一种啶虫脒降解菌的保护剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种啶虫脒降解菌的保护剂及其制备方法和应用，该保护剂由稳定剂、营养剂和防腐剂和水组成，所述的稳定剂成分为糊精，营养剂成分为柠檬酸钠和氯化钙，防腐剂成分为苯甲酸钠。本发明专利技术的保护剂可以有效解决微生物菌剂活菌数低、保藏期短、易染菌等问题；可有效保持菌剂的性能、提高有效菌存活率、延长菌剂的保藏寿命，并且使得微生物菌剂可以在常温下进行保藏，且其不易染菌，保藏方法成本低廉、使用方便，有效的减少了运输和保藏的成本，进一步保障了农药降解微生物菌剂在农药降解中的实际应用。

A protective agent for acetamiprid degrading bacteria and its preparation and Application

The invention discloses a protective agent for acetamiprid degrading bacteria and a preparation method and application thereof. The protective agent is composed of a stabilizer, a nutritious agent, a preservative and water. The stabilizer is composed of dextrin, a nutritious agent is composed of sodium citrate and calcium chloride, and the preservative is composed of sodium benzoate. The protective agent of the invention can effectively solve the problems of low number of living bacteria, short storage period, easy to infect bacteria, etc.; can effectively maintain the performance of the agent, improve the survival rate of the effective bacteria, and extend the storage life of the agent, and make the microbial agent can be preserved under normal temperature, and it is not easy to infect bacteria, the storage method has low cost, convenient use, and effectively reduces the transportation and protection The cost of storage further guarantees the practical application of microbial agents in pesticide degradation.

【技术实现步骤摘要】
一种啶虫脒降解菌的保护剂及其制备方法和应用
本专利技术属于微生物降解领域，涉及一种农药降解的微生物菌剂的保护，具体涉及一种啶虫脒降解菌的保护剂及其制备方法和应用。
技术介绍
由于农药的肆意使用，以及缺乏合理的科学监督和使用管理，农药的残留导致了环境的退化，严重破坏了生态系统的平衡，造成了生态系统的结构破坏和功能损失。农药污染是一种面源污染，物理化学修复方法存在一定的缺陷。微生物因为具本身固有的特点，使得其在农药降解中占有重要的地位。应用微生物的方法修复农药残留的污染被公认为是一种廉价、安全、有效且无二次污染的方法。目前国内外针对各种农药污染物筛选分离了大量降解性微生物，并且开发了各种微生物降解制剂及配套产品应用于生物原位修复，然而，生物菌剂的保存一直是个难题,也直接影响到生物菌剂的应用潜力，目前市场上的液体菌剂普遍存在活菌数低、保藏期短、易染菌等问题。而采用干燥等方式保藏，虽然可以延长保藏周期，但是其保藏的成本太高、设备技术复杂。因此研究适宜延长菌剂保藏时间的保护剂，使得菌剂在常温下的保藏期能够延长就显得尤为重要。
技术实现思路
专利技术目的：针对现有技术存在的问题，本专利技术提供一种啶虫脒降解菌的保护剂，该保护剂可以有效解决微生物菌剂活菌数低、保藏期短、易染菌等问题；可有效保持菌剂的性能、提高有效菌存活率、延长菌剂的保藏寿命，并且使得微生物菌剂可以在常温下进行保藏，且其不易染菌。本专利技术还提供一种啶虫脒降解菌的保护剂的制备方法和应用。技术方案：为了实现上述目的，如本专利技术所述的一种啶虫脒降解菌的保护剂，由稳定剂、营养剂和防腐剂和水组成，所述的稳定剂成分为糊精，营养剂成分为柠檬酸钠和氯化钙，防腐剂成分为苯甲酸钠。其中，所述糊精在保护剂中的添加浓度为10～20g/L。其中，所述柠檬酸钠在保护剂中的添加浓度为10～30g/L，氯化钙在保护剂中的添加浓度为10～30g/L。其中，所述苯甲酸钠在保护剂中的添加浓度为30g/L。本专利技术最优的保护剂组成为：柠檬酸钠在保护剂中的添加浓度为20g/L，氯化钙在保护剂中的添加浓度为30g/L，糊精在保护剂中的添加浓度为20g/L，苯甲酸钠在保护剂中的添加浓度为30g/L。在菌液发酵液中柠檬酸钠添加浓度为2g/L，氯化钙添加浓度为3g/L，糊精添加浓度为2g/L，苯甲酸钠添加浓度为3g/L。本专利技术所述的啶虫脒降解菌的保护剂的制备方法，将糊精、柠檬酸钠、氯化钙、苯甲酸钠和水按比例混合制成。本专利技术所述的啶虫脒降解菌的保护剂在保护啶虫脒降解菌剂中的应用。其中，所述啶虫脒降解菌剂为液体菌体。作为优选，所述啶虫脒降解菌的保护剂添加到啶虫脒降解菌剂中使得在菌剂中糊精浓度为1～2g/L、柠檬酸钠浓度为1～3g/L，氯化钙浓度为1～3g/L、苯甲酸钠浓度为3g/L。作为优选，所述保护啶虫脒降解菌剂为有效保持菌剂的性能、提高有效菌存活率、延长菌剂的保藏寿命。作为优选，所述保护啶虫脒降解菌剂为保护啶虫脒降解菌剂在土壤残留啶虫脒农药降解中的应用。本专利技术中无机盐培养基(MM)：NH4NO31.0g/L，KH2PO40.5g/L，K2HPO41.5g/L，NaCl1.0g/L，MgSO4·7H2O0.2g/L，pH7.0。LB培养基：酵母浸出物5.0g/L，蛋白胨10.0g/L，NaCl10.0g/L，H2O1L，pH7.0，固体培养基加入1.5％-2.0％的琼脂。D-2发酵培养基：葡萄糖9g/L，硫酸铵0.9g/L，酵母膏0.3g/L，氯化钠0.1g/L，碳酸钙1g/L，磷酸氢二钾1g/L，七水硫酸镁0.5g/L，pH7.0-7.2。本专利技术中啶虫脒(纯度99.8％)原药由江苏绿叶制药厂提供。啶虫脒降解菌株Pigmentiphagasp.D-2，(BiodegradationofacetamipridbyPigmentiphagasp.D-2andthedegradationpathway；InternationalBiodeterioration&Biodegradation85(2013)95-102)。本专利技术的液体菌剂在存放过程中容易受到污染而使得杂菌数上升而目标菌株数量的减少。防腐剂作为菌剂中的一种添加物质，其能够有效的减少杂菌的污染。本专利技术首先通过添加苯甲酸钠、丙酸钙、山梨酸钾三种具有抑菌防霉作用的防腐剂，对菌株D-2的杂菌率进行计算，筛选出抑菌效果好且活菌数相对较高的防腐剂，然后通过添加不同浓度的防腐剂检测其活菌数以及杂菌数，确定了液体发酵液中防腐剂的添加浓度。通过研究发现降解菌均以苯甲酸钠作为抑菌剂效果最好。能够维持在一个较高的活菌数且不产生杂菌污染。液体菌剂在保存过程中稳定性较差、活菌数下降快。添加保护剂是提高微生物产品有效活菌数，延长其保存期的重要手段。添加保护剂有助于微生物的分散以及生存。本专利技术表明，通过正交试验筛选的菌剂保护剂能够有效提高细菌存活率。有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：本专利技术的农药啶虫脒降解菌菌剂保护剂，稳定剂成分为糊精，其可以维持微生物菌剂内部环境稳定，进一步提高菌株的存活率。营养剂成分为柠檬酸钠和氯化钙，其可以降低微生物菌剂降解性能受环境变化的影响。防腐剂成分为苯甲酸钠，防止微生物菌剂受到杂菌的污染，菌剂的保护剂按照一定浓度有效成分加入到菌剂当中，并置于室温保藏。本专利技术的保护剂可以使农药啶虫脒降解微生物菌剂在常温下保藏，最重要的是有效提高了菌剂常温保存条件下的降解效果，且保藏方法成本低廉、使用方便，有效的减少了运输和保藏的成本，进一步保障了农药啶虫脒降解微生物菌剂在农药降解中的实际应用。本专利技术的保护剂采用苯甲酸钠作为防腐剂，其成本低廉，且能有效防腐杂菌的污染。本专利技术的保护剂采用柠檬酸钠和氯化钙作为营养剂，可有效保持菌剂的性能、延长菌剂的保藏寿命，可以满足微生物菌剂应用于农药残留降解的需求，有实用价值。本专利技术啶虫脒降解菌的保护剂能够有效提高细菌存活率，添加保护剂保存30天的啶虫脒降解菌D-2的发酵液中活菌数能够提高38.70％；添加保护剂保存30天的菌株D-2的液体菌剂(发酵液)在3d内最多能够降解85.32％的浓度为50mg/L的啶虫脒；添加有保护剂的保存45天的菌株D-2的液体菌剂(发酵液)，在10d内能够使得浓度为5mg/kg干土的啶虫脒降解达92.75％。附图说明图1为菌株D-2降解啶虫脒的曲线图；图2为菌株D-2使用不同组合保护剂对啶虫脒的降解实验效果图。具体实施方式以下结合附图和实施例对本专利技术作进一步说明。实施例1啶虫脒降解菌的保护剂：称取糊精20g，柠檬酸钠20g，氯化钙30g，苯甲酸钠30g，混合均匀后，用无菌水定容至1000mL。实施例2啶虫脒降解菌的保护剂：称取糊精20g，柠檬酸钠10g，氯化钙20g，苯甲酸钠30g，混合均匀后，用无菌水定容至1000mL。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种啶虫脒降解菌的保护剂，其特征在于，由稳定剂、营养剂和防腐剂和水组成，所述的稳定剂成分为糊精，营养剂成分为柠檬酸钠和氯化钙，防腐剂成分为苯甲酸钠。/n

【技术特征摘要】
1.一种啶虫脒降解菌的保护剂，其特征在于，由稳定剂、营养剂和防腐剂和水组成，所述的稳定剂成分为糊精，营养剂成分为柠檬酸钠和氯化钙，防腐剂成分为苯甲酸钠。


2.根据权利要求1所述的啶虫脒降解菌的保护剂，其特征在于，所述糊精在保护剂中的添加浓度为10～20g/L。


3.根据权利要求1所述的啶虫脒降解菌的保护剂，其特征在于，所述柠檬酸钠在保护剂中的添加浓度为10～30g/L，氯化钙在保护剂中的添加浓度为10～30g/L。


4.根据权利要求1所述的啶虫脒降解菌的保护剂，其特征在于，所述苯甲酸钠在保护剂中的添加浓度优选为30g/L。


5.一种权利要求1所述的啶虫脒降解菌的保护剂的制备方法，其特征在于，将糊精、柠檬酸钠、氯化钙、苯甲酸钠...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄星，卢家森，杨涵，祁鹏，何健，蒋建东，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32