一株罗伊氏乳杆菌22及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株罗伊氏乳杆菌22及其应用。本发明专利技术的罗伊氏乳杆菌22，是从健康鸡群中分离得到，分类命名为罗伊氏乳杆菌（

A Lactobacillus reuteri 22 and its application

The invention discloses a Lactobacillus reuteri 22 and an application thereof. The Lactobacillus reuteri 22 of the invention is isolated from the healthy chicken group and is classified and named as Lactobacillus reuteri\uff08

【技术实现步骤摘要】
一株罗伊氏乳杆菌22及其应用
本专利技术涉及生物防控技术，具体涉及一株罗伊氏乳杆菌22及其在鸡养殖上的应用，口服罗伊氏乳杆菌22可增强肠道免疫功能，促进肠道上皮的增殖，具有维护肠道屏障稳态的潜能。
技术介绍
乳杆菌属(Lactobacillus)在分类学上归属于硬菌门(Finnicutes)，杆菌纲(Bacilli)，乳杆菌目(lactobacillales)，乳杆菌科(lactobacillaceae)，是一种革兰氏阳性杆菌，不形成芽孢，分解糖后能够产生乳酸。乳杆菌是人和动物肠道的正常菌，与宿主营养物质的吸收、肠道黏膜免疫系统的发育都有着密切的关系。乳酸菌的各种益生性能的发挥建立在黏附在肠上皮细胞的基础上，如果黏附能力差或者不能黏附，只能是路过菌，也就不能充分发挥生理功能。宿主特异性与菌株特异性是乳酸杆菌的特点，也就是说，不同来源的乳酸杆菌其黏附能力差别很大，同样，不同种属的菌株黏附能力也不一样。此外乳酸菌黏附具有浓度依赖性，在一定的范围内，黏附能力的强弱与菌液的浓度呈正相关。比如，双歧杆菌的黏附具有时间与浓度的影响，在黏附3h，菌量108cfu/mL时，黏附效果达到饱和。肠道相关淋巴组织(GALT)是机体最大的淋巴组织。因此，它是宿主总免疫组织的重要组成部分，肠道微生物区系是肠道防御屏障的重要组成部分，在没有肠道微生物区系的情况下，抗原在肠道黏膜间的转运增加。肠道菌群在局部和全身诱发特异性免疫反应也进一步支持了这一观点。此外，肠道菌群可促进免疫系统对病原不停的低水平的应答。此外，肠道菌群促进肠道免疫系统的成熟，在肠道菌群逐渐形成的过程中机体分泌型免疫球蛋白A含量升高，有研究表明，肠道中已易位菌群在机体免疫系统成熟后显著减少。在正常的生理状态下，机体内部的微生物环境处于一种稳定、平衡的状态。这种互利共生的肠道稳态与机体的健康紧密结合，如果失衡，致病菌将趁虚而入，影响机体生长，甚至导致死亡。研究表明乳酸杆菌能够增强肠黏膜屏障，维护健康养殖。
技术实现思路
专利技术目的：本专利技术所要解决的第一个技术问题是提供了一株罗伊氏乳杆菌22，该乳杆菌22耐受性能好，抑菌效果，粘附性能优良，并且能增强肠道免疫功能，促进肠上皮增殖，进而维护肠黏膜屏障。本专利技术所要解决的第二个技术问题是提供了一种益生菌，所述益生菌包含所述的罗伊氏乳杆菌22。本专利技术所要解决的第三个技术问题是提供了罗伊氏乳杆菌22或所述的益生菌在鸡养殖中的应用。本专利技术最后要解决的技术问题是提供了一种鸡饲料。技术方案：为了解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案为：一种罗伊氏乳杆菌22，所述罗伊氏乳杆菌22的分类命名为罗伊氏乳杆菌Lactobacillusreuteri，于2019年6月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.17932；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本
技术实现思路
还包括一种益生菌，所述益生菌包含所述的罗伊氏乳杆菌22。本
技术实现思路
还包括所述的罗伊氏乳杆菌22或所述的益生菌在鸡养殖中的应用。其中，所述罗伊氏乳杆菌22的日添加量是2.5×106-2×107CFU/g鸡。本
技术实现思路
还包括所述的罗伊氏乳杆菌22或所述的益生菌在提高小肠绒毛的长度、小肠隐窝深度、紧密连接蛋白表达水平、抗菌肽表达水平或溶菌酶表达水平一种或几种中的应用。本
技术实现思路
还包括所述的罗伊氏乳杆菌22或所述的益生菌在增加肠干细胞数量、杯状细胞数量中的应用。本
技术实现思路
还包括所述的罗伊氏乳杆菌22或所述的益生菌在促进肠道IgA的分泌、降低炎症因子、提高防御素表达水平一种或几种中的应用。本
技术实现思路
还包括一种鸡饲料，所述鸡饲料包含所述的罗伊氏乳杆菌22或所述的益生菌。有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下的特色和优点：1、乳酸杆菌属内种之间的差异较大，表型性状、生化反应和生理特征方面具有明显差异。本专利技术的罗伊氏乳杆菌22从鸡的肠道分离，是鸡源性的乳酸杆菌，通过筛选证实其具有良好的耐酸耐胆盐性能和粘附性能，并且能够抑制病原菌生长。2、目前关于罗伊氏乳杆菌在家禽动物鸡上的研究甚少。本专利技术筛选的罗伊氏乳杆菌22能够刺激雏鸡肠干细胞的增值、鸡肠隐窝增值细胞的数量、隐窝深度以及增值相关基因(PCNA和c-Myc)的高水平表达，从而促进家禽早期肠道的健康发育。这是本专利技术首次报道该现象及其作用机制，研究结果对于营养的吸收和早期病原微生物的感染具有重要的发育学研究价值和实践养殖意义。3、本专利技术的罗伊氏乳杆菌22增强雏鸡肠黏膜免疫功能，如诱导杯状细胞数量的增加、紧密连接蛋白表达水平以及抗菌肽(AvBD2、AvBD9和lysozyme)水平，这也是本专利技术首次报道鸡源罗伊氏乳杆菌对上述相关黏膜免疫功能在雏鸡上的作用机制。4、本专利技术首次分离鉴定获得了罗伊氏乳杆菌22；该菌株为革兰氏染色阳性，呈杆状，具有良好的益生菌性能；口服罗伊氏乳杆菌22可以增强肠道免疫水平，提高小肠绒毛的长度和小肠隐窝的深度，维护肠黏膜稳态，该菌可以开发成预防肠炎的益生菌。附图说明图1：乳杆菌光学显微镜革兰氏染色观察图；图2：乳杆菌耐酸耐胆盐性能，抗菌及粘附性能结果图；A-B：编号22的菌株即为罗伊氏乳杆菌22，在pH＝3，0.3％胆盐下具有良好的耐受性能；C-D：罗伊氏乳杆菌22能够较好的粘附Caco-2细胞；E-F：编号为8的菌株即为罗伊氏乳杆菌22，可抑制肠道致病菌大肠杆菌E-coli，鸡白痢沙门氏菌S.pullorum，鼠伤寒沙门氏菌S.typhimurum的生长。图3：罗伊氏乳杆菌22能保护肠黏膜屏障；Con组：阴性对照，口服PBS；罗伊氏乳杆菌22组：接种2×108CFU罗伊氏乳杆菌22；A-C：罗伊氏乳杆菌22能略微降低炎症因子的水平；D：罗伊氏乳杆菌22可保护肠绒毛结构；E-G：罗伊氏乳杆菌22能够轻微增加体重，提高紧密连接蛋白基因表达水平。图4：罗伊氏乳杆菌22增加杯状细胞的数目；分组同图3；A-B：PAS染色显示罗伊氏乳杆菌22能增加杯状细胞的数目。图5：罗伊氏乳杆菌22能够促进肠隐窝处细胞增殖；分组同图3；A-B：HE染色显示罗伊氏乳杆菌22能增加肠隐窝的深度；C-D：罗伊氏乳杆菌22增加肠隐窝处PCNA+细胞的数量；E-G：罗伊氏乳杆菌22促进增殖相关基因及干细胞标志基因表达水平的增加。图6：罗伊氏乳杆菌22能够提高肠黏膜免疫水平；分组同图3；A-D：罗伊氏乳杆菌22促进肠道IgA的分泌，防御素以及溶菌酶表达水平的增加。具体实施方式下面通过具体的实施例和附图对本专利技术进一步说明。下述实施例中所用方法如无特别说明，均为常规试剂和常规方法。实施例1样品的来源与菌株的初步筛选、益生性能及菌株的鉴定1、样品的来源与菌株的初步筛选样品来自健康鸡，屠宰后打开腹腔，用灭菌棉绳将十二指肠的两头扎好，剪断后立即放入预冷的生理盐水中，30min内送至实验室作菌种本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株罗伊氏乳杆菌22，其特征在于，所述罗伊氏乳杆菌 22的保藏编号为CGMCC No.17932，于2019年6月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。/n

【技术特征摘要】
1.一株罗伊氏乳杆菌22，其特征在于，所述罗伊氏乳杆菌22的保藏编号为CGMCCNo.17932，于2019年6月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。


2.一种益生菌，其特征在于，所述益生菌包含权利要求1所述的罗伊氏乳杆菌22。


3.权利要求1所述的罗伊氏乳杆菌22或权利要求2所述的益生菌在鸡养殖中的应用。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述罗伊氏乳杆菌22的日添加量是2.5×106-2×107CFU/g鸡。


5.权利要求1所述的罗...

【专利技术属性】
技术研发人员：庾庆华，谢霜，赵世义，李昱辰，杨倩，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32