本植物，具鳞茎。郁金香原产地中海沿岸及中亚细亚、土耳其等地。由于地中海的气候，形成郁金香适应冬季湿冷和夏季干热的特点，具有夏季休眠、秋冬生根并萌发新芽但不出土，需经冬季低温后第二年2月上旬左右(温度在5℃以上)开始伸展生长形成茎叶，3～4月开花的特性。生长开花适温为15～20℃。花芽分化是在茎叶变黄时将鳞茎从盆内掘起放阴冷的室外内度夏的贮藏期间进行的。分化适温为20～25℃，最高不得超过28℃。大多数郁金香品种自交不亲和，必须人工采集花粉进行杂交。当前国际上育成的郁金香新品种中，大部分采用的是常规杂交授粉方法。花粉活力是亲本选择的一个重要参考标准，杂交之前，鉴定花粉活力可以协助亲本选择，提高杂交授粉成功率。郁金香花期不遇问题：郁金香花期短，单朵花期在10天左右，群体在20-30天。不同品种的郁金香花期相差更大。在我国不同区域郁金香开放时期差异很大，从南到北依次推迟。例如浙江台州地区春节期间既开放，江苏南京阳春三月开放，大连英歌石植物园的郁金香四月开放，而新疆昭苏地区五月绽放。常温状态下郁金香花粉活力迅速下降，多数品种花粉在花药开裂后10天便失去活力。因此，在郁金香杂交育种过程中，花期不遇和花粉贮藏期短是亟待解决的问题。研究适宜郁金香花粉的采集方法、活力鉴定方法、贮藏条件，为解决郁金香杂交育种的花期不遇和亲本选择提供科学依据。公开号为CN104322216A的专利技术专利申请公开了一种郁金香花粉采集和贮藏的方法，其特点是：在上午选择含苞待放的大蕾期花苞，用手轻轻拨开花瓣，用镊子采集花药，花药采集后放入适当大小塑料培养皿中，培养皿上盖标明花粉采集日期、品种信息；再将采集好的花粉连同培养皿一起带回室内，放入密闭玻璃箱中，玻璃箱底部放入干燥剂，干燥剂上方设置网状隔板，将装有花粉的培养皿放在网状隔板上，经24小时后，脱水完成；最后将脱水后的花粉取出，将培养皿上盖扣好放回干燥箱内，然后密封玻璃干燥箱，在室温无阳光直射的条件下贮藏备用。该技术方案在一定程度上解决了郁金香杂交育种过程中，花粉采集和贮藏的部分问题，然而还是存在一些问题，比如花粉采集选择含苞待放、花粉未散开的花朵，此时花粉活力是不是最大有待验证，默认收集的花粉都是合格的，而没有在收集保存之前进行萌发率的鉴定，而现有技术中对郁金香花粉萌发率鉴定所需时间较长，在这个过程中可能会影响花粉质量；并且该技术方案花粉最多贮藏30天，在一些情况下，这个贮藏时间还是较短。
技术实现思路
本专利技术针对现有郁金香杂交育种技术中存在的不足，提供了一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法以及郁金香杂交育种方法。一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法，包括以下步骤：(1)花粉采集(2)对采集的花粉取样进行活力鉴定取花粉样品均匀涂在培养基上，在光照培养箱中培养，培养后计算花粉萌发率和萌发速度，以花粉管长度超过花粉粒直径作为萌发标准，萌发率＝已萌发花粉粒数/花粉粒总数×100％；用花粉管长度与花粉粒直径的比值反映萌发速度，萌发速度＝花粉管长度/花粉粒直径；(3)选择萌发率大于5％、萌发速度大于5的花粉保存，保存温度为-20℃～5℃。花朵开放前一天进行套袋处理，防止生物混杂或机械混杂。花粉采集选择花瓣刚裂开，花粉完全散开的花朵，此时花粉萌发率最高、萌发速度最快，活力最大。花粉采集时间最好选择晴天上午10点以后，此时采集的花粉湿度小，不用干燥便可直接用于杂交育种和保存，且易于保存。如果是阴雨天采集的花粉，则花粉湿度较大，需要将采集到的花粉放置滤纸上，再将盛有花粉的滤纸放进真空干燥器内室温干燥处理12h，干燥后进行低温干燥保存。花粉最好采集完全散开的，如果是未完全散开的花粉，需要进行阴干后熟，使花粉完全散开。阴干后熟的方法为：将花粉放到温室通风处放置6个小时。活力鉴定时，培养基的组分为：MS培养基+100g/L蔗糖+6g/L琼脂粉+25mg/L硼酸；培养条件为：温度25℃、光照4000lux。根据花粉需要保存的时间确定保存温度，对于短期保存，花粉保存时密封保存，保存温度5℃，保存时间可达60天。可以直接用2ml离心管分装后密封保存，放到5℃冰箱保存。对于长期保存，花粉保存时密封保存，保存温度-20℃，保存时间可达180天。保存时将花粉先用小管分装，然后将小管放入大管中密封保存，大管内放入干燥剂。小管可以是2ml离心管，大管可以是50ml离心管，离心管都带有盖子，方便密封保存。本专利技术还提供了一种郁金香杂交育种方法，包括提供花粉的父本郁金香品种和接受花粉的母本郁金香品种，所述父本郁金香品种与母本郁金香品种花期不遇，其特征在于，使用所述郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法获得父本郁金香品种的花粉，然后将花粉人工对母本郁金香品种进行杂交授粉。本专利技术郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法通过快速活力鉴定，选择萌发率大于5％、萌发速度大于5的花粉保存进行保存，保存温度为-20℃～5℃，花粉能长时间保持活力，有效解决郁金香杂交育种的花期不遇问题，为亲本选择提供科学依据。附图说明图1为郁金香花朵套袋图。图2为郁金香花朵花粉完全散开图。图3为花粉后熟图。图4为花粉干燥图。图5为郁金香花粉萌发过程图，其中A-D分别为花粉管伸长到不同长度时的图。图6为花粉采集时间对花粉萌发率的影响检测结果图。图7为花粉采集时间对郁金香道琼斯品种花粉萌发的影响检测结果图。图8为花粉采集时间对郁金香狮王品种花粉萌发的影响检测结果图。图9为光对花粉萌发的影响检测结果图，其中A为暗条件，B为光条件。图10为培养温度对花粉管萌发的影响检测结果图。图11为培养温度对花粉萌发率的影响检测结果图。图12为培养温度对郁金香白马王子品种花粉管伸长的影响检测结果图，其中A-D分别为15℃、20℃、25℃和30℃。图13为保存温度对花粉萌发率的影响检测结果图。具体实施方式实施例1一种鉴定郁金香花粉活力的方法，按如下步骤进行：花粉采集方法：花朵开放前一天进行套袋(图1)，防止生物混杂或机械混杂。晴天上午10点以后(此时采集的花粉湿度小，不用干燥便可直接用于杂交育种和保存，且易于保存)，选择花瓣刚裂开，花粉完全散开的花朵(图2)(此时花粉萌发率最高、萌发速度最快，活力最大)，使用镊子采集花粉装入2ml离心管，离心管上标注采集品种和时间。花粉干燥处理方法：晴天上午10点以后采集的完全散开的花粉，不用干燥，可直接进行保存；晴天采集但又未完全散开的花粉可放到温室通风处放置6个小时进行后熟(图3)，待花粉粒完全散开时再装入2ml离心管。阴雨天花粉湿度大时本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)花粉采集/n(2)对采集的花粉取样进行活力鉴定/n取花粉样品均匀涂在培养基上，在光照培养箱中培养，培养后计算花粉萌发率和萌发速度，以花粉管长度超过花粉粒直径作为萌发标准，萌发率＝已萌发花粉粒数/花粉粒总数×100％；用花粉管长度与花粉粒直径的比值反映萌发速度，萌发速度＝花粉管长度/花粉粒直径；/n(3)选择萌发率大于5％、萌发速度大于5的花粉保存，保存温度为-20℃～5℃。/n

【技术特征摘要】
1.一种郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)花粉采集
(2)对采集的花粉取样进行活力鉴定
取花粉样品均匀涂在培养基上，在光照培养箱中培养，培养后计算花粉萌发率和萌发速度，以花粉管长度超过花粉粒直径作为萌发标准，萌发率＝已萌发花粉粒数/花粉粒总数×100％；用花粉管长度与花粉粒直径的比值反映萌发速度，萌发速度＝花粉管长度/花粉粒直径；
(3)选择萌发率大于5％、萌发速度大于5的花粉保存，保存温度为-20℃～5℃。


2.如权利要求1所述的郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法，其特征在于，花粉采集选择花瓣刚裂开，花粉完全散开的花朵。


3.如权利要求2所述的郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法，其特征在于，花朵开放前一天进行套袋处理。


4.如权利要求2所述的郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法，其特征在于，花粉采集时间选择晴天上午10点以后。


5.如权利要求4所述的郁金香花粉的采集、鉴定和保存方法，其特征在于，未完全散开的花粉进行阴干后熟，使花粉完全散开。


6.如权...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘君，黑银秀，郭方其，余山红，唐兴国，米敏，
申请(专利权)人：台州市农业科学研究院，
类型：发明
国别省市：浙江;33