一种新型的抗体组合物、分离的核酸和制备方法技术

本发明专利技术公开了一种新型的抗体组合物、分离的核酸和制备方法，涉及抗体技术领域。本发明专利技术公开的抗体组合物其包括：多种抗体；在多种抗体中，任意两种抗体具有不同的可变区和相同的恒定区，或任意两种抗体具有不同的可变区和不同的恒定区，不同的抗体结合不同的抗原表位。该抗体组合物在用于检测抗原时，可以避免由于被检测物质出现某抗原表位改变而导致的假阴性结果，从而提高检测结果的成功率及准确性。

A new antibody composition, isolated nucleic acid and preparation method

The invention discloses a novel antibody composition, a separated nucleic acid and a preparation method, relating to the technical field of antibody. The antibody composition of the invention includes: a variety of antibodies; in a variety of antibodies, any two antibodies have different variable regions and the same constant regions, or any two antibodies have different variable regions and different constant regions, and different antibodies combine different antigen epitopes. When the antibody composition is used for antigen detection, the false negative result caused by the change of an antigen epitope of the detected substance can be avoided, so as to improve the success rate and accuracy of the detection result.

【技术实现步骤摘要】
一种新型的抗体组合物、分离的核酸和制备方法本申请要求于2018年9月19日提交于中国专利局的申请号为CN201811093390.6、名称为“一种新型的抗体组合物、分离的核酸和制备方法”的中国专利申请的优先权，其全部内容通过引用结合在本申请中。本申请要求于2018年9月19日提交于中国专利局的申请号为CN201811093389.3、名称为“一种新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂及其制备方法”的中国专利申请的优先权，其全部内容通过引用结合在本申请中。
本专利技术涉及抗体
，具体而言，涉及一种新型的抗体组合物、分离的核酸和制备方法。
技术介绍
生命科学领域使用的抗体试剂分为单克隆抗体试剂和多克隆抗体试剂。单克隆抗体试剂和多克隆抗体试剂的制备均已被业内技术人员所熟知。单克隆抗体试剂的制备的其中一种经典的方法是：首先通过抗原免疫动物，然后将免疫后动物的B细胞与瘤细胞融合，通过形成杂交瘤细胞，进一步筛选得到阳性单克隆杂交瘤细胞株，使用阳性杂交瘤细胞制备腹水，通过腹水纯化获得大量单抗；或者分析阳性杂交瘤细胞株抗体基因序列，获得抗体序列后构建抗体表达载体，转染细胞，培养后收集细胞培养上清，经纯化获得大量单克隆抗体。阳性抗体序列获得的方式不限于来自于杂交瘤，也可以通过抗体展示技术及单细胞测序技术等获得。多克隆抗体试剂的制备相对于单克隆抗体试剂的制备较简单一些，通过免疫动物后，采集血清，血清即可作为多克隆抗体试剂来使用，或者从血清中将抗体分离出来，制备成多克隆抗体试剂。单克隆抗体试剂的缺点包括但不限于如下：识别抗原表位单一，灵敏度不如多克隆抗体，且抗原表位容易受实验过程中理化性质的影响，常导致抗原表位改变，使单克隆抗体试剂无法识别或敏感程度降低。多克隆抗体试剂的缺点包括但不限于如下：特异性差，常有非特异反应和交叉反应。组成成分复杂，标准化生产较难，生产批次间存在差异等。鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种新型的抗体组合物。本专利技术的另一目的在于提供一种分离的核酸。本专利技术的另一目的在于提供一种载体。本专利技术的另一目的在于提供一种重组细胞或重组菌。本专利技术的另一目的在于提供制备抗体组合物的方法。本专利技术的另一目的在于提供一种检测试剂。本专利技术是这样实现的：一方面，本专利技术提供了一种新型的抗体组合物，其包括：多种抗体；在所述多种抗体中，任意两种抗体具有不同的可变区和相同的恒定区，或任意两种抗体具有不同的可变区和不同的恒定区；不同的抗体结合不同的抗原表位。使用单一抗体试剂检测抗原时，若某抗原表位改变或发生突变，则导致结果出现假阴性，这种检测方式的检测结果的准确性会降低，且检出的成功率也低。本专利技术提供的抗体组合物包括有可结合不同的抗原表位的多种抗体，相较于使用单一抗体试剂检测抗原时，使用本专利技术的抗体组合物用于检测抗原时，多种抗体可以结合不同的抗原，可以避免由于被检测物质出现某抗原表位改变而导致的假阴性结果，从而提高检测结果的成功率及准确性。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，所述抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，在所述多种抗体中，任意两种抗体的可变区具有相同的FR区(即骨架区)。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，在所述多种抗体中，任意两种抗体的可变区具有不同的FR区。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，所述抗体为完整结构的抗体或基因工程抗体例如scFv、Fab、Fab’和F(ab)’2等。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，在所述多种抗体中，不同的抗体结合同一抗原的不同抗原表位。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，不同的抗体结合人IgG1-Fc抗原的不同抗原表位。人IgG1-Fc抗原是指人IgG1的Fc片段上的区域。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，人IgG-Fc抗原的不同抗原表位包括人IgG1-Fc-CH2抗原表位和人IgG1-Fc-CH3抗原表位。人IgG1-Fc-CH2抗原表位是指人IgG1抗体的Fc片段上的CH2区域；人IgG1-Fc-CH3抗原表位是指人IgG1抗体的Fc片段上的CH3区域。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，所述多种抗体包括第一抗体和第二抗体，所述第一抗体的重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基序列分别如SEQIDNO.1-3所示；所述第一抗体的轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基序列分别如SEQIDNO.4-6所示；所述第二抗体的重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基序列分别如SEQIDNO.11-13所示；所述第二抗体的轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基序列分别如SEQIDNO.14-16所示。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，所述第一抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO.7所示，所述第一抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO.9所示。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，所述第二抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO.17所示，所述第二抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO.19所示。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，在所述多种抗体中，不同的抗体结合不同抗原的不同抗原表位。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，不同抗原包括：同源抗原、同家族抗原的不同亚型，以及具有相同或相似化学基团的物质中的一种或多种。同源抗原例如可以是不同物种中的具有同源性的蛋白例如人CD40和鼠CD40，还可以是其他的具有结构或序列相似性的蛋白或肽。同家族抗原的不同亚型例如可以是同种蛋白的不同亚型例如人IgG1和IgG2等。具有相同或相似化学基团的物质例如可以是三苯甲烷类、硝基咪唑类、氨基糖甙类等。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，所述多种抗体中的每种抗体标记有标记物或均不带有标记物。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，所述标记物选自荧光标记物、酶标记物和放射性核素标记物。进一步，在本专利技术的一些实施方案中，所述荧光标记物选自Alexa350、Alexa405、Alexa430、Alexa488、Alexa555、Alexa647、AMCA、氨基吖啶、BODIPY630/650、BODIPY650/665、BODIPY-FL、BODIPY-R6G、BODIPY-TMR、BODIPY-TRX、5-羧基-4’,5’-二氯-2’,7’-二甲氧基荧光素、5-羧基-2’,4’,5’,7’-四氯荧光素、5-羧基荧光素、5-羧基罗丹明、6-羧基罗丹明、6-羧基四甲基罗丹明、CascadeBlue、Cy2、Cy3、Cy5、Cy7、6-FAM、丹磺酰氯、荧光素、HEX、6-JOE、NBD(7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑)、OregonGreen488、OregonGreen500、OregonGreen514、PacificBlue、邻苯二甲酸、对苯二甲酸、间苯二甲酸、甲酚固紫、甲酚蓝紫本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新型的抗体组合物，其特征在于，其包括：/n多种抗体；在所述多种抗体中，任意两种抗体具有不同的可变区和相同的恒定区，或任意两种抗体具有不同的可变区和不同的恒定区；不同的抗体结合不同的抗原表位。/n

【技术特征摘要】
20180919 CN 2018110933906;20180919 CN 2018110933891.一种新型的抗体组合物，其特征在于，其包括：
多种抗体；在所述多种抗体中，任意两种抗体具有不同的可变区和相同的恒定区，或任意两种抗体具有不同的可变区和不同的恒定区；不同的抗体结合不同的抗原表位。


2.根据权利要求1所述的新型的抗体组合物，其特征在于，所述抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。


3.根据权利要求2所述的抗体组合物，其特征在于，在所述多种抗体中，任意两种抗体的可变区具有相同的FR区。


4.根据权利要求2所述的抗体组合物，其特征在于，在所述多种抗体中，任意两种抗体的可变区具有不同的FR区。


5.根据权利要求1-4任一项所述的抗体组合物，其特征在于，在所述多种抗体中，不同的抗体结合同一抗原的不同抗原表位；
优选地，不同的抗体结合人IgG1-Fc抗原的不同抗原表位；
优选地，人IgG-Fc抗原的不同抗原表位包括人IgG1-Fc-CH2抗原表位和人IgG1-Fc-CH3抗原表位；
优选的，所述多种抗体包括第一抗体和第二抗体，所述第一抗体的重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基序列分别如SEQIDNO.1-3所示；所述第一抗体的轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基序列分别如SEQIDNO.4-6所示；所述第二抗体的重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基序列分别如SEQIDNO.11-13所示；所述第二抗体的轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基序列分别如SEQIDNO.14-16所示；
优选的，所述第一抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO.7所示，所述第一抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO.9所示；
优选的，所述第二抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO.17所示，所述第二抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO.19所示。


6.根据权利要求1-4任一项所述的抗体组合物，其特征在于，在所述多种抗体中，不同的抗体结合不同抗原的不同抗原表位。


7.根据权利要求6所述的抗体组合物，其特征在于，不同抗原包括：同源抗原、同家族抗原的不同亚型，以及具有相同或相似化学基团的物质中的一种或多种。


8.根据权利要求1-4任一项所述的抗体组合物，其特征在于，所述多种抗体中的每种抗体标记有标记物或均不带有标记物。


9.根据权利要求8所述的抗体组合物，其特征在于，所述标记物选自荧光标记物、酶标记物和放射性核素标记物。


10.根据权利要求9所述的抗体组合物，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：程晓东，
申请(专利权)人：程晓东，杭州来伯生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：河北;13