维生素D3对绵羊免疫力及抗氧化性能的影响实验方法技术

本发明专利技术公开了维生素D3对绵羊免疫力及抗氧化性能的影响实验方法，包括以下步骤：步骤一，试验动物选择与分组；步骤二，试验日粮与饲养管理；步骤三，生长性能测定；步骤四，血常规的测定；步骤五，抗氧化性能测定；步骤六，数据统计与分析；维生素D3的添加量分别为300IU/kg、600IU/kg、900IU/kg和1200IU/kg；该维生素D3对绵羊免疫力及抗氧化性能的影响实验方法，通过饲喂绵羊不同剂量维生素D3来研究维生素D3对绵羊免疫力及抗氧化性能的影响，为人们提供更优质安全的畜产品，同时豆秸作为粗饲料的开发利用不仅能“变废为宝”，节约饲料资源，对于发展节粮型畜牧养殖业具有重要的研究意义。

Effect of vitamin D3 on immunity and antioxidation of sheep

The invention discloses an experimental method for the effect of vitamin D3 on the immunity and antioxidant performance of sheep, which comprises the following steps: Step 1, selection and grouping of experimental animals; step 2, test diet and feeding management; step 3, determination of growth performance; step 4, determination of blood routine test; step 5, determination of antioxidant performance; step 6, data statistics and analysis; addition of vitamin D3 The dosage of vitamin D3 was 300iu / kg, 600iu / kg, 900iu / kg and 1200iu / kg respectively. The experiment method of the effect of vitamin D3 on the immunity and antioxidant performance of sheep was studied by feeding different doses of vitamin D3 to sheep, so as to provide people with better and safer animal products. At the same time, the development and utilization of soybean straw as roughage could not only \change waste\ To save feed resources is of great significance to the development of grain saving animal husbandry.

【技术实现步骤摘要】
维生素D3对绵羊免疫力及抗氧化性能的影响实验方法
本专利技术涉及维生素D3受体
，具体为维生素D3对绵羊免疫力及抗氧化性能的影响实验方法。
技术介绍
生态环境问题是目前全民关注的焦点，而大豆秸秆的焚烧和浪费对环境造成了很大的污染。我国作为农业大国，有十分丰富的农作物秸秆，对于秸秆的再利用一直是社会关注的问题。秸秆焚烧是最经济、最快捷、最有效的秸秆处理方法。然而，焚烧秸秆会导致燃烧不完全，释放出大量的有毒空气污染物，如挥发性有机化合物、一氧化碳、细颗粒物/可吸入颗粒物、致癌的多环芳香烃等，在日本，研究发现秸秆焚烧与儿童哮喘病有关。秸秆焚烧还会引起诸多环境问题和秸秆营养成分的流失。因此，秸秆资源的再利用问题已经迫在眉睫。微生物发酵饲料在动物生长性能以及免疫力等方面已有一定研究进展，但是，微生物发酵豆秸在饲喂绵羊方面尚没有研究报道。近年来，人们对于维生素D3受体(VDR)的关注越来越多，其生理功能也依次被发现。VDR最早的报道是其在维持骨骼健康和钙稳态方面发挥着重要作用。此外，VDR在炎症、糖尿病、高血压、动脉粥样硬化、细胞增殖和分化、肿瘤组织等方面发挥着重要的作用。维生素D3可以提高VDR的表达能力，VDR水平通过转录和翻译后也可调节维生素D3。由此可见，通过研究组织中的VDR的作用可探索维生素D3的生理病理学作用。关于维生素D3的研究报道已有很多，目前维生素D3在钙磷代谢、免疫调节、细胞凋亡和增殖分化等发面的功能研究取得了一定的研究成果，但是维生素D3对绵羊抗氧化的研究却鲜有报道。因此设计维生素D3对绵羊免疫力及抗氧化性能的影响实验方法是十分有必要的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供维生素D3对绵羊免疫力及抗氧化性能的影响实验方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为了解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：维生素D3对绵羊免疫力及抗氧化性能的影响实验方法，包括以下步骤：步骤一，试验动物选择与分组；步骤二，试验日粮与饲养管理；步骤三，生长性能测定；步骤四，血常规的测定；步骤五，抗氧化性能测定；步骤六，数据统计与分析；其中在上述步骤一中，试验动物选择与分组包括以下步骤：1)选取25只2月龄的公绵羊，体重在20-25kg之间，随机分为5组，每组5个重复，每个重复1只绵羊；2)预饲期10d，试验期70d，所有分组均饲喂基础日粮和微贮豆秸，对照组维生素D3的添加量为0IU/kg，试验组维生素D3的添加量分别为300IU/kg、600IU/kg、900IU/kg和1200IU/kg；其中在上述步骤二中，试验日粮与饲养管理包括以下步骤：1)将豆秸揉搓成1-3cm的长度，将微生物菌剂、红糖和水混匀，然后均匀的撒在秸秆上，密封时用打包机器压紧密封打包，发酵一个月后即可开启使用微生物发酵豆秸；2)每只绵羊的日进食量根据绵羊的日增重随时进行调整，精粗比为1∶2(以干物质为基础)，试验期饲喂2次，以先粗后精顺序饲喂，自由饮水；其中在上述步骤三中，在正试期始末，分别对试验羊进行称重，记录每天的采食情况，计算平均日采食量及平均日增重；其中在上述步骤四中，在试验期的最后一天，用EDTA采血管对所有公羊进行空腹颈静脉采血，采血量为每只3mL；其中在上述步骤五中，抗氧化性能测定包括以下步骤：1)血液采集及处理：在试验期的最后一天，用普通采血管对所有的公羊进行空腹颈静脉采血，采血量为每只5mL，静置，析出血清，离心10min，吸取血清，分装于5mL的离心管中，置于-20℃冰箱冷冻备用；2)组织样品采集及处理：在试验期的最后一天，每组随机挑选4只绵羊进行屠宰取样，分别采集肝脏、肾脏、脾脏、胸腺、肠系膜淋巴、睾丸、附睾置于冻存管中，放入液氮备用；对样品进行称重并研磨成粉末，按组织与生理盐水1∶9的比例制备成10％匀浆，离心后吸取上清备用；3)测定各组织中的CAT、T-SOD和GSH-PX活性和MDA含量及蛋白浓度含量；其中在上述步骤六中，采用SPSS21.0软件中的独立样本t检验对试验数据进行显著性比较，结果以“平均值±标准误差”表示。根据上述技术方案，所述步骤二1)中，微生物菌剂、红糖和水的比例为1∶20∶80，微贮菌剂的益生菌总数≥5×107个/g。根据上述技术方案，所述步骤二2)中，所有试验绵羊的饲养管理均符合动物伦理福利保护规定。根据上述技术方案，所述步骤二2)中，基础日粮由42％的玉米、30％的麦麸、24％的豆粕和4％的预混料组成。根据上述技术方案，所述步骤二2)中，饲喂时间为每天8：00和18：00。根据上述技术方案，所述步骤五1)中，离心速度为2500r/min。根据上述技术方案，所述步骤六中，以P＜0.05为差异显著，P＜0.01为差异极显著。与现有技术相比，本专利技术所达到的有益效果是：该维生素D3对绵羊免疫力及抗氧化性能的影响实验方法，通过饲喂绵羊不同剂量维生素D3来研究维生素D3对绵羊免疫力及抗氧化性能的影响，为人们提供更优质安全的畜产品，同时豆秸作为粗饲料的开发利用不仅能“变废为宝”，节约饲料资源，对于发展节粮型畜牧养殖业具有重要的研究意义。附图说明附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制。在附图中：图1是本专利技术的整体流程图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。请参阅图1，本专利技术提供一种技术方案：维生素D3对绵羊免疫力及抗氧化性能的影响实验方法，包括以下步骤：步骤一，试验动物选择与分组；步骤二，试验日粮与饲养管理；步骤三，生长性能测定；步骤四，血常规的测定；步骤五，抗氧化性能测定；步骤六，数据统计与分析；其中在上述步骤一中，试验动物选择与分组包括以下步骤：1)选取25只2月龄的公绵羊，体重在20-25kg之间，随机分为5组，每组5个重复，每个重复1只绵羊；2)预饲期10d，试验期70d，所有分组均饲喂基础日粮和微贮豆秸，对照组维生素D3的添加量为0IU/kg，试验组维生素D3的添加量分别为300IU/kg、600IU/kg、900IU/kg和1200IU/kg；其中在上述步骤二中，试验日粮与饲养管理包括以下步骤：1)将豆秸揉搓成1-3cm的长度，将微生物菌剂、红糖和水按照1∶20∶80的比例混匀，然后均匀的撒在秸秆上，密封时用打包机器压紧密封打包，发酵一个月后即可开启使用微生物发酵豆秸；2)每只绵羊的日进食量根据绵羊的日增重随时进行调整，精粗比为1∶2(以干物质为基础)，试验期饲喂2次，饲喂时间为每天8：00和18：00，以先粗后精顺序饲喂，自由饮水，所有试验绵本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.维生素D3对绵羊免疫力及抗氧化性能的影响实验方法，包括以下步骤：步骤一，试验动物选择与分组；步骤二，试验日粮与饲养管理；步骤三，生长性能测定；步骤四，血常规的测定；步骤五，抗氧化性能测定；步骤六，数据统计与分析；其特征在于：/n其中在上述步骤一中，试验动物选择与分组包括以下步骤：/n1)选取25只2月龄的公绵羊，体重在20-25kg之间，随机分为5组，每组5个重复，每个重复1只绵羊；/n2)预饲期10d，试验期70d，所有分组均饲喂基础日粮和微贮豆秸，对照组维生素D3的添加量为0IU/kg，试验组维生素D3的添加量分别为300IU/kg、600IU/kg、900IU/kg和1200IU/kg；/n其中在上述步骤二中，试验日粮与饲养管理包括以下步骤：/n1)将豆秸揉搓成1-3cm的长度，将微生物菌剂、红糖和水混匀，然后均匀的撒在秸秆上，密封时用打包机器压紧密封打包，发酵一个月后即可开启使用微生物发酵豆秸；/n2)每只绵羊的日进食量根据绵羊的日增重随时进行调整，精粗比为1∶2(以干物质为基础)，试验期饲喂2次，以先粗后精顺序饲喂，自由饮水；/n其中在上述步骤三中，在正试期始末，分别对试验羊进行称重，记录每天的采食情况，计算平均日采食量及平均日增重；/n其中在上述步骤四中，在试验期的最后一天，用EDTA采血管对所有公羊进行空腹颈静脉采血，采血量为每只3mL；/n其中在上述步骤五中，抗氧化性能测定包括以下步骤：/n1)血液采集及处理：在试验期的最后一天，用普通采血管对所有的公羊进行空腹颈静脉采血，采血量为每只5mL，静置，析出血清，离心10min，吸取血清，分装于5mL的离心管中，置于-20℃冰箱冷冻备用；/n2)组织样品采集及处理：在试验期的最后一天，每组随机挑选4只绵羊进行屠宰取样，分别采集肝脏、肾脏、脾脏、胸腺、肠系膜淋巴、睾丸、附睾置于冻存管中，放入液氮备用；对样品进行称重并研磨成粉末，按组织与生理盐水1∶9的比例制备成10％匀浆，离心后吸取上清备用；/n3)测定各组织中的CAT、T-SOD和GSH-PX活性和MDA含量及蛋白浓度含量；/n其中在上述步骤六中，采用SPSS 21.0软件中的独立样本t检验对试验数据进行显著性比较，结果以“平均值±标准误差”表示。/n...

【技术特征摘要】
1.维生素D3对绵羊免疫力及抗氧化性能的影响实验方法，包括以下步骤：步骤一，试验动物选择与分组；步骤二，试验日粮与饲养管理；步骤三，生长性能测定；步骤四，血常规的测定；步骤五，抗氧化性能测定；步骤六，数据统计与分析；其特征在于：
其中在上述步骤一中，试验动物选择与分组包括以下步骤：
1)选取25只2月龄的公绵羊，体重在20-25kg之间，随机分为5组，每组5个重复，每个重复1只绵羊；
2)预饲期10d，试验期70d，所有分组均饲喂基础日粮和微贮豆秸，对照组维生素D3的添加量为0IU/kg，试验组维生素D3的添加量分别为300IU/kg、600IU/kg、900IU/kg和1200IU/kg；
其中在上述步骤二中，试验日粮与饲养管理包括以下步骤：
1)将豆秸揉搓成1-3cm的长度，将微生物菌剂、红糖和水混匀，然后均匀的撒在秸秆上，密封时用打包机器压紧密封打包，发酵一个月后即可开启使用微生物发酵豆秸；
2)每只绵羊的日进食量根据绵羊的日增重随时进行调整，精粗比为1∶2(以干物质为基础)，试验期饲喂2次，以先粗后精顺序饲喂，自由饮水；
其中在上述步骤三中，在正试期始末，分别对试验羊进行称重，记录每天的采食情况，计算平均日采食量及平均日增重；
其中在上述步骤四中，在试验期的最后一天，用EDTA采血管对所有公羊进行空腹颈静脉采血，采血量为每只3mL；
其中在上述步骤五中，抗氧化性能测定包括以下步骤：
1)血液采集及处理：在试验期的最后一天，用普通采血管对所有的公羊进行空腹颈静脉采血，采血量为每只5mL，静置，析出血清，离心10min，吸取血清，分装于5mL的离心管中，置于-20℃冰箱冷冻备用；
2)组织样品采集及处理：在试验期的最后一天...

【专利技术属性】
技术研发人员：庞全海，李振，王天元，陈昱筱，王帅，秦红，张娟，梁睿，李颖平，赵礼军，谢莹，赵红霞，赵敏，王栋梁，李候梅，禹波，杨平，
申请(专利权)人：山西农业大学，
类型：发明
国别省市：山西;14