一种青稞专用根腐病防治菌剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开一种青稞专用根腐病防治菌剂及其制备方法。本发明专利技术所述菌剂，以重量份数计，原料组分主要由荧光假单孢菌Pseudomonas fluorescens Xp‑6菌株(CCTCC M 2018754)发酵液5‑10份、蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus Xp‑4菌株(CCTCC M 2018751)发酵液5‑10份、短小芽孢杆菌Bacillus pumilus Xp‑5菌株(CCTCC M 2018752)发酵液5‑10份、腐熟的畜禽粪便40‑60份、有机膨润土15～20份、黄腐酸钾5～10份、腐殖酸5～10份组成。本发明专利技术所述菌剂绿色环保，其活性菌株耐低温、能适应青稞种植区高海拔、低温的环境，且在青稞根际存活良好，能高效拮抗多种植物病原菌，起到防治青稞根腐病的作用。此外，该菌剂中的活性菌株还具有溶磷、固氮、分泌植物激素等多种功效，能够促进青稞的生长。

A special fungicide for barley root rot control and its preparation

The invention discloses a special barley root rot control fungicide and a preparation method thereof. The bactericide of the invention is mainly composed of Pseudomonas fluorescens XP \u2011 6 strain (cctcc m 2018754) fermentation liquid 5 \u2011 10 parts, Bacillus cereus XP \u2011 4 strain (cctcc m 2018751) fermentation liquid 5 \u2011 10 parts, Bacillus pumilus XP \u2011 5 strain (cctcc m 2018752) fermentation liquid 5 \u2011 10 parts, rotten livestock manure 4 parts by weight 60 parts, 15-20 parts of organobentonite, 5-10 parts of potassium fulvic acid and 5-10 parts of humic acid. The fungicide of the invention is green and environmental friendly, and the active strain is resistant to low temperature, can adapt to the environment of high altitude and low temperature in highland barley planting area, and has good survival in highland barley rhizosphere, can effectively resist a variety of plant pathogens, and has the effect of preventing and controlling highland barley root rot. In addition, the active strain in the fungicide also has the functions of dissolving phosphorus, fixing nitrogen, secreting plant hormone, etc., which can promote the growth of highland barley.

【技术实现步骤摘要】
一种青稞专用根腐病防治菌剂及其制备方法
本专利技术属于农业微生物
，具体涉及一种青稞专用的根腐病防治菌剂及其制备方法。
技术介绍
青稞(HordeumvulgareL.var.nudumHook.f.)即裸大麦，是栽培大麦(HordeumvulgareL.)的变种。在我国青藏高原地区，青稞是最主要的粮食作物，不仅是藏区人民的主食，还具有卓越的药用价值和食疗保健价值。据《晶珠本草》记载，青稞具有祛风寒、清热化湿、宁肺定喘等功效，可治阳虚肾亏等症，是传统的藏药材。现代研究则发现青稞富含多种氨基酸、膳食纤维、维生素、β-葡聚糖以及钙、镁、磷、锌、锰、硒等矿质元素，在降低血脂、增加胃动力、防治高原病、糖尿病等方面有独特的保健作用。因此，近些年来以青稞为原料的保健食品种类越来越多，市场上对青稞的需求量也是逐年增加。然而，根腐病造成了青稞的严重减产，青稞感染根腐病后，根和芽的鲜重和干重、每棵植株谷粒数都下降严重，从而导致其总产量下降。青稞种植区主要分布于是我国西部藏区，这些地区气候一般呈现低温高湿的特点，在这种环境条件下，植物生长缓慢，抵抗病原菌侵染的能力弱，因此会导致病害的大发生。调查发现，近些年来青稞根腐病的发生越来越普遍，其造成的危害也越来越大。目前对于青稞根腐病的防治主要是用化学农药，但是化学农药的弊端不容忽视，首先，化学农药残留会威胁食品安全，影响人民健康；其次，化学农药会对环境生态造成破坏；此外，化学农药还会引起土壤退化，会使土壤质量下降。加之青稞种植区多是高海拔地区，温度低，农药的分解更为缓慢，生态环境也更为脆弱，农药对青稞种植区造成的危害很大。因此，开发出适宜于青稞种植区的农药替代品就显得非常迫切。近些年来，生物防治菌剂的出现提供了新的思路。生物防治菌剂以具有生防菌为主要活性成分。生防菌是一大类具有抑制植物病原微生物生长、从而达到防治植物病害功效的微生物的统称。这些活性菌株一般来源于自然环境，因此不会造成环境问题。除此而外，某些具有生防功效的菌株通常还兼具溶磷、固氮、分泌植物激素的功效，起到促进植物生长的作用。近些年来，生防菌剂产业发展迅速，目前市场上已有多种产品，但是，现有产品在青稞根腐病防治方面功效十分有限，其一是由于微生物适应性的限制，任何微生物，其所能适应的环境都是有限的，而青稞种植区海拔多在2500米以上，生长期日均温度在10℃以下。在这样的环境下，大多数外来微生物是很难正常生长的，因此难以发挥活性；其二是微生物对植物具有一定的选择性，微生物菌剂要发挥效果，首要条件是其能够在植物表面定殖，外来的微生物与青稞的亲和性差，效果极其有限。因此，亟待一种以分离自青稞根际环境中的优良生防菌株(具有高效拮抗植物病原菌的能力)为原材料，通过发酵技术制成菌剂，对于青稞根腐病具有防效，达到减少农药使用的目的。
技术实现思路
本专利技术的主要目的是针对国内外现有技术中，尚没有专门针对青稞根腐病的生物菌剂，现有的其他生物菌剂难以适应青稞种植区特殊的环境条件，导致青稞根腐病的防治过度依赖化学农药，不仅难以有效防控青稞根腐病，更是引起生态环境污染问题以及食品安全问题等现状，探索、发掘和利用新的微生物资源，节约能源及保护环境。本专利技术筛选优良生防菌株，以一定的配比研制青稞专用的根腐病防治菌剂，为青稞生产提供新型“环境友好型”的生防菌剂，以部分替代化学农药。达到既有效防控病害，又减少化学农药带来的环境危害的目的。为了实现上述目的，本专利技术提供了一种青稞专用根腐病防治菌剂，以重量份数计，原料组分主要由荧光假单孢菌PseudomonasfluorescensXp-6菌株发酵液5-10份、蜡样芽孢杆菌BacilluscereusXp-4菌株发酵液5-10份、短小芽孢杆菌BacilluspumilusXp-5菌株发酵液5-10份、腐熟的畜禽粪便40-60份、有机膨润土15～20份、黄腐酸钾5～10份、腐殖酸5～10份组成。进一步地，所述的荧光假单孢菌PseudomonasfluorescensXp-6菌株具有高效拮抗Fusarium、Rhizoctonia、Bipolaris等属的植物病原真菌的作用，现保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCM2018754；所述蜡样芽孢杆菌BacilluscereusXp-4菌株具有高效拮抗Fusarium、Rhizoctonia、Bipolaris等属的植物病原真菌的作用，兼有溶磷、和固氮功能，此外该菌株能产生内毒素，对病原线虫有一定的杀灭作用，现保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCM2018751；所述短小芽孢杆菌BacilluspumilusXp-5菌株具有高效拮抗Fusarium、Rhizoctonia、Bipolaris等属的植物病原真菌的作用，兼有固氮和分泌植物激素功能。现保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCM2018752。进一步地，所述畜禽粪便为牛粪、羊粪、马粪、猪粪、鸡粪中的一种或组合，使用前需充分腐熟，腐熟过程中应保持水分含量在40～65％之间，密闭发酵使其充分腐熟；腐熟后晒干并粉碎，过100～200目筛备用。进一步地，所述有机膨润土、黄腐酸钾及稀土凹凸棒均需在使用前粉碎，过100～200目筛备用。本专利技术还提供了一种青稞专用根腐病防治菌剂的制备方法，包括以下步骤后：(1)根腐病防治菌剂载体的制备：①将畜禽粪便加水堆沤，保持含水量在40～65％之间，密闭发酵后晒干，待含水量低于15％，备用；②将有机膨润、黄腐酸钾、腐殖酸以及腐熟并晒干的畜禽粪便等原料分别除杂粉碎后，过100～200目筛；③将各原料按比例混匀；④将上述混匀的载体在121℃，0.1MPa高温高压条件下灭菌2h冷却至室温后制备为已灭菌的载体，备用；(2)根腐病防治菌剂的制备：①配制LB液体培养基，分别接种荧光假单孢菌Xp-6菌株、蜡样芽孢杆菌Xp-4菌株、短小芽孢杆菌Xp-5菌株，接种量均为5％，在28～30℃，180r/min，培养24～48小时，用血球计数板在显微镜下计算培养液中菌体数量，以此计算培养液中菌体的浓度，当培养液中的菌体浓度达到109cfu/mL时终止培养，将3种菌液按照体积比1:1:1的比例混匀；②将培养好的混合菌液和已灭菌的载体与菌液按比例混合均匀，并在无菌条件下置于28～30℃培养5-7天备用，或在无菌密封容器中常温保存备用。进一步地，所述荧光假单孢菌Xp-6菌株、蜡样芽孢杆菌Xp-4菌株、短小芽孢杆菌Xp-5菌株在培养液中的菌体浓度达到109cfu/mL以上时终止培养。进一步地，所述菌剂适于种植时拌种使用，使用量及使用方法为：①预先将土地翻耕松软，准备播种；②准备好青稞种子，将种子放置在干净的塑料布上，添加所述青稞专用根腐病防治菌剂，搅拌均匀，使用量为每100千克青稞种子使用菌剂5千克；③准备适量的凉开水撒在混匀的种子上、充分拌匀，所述菌剂全部粘附在种子上为止；④将拌好的种子在塑料布上晾至种子松散；⑤按常规方本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种青稞专用根腐病防治菌剂，其特征在于：以重量份数计，原料组分主要由荧光假单孢菌Pseudomonas fluorescens Xp-6菌株发酵液5-10份、蜡样芽孢杆菌Bacilluscereus Xp-4菌株发酵液5-10份、短短小芽孢杆菌Bacillus pumilus Xp-5菌株发酵液5-10份、腐熟的畜禽粪便40-60份、有机膨润土15～20份、黄腐酸钾5～10份、腐殖酸5～10份组成。/n

【技术特征摘要】
20181126 CN 20181141618821.一种青稞专用根腐病防治菌剂，其特征在于：以重量份数计，原料组分主要由荧光假单孢菌PseudomonasfluorescensXp-6菌株发酵液5-10份、蜡样芽孢杆菌BacilluscereusXp-4菌株发酵液5-10份、短短小芽孢杆菌BacilluspumilusXp-5菌株发酵液5-10份、腐熟的畜禽粪便40-60份、有机膨润土15～20份、黄腐酸钾5～10份、腐殖酸5～10份组成。


2.如权利要求1所述一种青稞专用根腐病防治菌剂，其特征在于：所述畜禽粪便为牛粪、羊粪、马粪、猪粪、鸡粪中的至少一种，使用前需腐熟，腐熟过程中应保持水分含量在40～65％之间，密闭发酵使其充分腐熟；腐熟后晒干并粉碎，过100～200目筛备用。


3.如权利要求1所述一种青稞专用根腐病防治菌剂，其特征在于：所述有机膨润土及黄腐酸钾均需在使用前粉碎，过100～200目筛备用。


4.如权利要求1-3中任一种所述的青稞专用根腐病防治菌剂，其特征在于：制备方法为：
(1)根腐病防治菌剂载体的制备：
①将畜禽粪便加水堆沤，保持含水量在40～65％之间，密闭发酵后晒干，待含水量低于15％，备用；
②将有机膨润、黄腐酸钾、腐殖酸以及腐熟并晒干的畜禽粪便等原料分别除杂粉碎后，过100～200目筛；
③将各原料按照比例混匀；
④将上述混匀的载体在121℃，0.1MPa高温高压条件下灭菌2h冷却至室温后制备为已灭菌的载体，备...

【专利技术属性】
技术研发人员：李雪萍，李敏权，李建宏，漆永红，
申请(专利权)人：甘肃省农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：甘肃;62