样品中细胞的分类和计数方法、生物测定试剂盒和微孔阵列板技术

提供了一种对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的方法。该方法包括将多个细胞分别引入多个微孔中，其中，在至少80％的所述多个微孔中，不超过一个细胞被引入多个微孔中相应的一个微孔中；向分别位于多个微孔中的多个细胞单独施加第一电流；检测在多个微孔中分别施加有第一电流的多个细胞的第一阻抗值；基于该第一阻抗值的第一分布将多个细胞的第一组分类为第一类型；以及计数多个细胞的第一组的总数。

Cell classification and counting methods, bioassay kits and microporous array plates in samples

A method for classifying and counting cells in a sample containing cells suspended in an electrolyte is provided. The method includes introducing a plurality of cells into a plurality of micropores respectively, wherein at least 80% of said plurality of micropores, not more than one cell is introduced into a corresponding micropore in a plurality of micropores; applying a first current to a plurality of cells respectively in a plurality of micropores; detecting the first impedance value of a plurality of cells respectively applying a first current in a plurality of micropores; based on The first distribution of the first impedance value classifies the first group of multiple cells into the first type; and counts the total number of the first group of multiple cells.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】样品中细胞的分类和计数方法、生物测定试剂盒和微孔阵列板
本专利技术涉及生物测定技术，更具体地说，涉及对样品中的细胞进行分类和计数的方法、生物测定试剂盒和微孔阵列板。
技术介绍
红细胞、血小板和白细胞被悬浮在外周血的血浆中。由于检查这些细胞的血液分析可以获得大量临床信息，因此经常检查样本。例如，正常白细胞可分为五种类型：淋巴细胞、单核细胞、嗜碱细胞、嗜酸细胞和中性粒细胞。在正常的外周血中，这些类型的血细胞以一定的比例存在。但是，如果受试者患有疾病，可能会出现特定类型的血细胞数量增加或减少的情况。因此，在临床实验室检测领域，通过对白细胞进行分类和计数，可以获得对疾病诊断非常有用的信息。
技术实现思路
在一个方面中，本专利技术提供了一种对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的方法，包括将多个细胞分别引入多个微孔中，其中，在至少80％的所述多个微孔中，不超过一个细胞被引入多个微孔中相应的一个微孔中；向分别位于多个微孔中的多个细胞单独施加第一电流；检测在多个微孔中分别施加有第一电流的多个细胞的第一阻抗值；基于该第一阻抗值的第一分布将多个细胞的第一组分类为第一类型；以及计数多个细胞的第一组的总数。可选地，该第一电流是直流电或频率不超过100kHz的低频交流电。可选地，该方法还包括向分别位于该多个微孔中的多个细胞单独施加第二电流，该第二电流为高频交流电；检测在所述多个微孔中分别施加有该第二电流的多个细胞的第二阻抗值；基于该第二阻抗值的第二分布将该多个细胞的第二组分类为第二类型；以及计数该多个细胞的第二组的总数。可选地，第二阻抗值的第二分布识别多个细胞的第二组和多个细胞的第三组；该方法还包括基于该第二阻抗值的第二分布将多个细胞的第三组分类为第三类型；以及计数多个细胞的第三组的总数。可选地，高频交流电的频率大于1兆赫。可选地，该多个微孔中的每一个的直径在15μm至40μm的范围内，深度在25μm至40μm的范围内；该多个微孔中的两个相邻微孔之间的距离在25μm至40μm的范围内。可选地，将多个细胞分别引入多个微孔中包括将包含悬浮在电解质中的细胞的样品引入包含多个微孔的微孔阵列板上；并且向样品施加电场以将多个细胞分别驱动到多个微孔中。可选地，电场通过第一导电层和第二导电层分别施加在微孔阵列板的相对两侧，多个微孔夹在第一导电层和第二导电层之间。可选地，该细胞包括白细胞，该白细胞包括淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞中的一种或其组合。可选地，在至少95％的多个微孔中，不超过一个细胞被引入多个微孔中相应的一个微孔中。另一方面，本专利技术提供了一种用于对样品中的细胞进行分类和计数的生物测定试剂盒，该样品包括悬浮在电解质中的细胞，该试剂盒包括微孔阵列板；以及使用生物测定试剂盒对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的方法的说明；其中微孔阵列板包括基底；在所述基底上的限定多个微孔的微孔壁层；以及在基底上的包括多对电极的电极层；其中该多对电极中相应的一对位于多个微孔中相应的一个微孔中，并且包括第一电极和第二电极。可选地，生物测定试剂盒还包括一个或多个电源调节器，用于向分别位于多个微孔中的多个细胞单独施加电流。一个或多个电源调节器能够产生至少两种具有不同频率的电流。可选地，至少两种具有不同频率的电流包括第一类型电流和第二类型电流；第一类电流是直流电或频率不超过100kHz的低频交流电；第二类型电流是频率大于1MHz的高频交流电。可选地，微孔阵列板还包括基底上的第一导电层；在第一导电层的远离基底的一侧上的钝化层；在微孔壁层的远离第一导电层的一侧上的第二导电层。其中，所述多个微孔和微孔壁层夹在第一导电层和第二导电层之间。可选地，生物测定试剂盒还包括数据分析器，该数据分析器被配置为基于分别从施加有至少两种具有不同频率的电流的多个微孔检测到的信号来计数不同类型的细胞。可选地，多个微孔中的每一个的直径在15μm至40μm范围内，多个微孔中的每一个的深度在25μm至40μm范围内；多个微孔中的两个相邻微孔之间的距离在25μm至40μm的范围内。任选地，生物测定试剂盒是用于分类和计数样品中白细胞的试剂盒，所述白细胞包含淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞中的一种或其组合。在另一方面，本专利技术提供了一种微孔阵列板，包括基底；在所述基底上的限定多个微孔的微孔壁层；以及在基底上的包括多对电极的电极层；其中，该多对电极中相应的一对位于多个微孔中相应的一个微孔中，并且包括第一电极和第二电极。多个微孔中相应的一个的直径足以容纳样品中的单个细胞并且不足以容纳两个或多个细胞。可选地，微孔阵列板还包括基底上的第一导电层；在第一导电层的远离基底的一侧上的钝化层；在微孔壁层的远离第一导电层的一侧上的第二导电层。其中，所述多个微孔和微孔壁层夹在第一导电层和第二导电层之间。可选地，微孔阵列板还包括在微孔壁层和第二导电层之间的间隔层。附图说明以下附图仅仅是根据各种公开的实施例的用于说明目的的示例，并不旨在限制本专利技术的范围。图1是根据本公开的一些实施例中微孔阵列板的平面图。图2是图1中圆圈区域的放大视图。图3是根据本公开的一些实施例中的微孔阵列板的一部分的截面图。图4是根据本公开的一些实施例中的微孔内部的等效电路图。图5示出了根据本公开的一些实施例中将细胞引入多个微孔的过程。具体实施方式现在将参照以下实施例更具体地描述本公开。应当注意，这里给出的一些实施例的以下描述仅仅是以说明和描述为目的。这些描述并非旨在是详尽的或将本专利技术限于公开的精确形式。在对样品中不同类型的细胞进行分类和计数的传统方法中，通常使用流式细胞术技术来形成单细胞流。然后，当流体通过检测器时，检测单个细胞流中的细胞。传统方法需要庞大的仪器，这些仪器通常很昂贵并且需要专业技术人员的定期维护。传统方法不适用于护理点使用或家庭使用。因此，本公开尤其提供了对样品中的细胞进行分类和计数的方法，生物测定试剂盒和微孔阵列板，其基本上消除了由于相关技术的限制和缺点导致的一个或多个问题。在一个方面中，本公开提供了一种对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的方法。在一些实施例中，所述方法包括将多个细胞分别引入多个微孔中，其中，在至少80％的所述多个微孔中，不超过一个细胞被引入多个微孔中相应的一个微孔中；向分别处于多个微孔中的多个细胞单独施加第一电流；检测在多个微孔中分别施加有第一电流的多个细胞的第一阻抗值；基于该第一阻抗值的第一分布将多个细胞的第一组分类为第一类型；以及计数多个细胞的第一组的总数。如本文所用，术语“微孔”是指横截面尺寸在约1nm至约1000μm范围内的孔，例如，约1nm至约50nm，约50nm至约100nm，约100nm至约1μm，约1μm至约10μm，约10μm至约100μm，约100μm至约200μ本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的方法，包括:/n将多个细胞分别引入多个微孔中，其中，在至少80％的所述多个微孔中，不超过一个细胞被引入所述多个微孔中相应的一个微孔中；/n向分别位于所述多个微孔中的多个细胞单独施加第一电流；/n检测在所述多个微孔中分别施加有所述第一电流的多个细胞的第一阻抗值；/n基于所述第一阻抗值的第一分布将多个细胞的第一组分类为第一类型；以及/n计数多个细胞的第一组的总数。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的方法，包括:
将多个细胞分别引入多个微孔中，其中，在至少80％的所述多个微孔中，不超过一个细胞被引入所述多个微孔中相应的一个微孔中；
向分别位于所述多个微孔中的多个细胞单独施加第一电流；
检测在所述多个微孔中分别施加有所述第一电流的多个细胞的第一阻抗值；
基于所述第一阻抗值的第一分布将多个细胞的第一组分类为第一类型；以及
计数多个细胞的第一组的总数。


2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述第一电流是直流电或频率不超过100kHz的低频交流电。


3.根据权利要求1所述的方法，还包括：
向分别位于所述多个微孔中的多个细胞单独施加第二电流，所述第二电流为高频交流电；
检测在所述多个微孔中分别施加有所述第二电流的多个细胞的第二阻抗值；
基于所述第二阻抗值的第二分布将所述多个细胞的第二组分类为第二类型；以及
计数所述多个细胞的第二组的总数。


4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述第二阻抗值的第二分布识别多个细胞的第二组和多个细胞的第三组；
所述方法还包括基于该第二阻抗值的第二分布将多个细胞的第三组分类为第三类型；以及
计数多个细胞的第三组的总数。


5.据权利要求3所述的方法，其中，所述高频交流电的频率大于1兆赫。


6.根据权利要求1至5任意一项所述的方法，其中，所述多个微孔中的每一个的直径在15μm至40μm的范围内，深度在25μm至40μm的范围内；以及
所述多个微孔中的两个相邻微孔之间的距离在25μm至40μm的范围内。


7.根据权利要求1至6任意一项所述的方法，其中，将所述多个细胞分别引入所述多个微孔中包括将包含悬浮在电解质中的细胞的样品引入包含多个微孔的微孔阵列板上；以及
向样品施加电场以将多个细胞分别驱动到多个微孔中。


8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述电场通过第一导电层和第二导电层分别施加在所述微孔阵列板的相对两侧，所述多个微孔夹在第一导电层和第二导电层之间。


9.根据权利要求1至8任意一项所述的方法，其中，所述细胞包括白细胞，所述白细胞包括淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞中的一种或其组合。


10.根据权利要求1至9任意一项所述的方法，其中，在至少95％的所述多个微孔中，不超过一个细胞被引入所述多个微孔中相应的一个微孔中。


11.一种用于对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的生物测定试剂盒，包括：
微孔阵列板；以及
使用生物测定试剂盒对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的方法的说明；
其中...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔皓辰，张湛，李婧，
申请(专利权)人：京东方科技集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11