一种基于二茂铁作为电子供体的适配体生物传感器制备方法及应用技术

一种基于二茂铁作为电子供体的适配体生物传感器制备方法及应用，步骤如下：在活化羧基的氧化石墨烯溶液中加入壳聚糖溶液，然后将该混合溶液修饰在丝网印刷碳电极表面；适配体末端添加特定碱基对设计合成发卡结构，并在两端分别修饰氨基和二茂铁，通过酰胺键的形成将该适配体链有效固定在氧化石墨烯‑壳聚糖/丝网印刷碳电极表面；适配体与目标物的特异性识别诱导适配体构象改变，从而导致二茂铁在磷酸盐缓冲溶液中产生的电流信号发生变化，进而对目标物进行监测。本发明专利技术能实现丙溴磷、甲拌磷、水胺硫磷、氧乐果四种有机磷农药的超灵敏检测，检测时间短，检测限低，为有机磷农药以及其他领域有害物质的检测提供了一种新技术。

Preparation and application of an aptamer biosensor based on ferrocene as electron donor

The preparation method and application of an aptamer biosensor based on ferrocene as electronic donor are as follows: chitosan solution is added into activated carboxy graphene oxide solution, and then the mixed solution is modified on the surface of silk screen printed carbon electrode; a specific base pair is added at the end of aptamer to design and synthesize hairpin structure, and amino group and ferrocene are respectively modified at both ends The formation of amide bond effectively fixed the aptamer chain on the surface of graphene oxide chitosan / screen printed carbon electrode; the specific recognition of aptamer and target induced the conformation change of aptamer, which led to the change of current signal generated by ferrocene in phosphate buffer solution, and then monitored the target. The invention can realize the ultra sensitive detection of four organophosphorus pesticides, namely, propylbromophosphate, phorate, hydrothion and Omethoate, with short detection time and low detection limit, and provides a new technology for the detection of organophosphorus pesticides and harmful substances in other fields.

【技术实现步骤摘要】
一种基于二茂铁作为电子供体的适配体生物传感器制备方法及应用
本专利技术涉及一种基于二茂铁作为电子供体的适配体生物传感器制备方法及应用，属于电化学生物传感器检测

技术介绍
有机磷农药是一种含磷有机化合物，因其高效、低毒、低残留的优点，在农业上被广泛用于防治病虫害和杂草。这些农药的使用可以帮助防止农作物损失。但农产品上残留的过量的有机磷农药可通过食物链进入人体，与乙酰胆碱酯酶结合造成神经功能紊乱，导致瘫痪甚至死亡，对人类健康造成极大危害。丙溴磷、甲拌磷、水胺硫磷和氧乐果是被广泛使用的有机磷农药，在蔬菜产品中经常发生其超标事件。因此，构建一种快速、灵敏、安全可靠的农药残留检测分析方法是十分必要的。在过去的几十年中，已经建立了各种有效的有机磷农药残留检测方法，例如，气相色谱法、高效液相色谱法、酶联免疫吸附法、比色法、荧光法等。但它们大多耗时费力、仪器设备昂贵，操作人员技术要求高，不适用于现场快速分析。为了改善这些问题，电化学适配体传感器由于其良好的选择性、高的灵敏度和价格低廉等优点而得到广泛应用。在电化学适配体传感器的应用过程本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于二茂铁作为电子供体的适配体生物传感器制备方法及应用，所述传感器为丝网印刷碳电极，其特征在于，在表面修饰有氧化石墨烯-壳聚糖复合薄膜的丝网印刷碳电极表面固定二茂铁标记的发卡适配体，完成适配体传感器的构建。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于二茂铁作为电子供体的适配体生物传感器制备方法及应用，所述传感器为丝网印刷碳电极，其特征在于，在表面修饰有氧化石墨烯-壳聚糖复合薄膜的丝网印刷碳电极表面固定二茂铁标记的发卡适配体，完成适配体传感器的构建。


2.如权利要求1所述的一种基于二茂铁作为电子供体的适配体生物传感器制备方法及应用，其特征在于，丝网印刷碳电极预处理：将丝网印刷碳电极工作区域完全浸入0.5M硫酸溶液中，在-1.0～+1.0V电势范围内进行循环伏安扫描5圈，以得到性能稳定的电极。


3.如权利要求1所述的一种基于二茂铁作为电子供体的适配体生物传感器制备方法及应用，其特征在于，制备了氧化石墨烯-壳聚糖混合溶液：氧化石墨烯溶液中加入EDC和NHS，室温条件下孵育活化氧化石墨烯上的羧基，离心清洗后加入壳聚糖溶液，制备1mg/mL氧化石墨烯-壳聚糖溶液。


4.如权利要求1所述的一种基于二茂铁作为电子供体的适配体生物传感器制备方法及应用，其特征在于，发卡适配体的设计合成与标记：在适配体（5′-AGCTTGCTGCAGCGATTCTTGATCGCCACAGAGCT-3′）的3′端添加与5′端前几个碱基对（AGCTTG）互补配对的碱基对CAAGCT，并在两端分别标记氨基（-NH2）和二茂铁（Fc），新合成的适配体链（NH2-A...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭业民，符家韵，史孝杰，孙霞，
申请(专利权)人：山东理工大学，
类型：发明
国别省市：山东;37