改进的抗原结合受体形式制造技术

本发明专利技术总地涉及新形式的能够特异性结合肿瘤相关抗原的抗原结合受体。更确切地，本发明专利技术涉及抗原结合受体，其有效地和特异性地与肿瘤细胞表面上的抗原结合/相互作用，并涉及用抗原结合受体转染/转导的T细胞。此外，本发明专利技术涉及编码本发明专利技术的抗原结合受体的核酸分子和载体。本发明专利技术还提供了T细胞的产生和在治疗特定疾病的方法中的用途，以及包含本发明专利技术的抗原结合受体和/或T细胞的药物组合物/药物。

Improved antigen binding receptor form

The invention generally relates to a new form of antigen binding receptor capable of specifically binding to tumor related antigens. More precisely, the invention relates to an antigen binding receptor, which effectively and specifically binds / interacts with an antigen on the surface of a tumor cell, and relates to a T cell transfected / transduced with an antigen binding receptor. In addition, the invention relates to a nucleic acid molecule and a carrier encoding an antigen binding receptor of the invention. The invention also provides the production of T cells and their use in methods for treating specific diseases, as well as pharmaceutical compositions / drugs including antigen binding receptors and / or T cells of the invention.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】改进的抗原结合受体形式专利
本专利技术总地涉及新形式的能够特异性结合肿瘤相关抗原的抗原结合受体。更确切地，本专利技术涉及抗原结合受体，其有效地和特异性地结合肿瘤细胞表面上的抗原/与肿瘤细胞表面上的抗原相互作用，并涉及用抗原结合受体转染/转导的T细胞。此外，本专利技术涉及编码本专利技术的抗原结合受体的核酸分子和载体。本专利技术还提供了T细胞的产生和在治疗特定疾病的方法中的用途，以及包含本专利技术的抗原结合受体和/或T细胞的药物组合物/药物。专利技术背景过继性T细胞疗法(ACT)是使用癌症特异性T细胞的有效治疗方法(Rosenberg和Restifo，Science348(6230)(2015)，62-68)。ACT可以使用天然存在的肿瘤特异性细胞或使用嵌合抗原受体通过基因工程赋予特异性的T细胞(Rosenberg和Restifo，Science348(6230)(2015)，62-68)。ACT甚至在患有晚期和其他难治性疾病(如急性淋巴性白血病、非霍奇金淋巴瘤或黑素瘤)的患者中可以成功治疗和诱导缓解(Dudley等，JClinOncol26(32)(2008)，5233-5239；Grupp等，NEnglJMed368(16)(2013)，1509-1518；Kochenderfer等，JClinOncol.(2015)33(6)：540-549，doi：10.1200/JCO.2014.56.2025.2014年8月25日Epub)。然而，尽管临床功效令人印象深刻，但由于引入的嵌合抗原受体的脱靶影响或健康组织中靶抗原的表达，ACT还可导致危及生命的毒性。实际上，大多数靶向抗原是肿瘤相关的，但不是完全肿瘤选择性的。由此产生的脱靶效应在几个试验中导致严重的毒性，例如,靶向ErbB2的CART细胞(其由癌细胞高度表达但在健康细胞中水平较低)引起对心肺上皮的急性毒性(Morgan等，MolTher18(2010)，843-851)。一种目前评估的克服毒性的策略是降低CAR对靶抗原的亲和力。然而，这些方法也可能限制ACT在预期作用部位的功效。另外，由于一旦在肿瘤部位累积，T细胞应答会受到各种手段的抑制，ACT进一步受限。肿瘤微环境可以通过阻遏细胞、从肿瘤或基质细胞分泌的可溶性因子以及营养剥夺来阻止有效浸润。此外，T细胞表达多种免疫抑制受体，其在激活时抑制T细胞应答，包括例如细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)和程序性细胞死亡-1(PD-1)。未来的临床模型需要抵消和克服T细胞抑制，同时保持肿瘤特异性和细胞毒性。因此，靶向肿瘤治疗，特别是过继性T细胞治疗，仍然需要更多的分化工具，以满足癌症患者的需要。因此，仍然需要提供具有改善ACT的安全性和功效以及克服上述缺点的潜力的新方法。专利技术概述本专利技术总地涉及能够特异性结合独特靶标(即肿瘤相关抗原(TAA))的新抗原结合受体形式，和表达这些抗原结合受体的T细胞。本专利技术的抗原结合受体在一种或多种抗原结合受体与靶细胞(即肿瘤细胞)结合时导致强烈和选择性的T细胞激活。在一个方面中，本专利技术涉及抗原结合受体，其包含锚定跨膜结构域和包含抗原结合部分的胞外结构域，其中所述抗原结合部分是Fab、交叉Fab(crossFab)或scFab片段。在一个实施方案中，锚定跨膜结构域是选自CD8、CD3z、FCGR3A、NKG2D、CD27、CD28、CD137、OX40、ICOS、DAP10或DAP12跨膜结构域或其片段的跨膜结构域。在一个实施方案中，锚定跨膜结构域是CD28跨膜结构域或其片段，特别是其中锚定跨膜结构域包含SEQIDNO：14的氨基酸序列。在一个实施方案中，抗原结合受体进一步包含至少一个刺激信号传导结构域和/或至少一个共刺激信号传导结构域。在一个实施方案中，所述至少一个刺激信号传导结构域独立地选自CD3z的、FCGR3A的和NKG2D的胞内结构域，或其片段。在一个实施方案中，所述至少一个刺激信号传导结构域是CD3z的胞内结构域或其片段，特别是其中所述至少一个刺激信号传导结构域包含SEQIDNO：16的氨基酸序列。在一个实施方案中，所述至少一个共刺激信号传导结构域独立地选自CD27、CD28、CD137、OX40、ICOS、DAP10和DAP12的胞内结构域，或其片段。在一个实施方案中，所述至少一个共刺激信号传导结构域是CD28胞内结构域或其片段，特别地，其中所述至少一个共刺激信号传导结构域包含SEQIDNO：15的氨基酸序列。在一个实施方案中，抗原结合受体包含一个刺激信号传导结构域，其包含CD3z的胞内结构域，或其片段，并且其中抗原结合受体包含一个共刺激信号传导结构域，其包含CD28的胞内结构域，或其片段。在一个实施方案中，刺激信号传导结构域包含SEQIDNO:16的氨基酸序列和共刺激信号传导结构域包含SEQIDNO:15的氨基酸序列。在一个实施方案中，胞外结构域链接锚定跨膜结构域，任选通过肽接头。在一个实施方案中，肽接头包含氨基酸序列GGGGS(SEQIDNO:20)。在一个实施方案中，锚定跨膜结构域连接共信号传导结构域或信号传导结构域，任选通过肽接头。在一个实施方案中，信号传导和/或共信号传导结构域任选通过至少一个肽接头连接。在一个实施方案中，抗原结合部分包含重链恒定(CH)结构域和轻链恒定结构域(CL)，其中CH结构域或CL结构域在C-末端与锚定跨膜结构域的N-末端连接，任选通过肽接头。在一个实施方案中，抗原结合受体包含一个共信号传导结构域，其中共信号传导结构域在N-末端连接锚定跨膜结构域的C-末端。在一个实施方案中，抗原结合受体另外包含一个刺激信号传导结构域，其中刺激信号传导结构域在N-末端连接共刺激信号传导结构域的C-末端。在一个实施方案中，抗原结合部分能够特异性结合选自FAP、CEA、p95、BCMA、EpCAM、MSLN、MCSP、HER-1、HER-2、HER-3、CD19、CD20、CD22、CD33、CD38、CD52Flt3、FOLR1、Trop-2、CA-12-5、HLA-DR、MUC-1(粘蛋白)、A33-抗原、PSMA、PSCA、转铁蛋白-受体、TNC(生腱蛋白)、CA-IX和PDL1的抗原，或结合与人主要组织相容性复合物(MHC)的分子结合的肽。在一个实施方案中，抗原结合部分能够特异性结合选自成纤维细胞激活蛋白(FAP)、癌胚抗原(CEA)、间皮素(MSLN)、CD20、叶酸受体1(FOLR1)、生腱蛋白(TNC)和程序性死亡配体1(PDL1)的抗原。在一个实施方案中，抗原结合部分能够特异性结合CD20，其中抗原结合部分包含：(i)重链可变区(VH)，其包含(a)重链互补决定区(CDRH)1氨基酸序列YSWIN(SEQIDNO:1)(b)CDRH2氨基酸序列RIFPGDGDTDYNGKFKG(SEQIDNO:2)；和(c)CDRH3氨基酸序列NVFDGYWLVY(SEQ本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗原结合受体，其包含锚定跨膜结构域和包含抗原结合部分的胞外结构域，其中抗原结合部分是Fab、交叉Fab或scFab。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170327 EP 17163090.8;20170518 EP 17171775.41.一种抗原结合受体，其包含锚定跨膜结构域和包含抗原结合部分的胞外结构域，其中抗原结合部分是Fab、交叉Fab或scFab。


2.权利要求1的抗原结合受体，其中锚定跨膜结构域是选自CD8、CD3z、FCGR3A、NKG2D、CD27、CD28、CD137、OX40、ICOS、DAP10或DAP12的跨膜结构域或其片段的跨膜结构域。


3.权利要求1或2任一项的抗原结合受体，其中锚定跨膜结构域是CD28跨膜结构域或其片段，特别是其中锚定跨膜结构域包含SEQIDNO:14的氨基酸序列。


4.权利要求1至3任一项的抗原结合受体，进一步包含至少一个刺激信号传导结构域和/或至少一个共刺激信号传导结构域。


5.权利要求1至4任一项的抗原结合受体，其中至少一个刺激信号传导结构域独立地选自CD3z、FCGR3A和NKG2D的胞内结构域，或其片段。


6.权利要求1至5任一项的抗原结合受体，其中至少一个刺激信号传导结构域是CD3z的胞内结构域或其片段，特别是其中至少一个刺激信号传导结构域包含SEQIDNO:16的氨基酸序列。


7.权利要求1至6任一项的抗原结合受体，其中至少一个共刺激信号传导结构域独立地选自CD27、CD28、CD137、OX40、ICOS、DAP10或DAP12的胞内结构域，或其片段。


8.权利要求1至7任一项的抗原结合受体，其中至少一个共刺激信号传导结构域是CD28胞内结构域或其片段，特别地，其中至少一个共刺激信号传导结构域包含SEQIDNO:15的氨基酸序列。


9.权利要求1至8任一项的抗原结合受体，其中抗原结合受体包含一个刺激信号传导结构域，其包含CD3z的胞内结构域或其片段；和其中抗原结合受体包含一个共刺激信号传导结构域，其包含CD28的胞内结构域或其片段。


10.权利要求1至9任一项的抗原结合受体，其中抗原结合部分包含重链恒定结构域(CH)和轻链恒定结构域(CL)，其中CH结构域或CL结构域在C-末端连接锚定跨膜结构域的N-末端，任选通过肽接头连接。


11.权利要求4至10任一项的抗原结合受体，其中抗原结合受体包含一个共信号传导结构域，其中共信号传导结构域在N-末端连接锚定跨膜结构域的C-末端。


12.权利要求11的抗原结合受体，其中抗原结合受体另外包含一个刺激信号传导结构域，其中刺激信号传导结构域在N-末端连接共刺激信号传导结构域的C-末端。


13.权利要求1至12任一项的抗原结合受体，其中抗原结合部分能够特异性结合选自成纤维细胞激活蛋白(FAP)、癌胚抗原(CEA)、间皮素(MSLN)、CD20、叶酸受体1(FOLR1)、生腱蛋白(TNC)和程序性死亡配体1(PDL1)的抗原。


14.权利要求1至13任一项的抗原结合受体，其中至少一个抗原结合部分能够特异性结合CD20，其中抗原结合部分包含：
(i)重链可变区(VH)，其包含
(a)重链互补决定区(CDRH)1氨基酸序列YSWIN(SEQIDNO:1)
(b)CDRH2氨基酸序列RIFPGDGDTDYNGKFKG(SEQIDNO:2)；
和
(c)CDRH3氨基酸序列NVFDGYWLVY(SEQIDNO:3)；和
(ii)轻链可变区(VL)，其包含
(d)轻链互补决定区(CDRL)1氨基酸序列RSSKSLLHSNGITYLY(SEQIDNO:4)；
(e)CDRL2氨基酸序列QMSNLVS(SEQIDNO:5)；和
(f)CDRL3氨基酸序列AQNLELPYT(SEQIDNO:6)。


15.权利要求1至13任一项的抗原结合受体，其中抗原结合部分能够特异性结合PDL1，其中抗原结合部分包含：
(i)重链可变区(VH)，其包含
(a)重链互补决定区(...

【专利技术属性】
技术研发人员：C·克莱因，E·默斯纳，D·达洛夫斯基，KG·施图本拉赫，
申请(专利权)人：豪夫迈·罗氏有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH