The invention discloses a pretreatment method for detecting the cortisol of animal hair, which is particularly suitable for the pretreatment method of extracting the cortisol from the hair of wild animals, including the following steps: Step 1: obtaining the hair sample; step 2: cleaning and exfoliating the hair; step 3: grinding the cleaned and exfoliated hair with liquid nitrogen; step 4: grinding in step 3 of extraction Step 5: centrifuging, taking the supernatant, drying the solute from the extract and adding the phosphate buffer solution. The invention improves the experimental efficiency, quality and stability, and saves the use amount of the sample.
【技术实现步骤摘要】
一种动物毛发皮质醇检测的预处理方法
本专利技术属于动物保护及兽医领域,涉及一种动物毛发中皮质醇检测的预处理方法。
技术介绍
野生动物环境压力、应激研究可以通过体内皮质醇含量进行判断。此前使用的血液检测对动物个体影响较大,不利于动物保护和实验的准确性。毛发和粪便都属于非损伤取样,通过检测毛发中的皮质醇含量判断动物压力情况对于野生动物环境压力、应激研究是十分重要的。由于野生动物毛发难以收集,并受自身分泌物和环境中尘土、雨水等影响,采样时无法避免污染,尽量减弱污染带来的影响,提高萃取效率及避免实验过程高温对样品的影响是从毛发中萃取皮质醇实验方案中重要的部分。虽然目前的技术随着各种仪器的出现不断完善,但是在实验方案方面依旧存在一些问题。包括但不限于因有些毛发较长必须进行预剪切导致的无法避免的局部高温,为了减少实验时间清洗后对毛发进行加热烘干和加热萃取对样品造成的影响。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的缺陷,提供一种快速准确,成本低廉/省时高效的毛发皮质醇提取方法,以推动科学领域相关研究。本专利技术提供了一种动物毛发皮质醇检测的预处理方法,包括以下步骤:步骤一:获得毛发样品;步骤二:清洁毛发并去角质化;步骤三:利用液氮冷冻,在研钵中磨碎清洁并去角质化后的毛发;步骤四:萃取步骤三中磨碎的毛发;步骤五:离心,取上清,干燥萃取液所得的溶质并加入磷酸缓冲盐溶液。步骤一中,采用非损伤方式获得动物毛发样品,如脱落毛发,捕捉、救 ...
【技术保护点】
1.一种动物毛发皮质醇检测的预处理方法,其特征在于,包括以下步骤:/n步骤一:获得毛发样品;/n步骤二:清洁毛发并去角质化;/n步骤三:利用液氮冷冻,在研钵中磨碎清洁并去角质化后的毛发;/n步骤四:萃取步骤三中磨碎的毛发;/n步骤五:离心,取上清,干燥萃取液所得的溶质并加入磷酸缓冲盐溶液。/n
【技术特征摘要】
1.一种动物毛发皮质醇检测的预处理方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一:获得毛发样品;
步骤二:清洁毛发并去角质化;
步骤三:利用液氮冷冻,在研钵中磨碎清洁并去角质化后的毛发;
步骤四:萃取步骤三中磨碎的毛发;
步骤五:离心,取上清,干燥萃取液所得的溶质并加入磷酸缓冲盐溶液。
2.根据权利要求1所述的预处理方法,其特征在于,步骤一中,通过非损伤方式获得毛发样品,收集动物脱落毛发样品不少于50mg,并可以接受有一定污染的毛发样品。
3.根据权利要求1所述的预处理方法,其特征在于,步骤二中,先使用蒸馏水进行毛发的清洗,后使用异丙醇进行去角质化。
4.根据权利要求1所述的预处理方法,其特征在于,步骤二中,所述去角质化后的毛发在室温下进行干燥。
5.根据权利要求1所述的预处理方法,其特征在于,步骤三中不使用剪刀剪碎毛发而是经过液氮冷...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈珉,童梦晨,林伊,
申请(专利权)人:华东师范大学,
类型:发明
国别省市:上海;31
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