作为有效成分包括组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子的干细胞活性促进用组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种干细胞活性促进用组合物，其作为有效成分包括组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子，并且在用低浓度的组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子处理干细胞时，明显地提高干细胞的活性。尤其，在细胞培养条件中，激活的MSCs能够促进细胞移动性、集落形成活性以及抗炎症能力，由此能提高高血压、严重疾病或免疫疾病的治疗效果，因此有望能成为有效的治疗策略。

Composition for promoting stem cell activity as active ingredient including histone deacetylase inhibitor and activator

The invention relates to a composition for promoting stem cell activity, which, as an effective component, comprises a histone deacetylase inhibitor and an activating factor, and obviously improves the activity of stem cells when treating stem cells with a low concentration of histone deacetylase inhibitor and activating factor. In particular, in cell culture, activated MSCs can promote cell mobility, colony forming activity and anti-inflammatory ability, which can improve the therapeutic effect of hypertension, serious diseases or immune diseases, so it is expected to become an effective treatment strategy.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】作为有效成分包括组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子的干细胞活性促进用组合物
本专利技术涉及一种作为有效成分包括组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histonedeacetylaseinhibitor)和激活因子(primingfactor)的干细胞活性促进用组合物。
技术介绍
间充质干细胞(Mesenchymalstem-cells，MSCs)是从骨髓((bone-marrow，BM)、脂肪、牙髓(dentalpulp)、脐带(umbilical-cord，UC)以及脐带血(UC-blood，UCB)分离出的多功能祖细胞(multipotentprogenitorcell)。MSC(Mesenchymalstemcell)的施用可以修复受损的器官的脏器组织，从而提高治疗效果。MSC的功效起因于旁分泌因子(paracrinefactor)，上述旁分泌因子具有由细胞因子(cytokine)调节的细胞保护效果(cytoprotectiveeffect)、促血管生成(pro-angiogenic)和促动脉生成(pro-arteriogenic)的效果。然而，目前MSC治疗由于治疗有效性低，尤其是体内的植入(engraftment)和移植的细胞的生存率低，因此存在极限。大部分(≥99％)情况下，会将MSCs注射到肺附近的静脉，而在其中只有2-3％被排出到循环系统。因此，有必要理解在组织修复过程中对于MSCs的移动和植入的正确的机制。几种趋化因子，例如基质细胞衍生因子-1(stromalcellderivedfactor-1，SDF-1)以及生长因子对成体MSCs的移动和植入起到重要的作用，其中上述生长因子例如可以为血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowth-factor，VEGF)、血小板衍生生长因子(platelet-derivedgrowth-factor，PDGF)或者肝细胞生长因子(hepatocytegrowth-factor，HGF)。其中，SDF-1和作为其的受体的CXCR4轴(axis)对于干细胞的归巢(homing)/植入而言是重要因子。事实上，在骨髓中根据SDF-1梯度(gradient)，在进行为了移植的预处理(conditioning)后，骨髓中的造血干细胞/祖细胞(hematopoieticstem/progenitorcells，HSPCs)的植入向上调节(upregulation)。对SDF-1梯度的HSPCs的敏感性/反应性通过丰富的分子聚合对受损的组织产生积极的影响(“primed”)。这里包括有活体活性脂质(例如，鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate，S1P)以及神经酰胺-1-磷酸(ceramide-1-phosphate，C1P))、嗜中性粒细胞来源的阳离子抗菌肽(cathelicidin)(LL-37)、β2-抵御素(defensin)以及可溶性膜攻复合物(solublemembraneattackcomplex，sMAC)(C5b-9)。本专利技术人最近确认了，在HSPCs过程中观察到的激活现象也相似地发生在向S1P和CP1活体活性脂质以及作为阳离子肽的LL-37激活的MSCs。尤其，激活的MSCs在细胞培养条件中促进细胞移动、促进集落形成活性以及抗炎症能力，由此能提高肺动脉高压(pulmonaryarterialhypertension，PAH)的治疗效果。然而，激活的MSCs依然在受损的组织中表现出较低的体内植入。而且，虽然在施用MSC前进行了密集的清洗过程，但还是没能完全清除触发负面炎症反应的残余激活因子。因此，需要研发在低浓度下的激活策略。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题本专利技术的目的在于提供一种作为有效成分包括组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子(Primingfactor)的干细胞活性促进用组合物，并还提供利用其的干细胞活性促进方法。并且，本专利技术的另一个目的在于提供一种高血压预防或治疗用药物组合物，其作为有效成分包括由组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子处理的干细胞或者上述干细胞的培养液。并且，本专利技术的又一个目的在于提供一种炎症性疾病或免疫性疾病的预防或治疗用药物组合物，其作为有效成分包括由组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子处理的干细胞或者上述干细胞的培养液。技术方案本专利技术提供一种干细胞活性促进用组合物，其作为有效成分包括组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子。并且，本专利技术提供一种干细胞活性促进方法，其包括在分离的干细胞中处理组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子的步骤。并且，本专利技术提供一种高血压预防或治疗用药物组合物，其作为有效成分包括由组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子处理的干细胞或者上述干细胞的培养液。并且，本专利技术提供一种炎症疾病或免疫疾病的预防或治疗用药物组合物，其作为有效成分包括由组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子处理的干细胞或者上述干细胞的培养液。并且，本专利技术提供一种用于促进干细胞活性的组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子的用途。并且，提供一种用组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子处理的干细胞或上述干细胞的培养液在制造用于预防和治疗高血压的药物中的用途。并且，提供一种用组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子处理的干细胞或上述干细胞的培养液在制造用于预防和治疗炎症疾病或免疫疾病的药物中的用途。有益效果本专利技术涉及一种作为有效成分包括组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子的干细胞活性促进用组合物，并且用低浓度的组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子处理干细胞时，明显提高干细胞的活性。尤其，激活的MSCs在细胞培养条件下，促进细胞移动、集落(colony)形成活性以及抗炎症能力，从而能能提高高血压、炎症性疾病或免疫性疾病的治疗效果，因此有望成为有效的治疗策略。附图说明图1示出了用S1P激活的UC-MSCs中5-氮杂胞嘧啶核苷(5-azacytidine，5-Aza)的负面影响的结果。图1的A是对在用1μM的5-Aza或0.5mM的VPA处理24小时的人类UC-MSCs中的CXCR4的RQ-PCR分析结果。对于表示的基因的相对表达程度，与未处理的MSCs(NT)的数值进行比较通过倍数变化进行显示，并以means±SEM(n＝4)、***p<0.001、单因素方差分析检验(one-wayANOVAtest)的方式显示。图1的A是用流式细胞分析在用1μM的5-Aza和50nM的S1P激活24小时的UC-MSCs中，标记的MSC表面(CD29、CD73和CD90)和造血系统(CD14、CD34和CD45)蛋白质的表达的结果。图1的C示出了使用5-Aza+S1P激活的UC-MSCs来分析软骨细胞(chondrocyte)、骨细胞或脂肪细胞的分化的代表性图像。通过阿尔新蓝(AlcianBlue)、茜素红S(AlizarinRedS)以及油红O(OilRedO)的染色分别检测软骨细胞生成、骨细胞生成以及脂肪细胞生成。图1的D、图1的E、图1的F分别表示用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种干细胞活性促进用组合物，其特征在于，/n作为有效成分包括组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20161110 KR 10-2016-0149375;20171108 KR 10-2017-011.一种干细胞活性促进用组合物，其特征在于，
作为有效成分包括组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子。


2.根据权利要求1所述的干细胞活性促进用组合物，其特征在于，
所述组蛋白去乙酰化酶抑制剂是选自由丙戊酸、丁酸钠、烟酰胺以及Sirt抑制剂构成的组中的任意1种以上。


3.根据权利要求1所述的干细胞活性促进用组合物，其特征在于，
所述激活因子是选自由鞘氨醇-1-磷酸、神经酰胺-1-磷酸、抗菌肽、吡格列酮构成的组中的任意1种以上。


4.根据权利要求2所述的干细胞活性促进用组合物，其特征在于，
所述丙戊酸浓度为0.1mM至1.0mM。


5.根据权利要求3所述的干细胞活性促进用组合物，其特征在于，
所述鞘氨醇-1-磷酸浓度为10nM至50nM。


6.根据权利要求1至5中任意一项所述的干细胞活性促进用组合物，其特征在于，
所述干细胞选自由神经干细胞、肝干细胞、造血干细胞、脐带血干细胞、表皮干细胞、胃肠道干细胞、内皮干细胞、肌肉干细胞、间充质干细胞以及胰腺干细胞构成的组。


7.根据权利要求1至5中任意一项所述的干细胞活性促进用组合物，其特征在于，
所述干细胞活性是细胞移动性、集落形成能力以及抗炎症活性。


8.一种干细胞活性促进方法，其特征在于，包括：
用组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子处理分离的干细胞的步骤。


9.根据权利要求8所述的干细胞活性促进方法，其特征在于，
所述组蛋白去乙酰化酶抑制剂是选自由丙戊酸、丁酸钠、烟酰胺以及Sirt抑制剂构成的组中的任意1种以上。


10.根据权利要求8所述的干细胞活性促进方法，其特征在于，
所述激活因子是选自由鞘氨醇-1-磷酸、神经酰胺-1-磷酸、抗菌肽、吡格列酮构成的组中的任意1种以上。


11.根据权利要求9所述的干细胞活性促进方法，其特征在于，
所述丙戊酸浓度为0.1mM至1.0mM。


12.根据权利要求10所述的干细胞活性促进方法，其特征在于，
所述鞘氨醇-1-磷酸浓度为10nM至50nM。


13.一种高血压预防或治疗用药物组合物，其特征在于，
作为有效成分包括用组蛋白去乙酰化酶抑制剂和激活因子处理的干细胞或者所述干细胞的培养液。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：申东明，林智善，吴然睦，
申请(专利权)人：蔚山大学校产学协力团，财团法人峨山社会福祉财团，
类型：发明
国别省市：韩国;KR