The invention partially describes an improved method, determination and kit for detecting analytes in biological samples using magnetic particles. The method comprises the following steps: contacting a sample with a magnetic conjugate including a magnetic particle and a capture portion configured to bind the analyte of interest in the sample; contacting the sample with a report conjugate including a report conjugate and a report binding portion configured to bind the analysis of interest in the sample Object; combining the analyte of interest with the capture part and the report combining part; separating the analyte of interest from the sample by applying a magnetic field to the analysis chamber; and detecting the presence, absence or level of the analyte of interest by detecting the report.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】基于磁性颗粒的免疫测定及其使用方法相关申请的交叉引用该国际申请要求2017年1月26日提交的美国临时申请No.62/450,623和2017年8月11日提交的美国临时申请No.62/544,393的权益，所述临时申请的全部内容以引用方式并入本文。专利
本文所述的专利技术总体上涉及用于检测生物样品中的分析物的改进方法、测定和试剂盒。专利技术背景分析物检测在医学和生物学研究以及环境科学等各个行业中具有各种临床和非临床应用。用于分析物检测的传统方法包括诸如酶联免疫吸附测定(ELISA)、质谱和高压液相色谱(HPLC)的测定。HPLC和质谱可用于基于电荷和/或尺寸来检测分析物，而ELISA可用于基于分析物上可被捕获剂和检测剂(例如，抗体、适体等等)识别的抗原来检测分析物。特别地，ELISA检测已成为生命科学中比较常用的检测方法。然而，传统的ELISA可能是耗时的，因为它涉及各种孵育和洗涤步骤，并且可能无法为各种应用提供足够的灵敏度。此外，用于进行ELISA测定的参数是高度可变的，如此使得该测定难以发展成为通用平台，尤其是难以发展成为个人使用者的家庭诊断法。事实上，如果能在家中轻松且频繁地监测生物标记物，健康护理将受益匪浅。举例来说，与医疗专业人员相比，个人更适合监测自己的健康状态并指导护理，因为医疗专业人员在治疗患者方面时间和资源有限。此外，获得了健康信息，个人能够更准确地规划生活，包括例如规划生殖时间。因此，仍然需要用于检测样品中的分析物的改进方法，这些改进方法与常规方法相比执行所需的时...
【技术保护点】
1.一种用于检测样品中感兴趣分析物的存在、不存在或水平的方法，所述方法包括以下步骤：/n使样品与包含磁性颗粒和捕获部分的磁性缀合物接触，所述捕获部分被配置为结合所述样品中的所述感兴趣分析物；/n使所述样品与包含报告物和报告结合部分的报告缀合物接触，所述报告结合部分被配置为结合所述样品中的所述感兴趣分析物；/n使所述感兴趣分析物与所述捕获部分和所述报告结合部分结合；/n通过向分析腔室施加磁场将所述感兴趣分析物从所述样品中分离；以及/n通过检测所述报告物来检测所述感兴趣分析物的存在、不存在或水平。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170126 US 62/450,623;20170811 US 62/544,3931.一种用于检测样品中感兴趣分析物的存在、不存在或水平的方法，所述方法包括以下步骤：
使样品与包含磁性颗粒和捕获部分的磁性缀合物接触，所述捕获部分被配置为结合所述样品中的所述感兴趣分析物；
使所述样品与包含报告物和报告结合部分的报告缀合物接触，所述报告结合部分被配置为结合所述样品中的所述感兴趣分析物；
使所述感兴趣分析物与所述捕获部分和所述报告结合部分结合；
通过向分析腔室施加磁场将所述感兴趣分析物从所述样品中分离；以及
通过检测所述报告物来检测所述感兴趣分析物的存在、不存在或水平。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述报告物包含金属芯和二氧化硅壳。
3.如权利要求2所述的方法，其中所述二氧化硅壳浸渍有多个量子点。
4.如权利要求2或3所述的方法，其中所述金属芯包含金。
5.如权利要求1所述的方法，其中所述报告物包含多个量子点。
6.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述报告物是荧光报告物、磷光报告物或比色报告物。
7.如前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法还包括以下步骤：在使所述样品与所述磁性缀合物接触之后，通过向所述分析腔室施加磁场来浓缩所述样品中的所述感兴趣分析物；然后减少所述分析腔室中所述样品的体积。
8.如权利要求7所述的方法，所述方法还包括在使所述样品与所述报告缀合物接触之前使所述磁场解除激活的步骤。
9.如前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法还包括以下步骤：在使所述样品与所述磁性缀合物接触之后，通过向所述分析腔室施加磁场来浓缩所述样品中的所述感兴趣分析物；从所述分析腔室中除去一定体积的所述样品；以及将一定体积的缓冲液和另外体积的所述样品中的一者或两者添加到所述分析腔室中。
10.如权利要求9所述的方法，所述方法还包括在使所述样品与所述报告缀合物接触之前使所述磁场解除激活的步骤。
11.如权利要求1所述的方法，其中所述报告缀合物用生物素标记，并且所述报告物用链霉抗生物素蛋白功能化。
12.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述感兴趣分析物选自由以下组成的组：人绒毛膜促性腺激素(hCG)、促黄体激素(LH)/黄体生成素、前列腺特异性抗原(PSA)、单纯疱疹病毒(HSV)抗体、雌酮-3-葡糖苷酸(E3G)、细菌、血红蛋白A1C、C反应蛋白、炎症生物标记物、肌钙蛋白、莱姆病抗原、莱姆病抗体、LDL生物标记物、HDL生物标记物、总胆固醇生物标记物、促甲状腺激素、丙型肝炎病毒生物标记物、鼻病毒生物标记物、流感病毒生物标记物、肝功能生物标记物、雌激素、孕酮、乳酸以及它们的组合。
13.一种用于检测样品中感兴趣分析物的存在、不存在或水平的方法，所述方法包括以下步骤：
使样品与包含磁性颗粒和捕获部分的磁性缀合物接触，所述捕获部分被配置为结合所述样品中的所述感兴趣分析物；
使所述感兴趣分析物与所述捕获部分结合；
通过向分析腔室施加磁场以将所述磁性缀合物和与所述磁性缀合物缔合的感兴趣分析物向下牵引，从而将所述感兴趣分析物从所述样品中分离；
使所述样品与包含报告物和报告结合部分的报告缀合物接触，所述报告结合部分被配置为结合所述样品中的所述感兴趣分析物；
使所述感兴趣分析物与所述报告结合部分结合；
通过向所述分析腔室施加磁场将所述感兴趣分析物和与所述感兴趣分析物结合的所述报告结合部分从所述样品中分离；以及
通过用光源和光电检测器检测所述报告物来检测所述感兴趣分析物的存在、不存在或水平。
14.如权利要求13所述的方法，其中所述报告物包括荧光报告物、磷光报告物或比色报告物。
15.如权利要求13所述的方法，其中所述报告缀合物包含多个量子点。
16.如权利要求13至15中任一项所述的方法，其中所述感兴趣分析物选自由以下组成的组：人绒毛膜促性腺激素(hCG)、促黄体激素(LH)/黄体生成素、前列腺特异性抗原(PSA)、单纯疱疹病毒(HSV)抗体、雌酮-3-葡糖苷酸(E3G)、细菌、血红蛋白A1C、C反应蛋白、炎症生物标记物、肌钙蛋白、莱姆病抗原、莱姆病抗体、LDL生物标记物、HDL生物标记物、总胆固醇生物标记物、促甲状腺激素、丙型肝炎病毒生物标记物、鼻病毒生物标记物、流感病毒生物标记物、肝功能生物标记物、雌激素、孕酮、乳酸以及它们的组合。
17.一种用于检测样品中感兴趣分析物的存在、不存在或水平的方法，所述方法包括以下步骤：
使样品与包含磁性颗粒和捕获部分的磁性缀合物接触，所述捕获部分被配置为结合所述样品中的所述感兴趣分析物；
使所述感兴趣分析物与所述捕获部分结合；
使所述样品与报告物标记的分析物接触，所述报告物标记的分...
【专利技术属性】
技术研发人员：A·沃德，A·R·钱德拉塞克兰，D·陈，C·布兰卡德，P·加登，B·德马科，J·福曼，M·A·库萨，L·考德威尔，
申请(专利权)人：生命生物科学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：加拿大;CA
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