一种用于分离胰岛组织的装置制造方法及图纸

本实用新型专利技术提供一种用于分离胰岛组织的装置及其方法，包括用于容纳胰腺器官并可进行消化操作的消化罐；用于加热消化液的水浴锅；用于与胰岛组织表面细胞结合的带抗体磁珠；用于分离胰腺消化后组织中阳性组织和阴性组织的磁分离器；用于接收胰腺消化后经磁分离器分离后的阴性组织、消化液和带抗体磁珠的第一容器；用于接收经磁分离器分离后的阳性组织、缓冲液和带抗体磁珠的第二容器；用于接收缓冲液和带抗体磁珠的第三容器；本实用新型专利技术原理简单，制备容易，使用方便，胰岛组织分离结果理想，可达到规模化批量生产，起到促进胰岛组织的分离，促进临床和科研领域的胰岛移植研究和应用。

A device for separating islet tissue

The utility model provides a device and a method for separating islet tissue, including a digestion tank for accommodating pancreas organ and carrying out digestion operation; a water bath for heating digestion liquid; an antibody magnetic bead for binding with cells on the surface of islet tissue; a magnetic separator for separating positive and negative tissues in digestive tissues of pancreatic gland; a magnetic separator for receiving digestive tissues of pancreas The utility model has the advantages of simple principle, easy preparation, convenient use, ideal islet tissue separation result, and can reach the standard The model batch production promotes the separation of islet tissue and the research and application of islet transplantation in clinical and scientific research fields.

【技术实现步骤摘要】
一种用于分离胰岛组织的装置
本技术涉及免疫磁珠细胞分离技术，特别涉及一种用于分离胰腺中胰岛组织的装置及其方法。
技术介绍
免疫磁珠分离技术(ImmunomagneticBeadsSeparationTechniques，IMBS)最早出现于20世纪70年代，基本原理是将磁性材料合成的均一超顺磁微球与经过亲和层析的抗体结合，从混合悬浊液中捕捉和分离目标物质，并用于多种微生物和分子生物学的检测，它被认为是分离目标分析物敏感而简单的方法。其检出限理论上可以达到每克1-10个细菌。进入21世纪后，IMBS在国际和国内的应用也逐渐增多。Dynabeads分离的大肠埃希氏菌O157免疫磁珠就曾被列入中国国家标准。BeadRetrieverTM全自动免疫磁珠分选系统(BeadRetrieverTMautomaticmagneticactivatedcellsortingsystem)是由此发展而来的自动化操作系统。整个方案基于DynabeadsR免疫磁珠分选技术(IMS)，配合Dynal701全自动磁珠分选机能够快速纯化和浓缩各种生物样本，完成对致病菌的富集和分离。该系统使用InvitrogenTM公司提供的DynabeadsR，主要包括沙门氏菌(DynabeadsRanti-Salmonella)，李斯特氏菌(DynabeadsRanti-Listeria)，O157H7大肠埃希氏菌(DynabeadsRanti-E.coliO157)等。细胞移植是指将人体器官、组织来源的具有正常生理功能的适量游离的活细胞、组织或细胞团移植到受体(人或动物)的血管、体腔或组织器官内，以达到治疗目的的技术。细胞移植的临床应用日益广泛，其中骨髓与造血干细胞移植备受瞩目，可用于治疗遗传性联合免疫缺陷病、重症地中海贫血等遗传性疾病、重症再生障碍性贫血，以及包括各种白血病在内的血液系统恶性肿瘤等疾病。此外，还有胰岛细胞团移植治疗1型糖尿病，肝细胞移植治疗重症肝炎肝昏迷，脾细胞移植治疗重症血友病甲，以及睾丸Leydig细胞移植治疗男性性功能低下(低睾酮血症)等。细胞移植(如胰岛移植、骨髓移植、干细胞移植、肝细胞移植等)在糖尿病、癌症、肝病、遗传病及组织损伤等疾病的治疗上显示出越来越高的应用价值，在部分治疗领域，如糖尿病、白血病等方面已大大超越了大器官移植和放化疗的治疗手段，已成为目前外科器官移植发展的重要方向，是国家863重点资助方向之一，属于新兴生物医药产业，对组织和细胞的研究与应用是心血管疾病、糖尿病、神经系统疾病、肝脏疾病等治疗的新途径和新希望，是医学领域国际竞争的热点。该新兴生物医药产业具有高科技、高附加值、成本低、污染少等优势，是政府重点扶持方向。胰岛组织或细胞团移植是将分离得到的来源于供体或自体的胰岛组织或细胞团，再移植至受体的肝脏血窦、肾被膜、体腔内或其他可血管化的部位，移植的胰岛可实现根据受体血糖变化而实时分泌胰岛素、胰高血糖素和C肽等，从而达到精确调控患者血糖的目的。胰岛移植是根治临床1型糖尿病和2型糖尿病终末期患者的好方法，胰岛移植因其对胰腺供体要求低、移植操作简单，几乎不需要手术、副作用小等优点而备受临床医师的关注；而全胰腺移植则对供体要求高、外分泌腺处理复杂，术后并发症多。近几年来随着新型免疫抑制方案的应用，胰岛的基础研究、胰岛分离、纯化的数量与质量也得到了很大的提升，胰岛移植在糖尿病的临床治疗中获得了重大进展；据2012年报道，胰岛移植后5年胰岛素不依赖率已经达到了50％，与全胰腺移植(52％)已没有差异。医学界一直将胰岛移植推崇为治疗糖尿病最理想的方法，胰岛移植的临床应用已成为不可阻挡的趋势，正如世界胰腺移植的鼻祖Sutherland医生在世界移植大会上所预言的，胰岛移植正取代胰腺移植在世界上逐步推广应用，成为糖尿病患者的福音。在未来几十年里，胰岛移植将可能成为治疗血糖不稳定1型糖尿病和2型糖尿病终末期患者的最佳选择。胰岛移植治疗血糖不稳型1型糖尿病和2型糖尿病终末期患者的研究已在全世界走过了40多年，尤其在2000年加拿大Sharpiro教授领导的团队公布了“Edmonton方案”以后。事实证明，胰岛移植不仅能控制病人的血糖，更重要的是能够抑制和改善病人并发症的发生。但是Edmonton胰岛移植治疗计划还不够完善，病人能长期完全脱离胰岛素依赖的结果还不是很理想。胰岛移植的临床应用在近几年进展很快，早在2004年，由美国NIH投入1.7亿美元开启了临床胰岛分离及移植程序的标准化和7个新的免疫治疗方案的评估项目，其中项目名为CIT07的免疫治疗方案进行了48例临床患者的治疗，术后患者全部脱离胰岛素治疗，部分病人完全不用胰岛素治疗已超过10年，胰岛生存时间已达到全胰腺移植水平。加拿大、欧洲和澳大利亚等国家已批准胰岛移植进入医疗保险，自体胰岛移植在美国也早已进入医疗保险。目前随着人口老龄化的加剧，国内糖尿病、胰腺疾病等的发病率逐年上升，细胞移植技术也必将在国内将逐渐蓬勃发展起来。胰岛分离纯化的目的是从胰腺消化后的组织中提取完整的胰岛组织或细胞团。目前采用的分离方法主要是密度梯度离心的方法，该方法的主要原理是胰岛细胞团比外分泌/导管组织有一个更低的密度。如果这些类型细胞在胰腺消化过程中已被有效分离，则我们可以通过密度梯度的方法将胰岛细胞团纯化出来。在人和大动物胰岛的大规模纯化中最重要的进展是使用COBE2991细胞分离机进行胰岛的纯化。该离心机最初是专门用于分离血液中不同的细胞成分，但基于胰腺消化后不同组织的密度差，该机器也适用于分离人胰岛。密度梯度离心(densitygradientcentrifugation)亦称平衡密度梯度离心法。用离心机对小分子物质溶液，长时间加一个离心力场达到沉降平衡，在沉降池内从液面到底部出现一定的密度梯度。若在该溶液里加入少量大分子或组织、细胞溶液，则溶液内比溶剂密度大的部分就产生沉降，比溶剂密度小的部分就会上浮，最后在离心力和浮力平衡的位置，集聚形成沉降物的带状物。利用这种现象，可测定核酸或蛋白质等的浮游密度，或根据其差别进行分离细胞或组织的一种沉降平衡法。自1958年米西尔逊(M.Meselson)，斯塔尔(F.W.Stahl)，维诺格拉德(J.Vinograd)成功地分离了〔15N〕DNA和〔14N〕DNA以来，该法取得许多成果。该方法多采用浓氯化铯溶液，所以有时也使用氯化铯浓度梯度离心法这个名称，还可采用氯化铷、溴化铯等溶液。在细胞或组织等以纯化为目的的分离，也常使用离心机，利用预先制备好的蔗糖等密度梯度液的密度差进行分离。其工作原理为：不同颗粒之间存在沉降系数差时，在一定离心力作用下，颗粒各自以一定速度沉降，在不同的密度梯度区域上形成区带。密度梯度介质应预先形成，介质的最大密度要小于所有样品颗粒的密度。密度梯度如果是不连续的，组织会在密度相近的密度界面重叠；密度梯度也可以是连续的密度梯度，这样细胞可以根据梯度液的精确密度进行有效的分离。对于密度梯度溶液的配制，国外有一些相关的文献介绍，其中一些已用于胰岛纯化，包括蔗糖、聚蔗糖(Ficoll)、透析聚本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于分离胰岛组织的装置，包括用于容纳胰腺器官并可进行消化操作的消化罐；用于加热消化液的水浴锅；用于与胰岛组织表面细胞结合的带抗体磁珠，其特征在于，/n还包括用于分离胰腺消化后组织中阳性组织和阴性组织的磁分离器；/n用于接收经磁分离器分离后的阴性组织、消化液和带抗体磁珠的第一容器；/n用于接收经磁分离器分离后的阳性组织、缓冲液和带抗体磁珠的第二容器；/n用于接收缓冲液和带抗体磁珠的第三容器；/n所述消化罐、水浴锅、第一容器和磁分离器通过第一导管连通，所述第二容器、第三容器和磁分离器通过第二导管连通，所述第三容器和第一容器通过第三导管连通，所述第一导管、第二导管和第三导管上均设有蠕动泵。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于分离胰岛组织的装置，包括用于容纳胰腺器官并可进行消化操作的消化罐；用于加热消化液的水浴锅；用于与胰岛组织表面细胞结合的带抗体磁珠，其特征在于，
还包括用于分离胰腺消化后组织中阳性组织和阴性组织的磁分离器；
用于接收经磁分离器分离后的阴性组织、消化液和带抗体磁珠的第一容器；
用于接收经磁分离器分离后的阳性组织、缓冲液和带抗体磁珠的第二容器；
用于接收缓冲液和带抗体磁珠的第三容器；
所述消化罐、水浴锅、第一容器和磁分离器通过第一导管连通，所述第二容器、第三容器和磁分离器通过第二导管连通，所述第三容器和第一容器通过第三导管连通，所述第一导管、第二导管和第三导管上均设有蠕动泵。


2.如权利要求1所述的一种用于分离胰岛组织的装置，其特征在于，所述的磁分离器设有第一通道、第二通道、第三通道和第四通道，所述第一通道、第二通道、第三通道和第四通道之间具有互通通道，所述多极磁分离器位于互通通道靠近第三通道和第四通道的一侧设有电磁铁。


3.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：傅红兴，徐福远，潘钦迪，赵应征，蒋煊，余泳华，刘成洋，
申请(专利权)人：温州市怡康细胞移植技术开发有限公司，
类型：新型
国别省市：浙江;33