抗CD16A抗体与细胞因子的组合制造技术

技术编号:22568850 阅读:36 留言:0更新日期:2019-11-16 13:43
本发明专利技术涉及用于基于NK细胞的免疫疗法的抗CD16A抗原结合蛋白,其中该抗CD16A抗原结合蛋白间歇性施用并且与细胞因子组合施用。在某些实施方案中,该抗原结合蛋白为四价双特异性CD30/CD16A串联双抗体。

Combination of anti-cd16a antibody and cytokines

The invention relates to an anti-cd16a antigen binding protein for NK cell-based immunotherapy, wherein the anti-cd16a antigen binding protein is applied intermittently and in combination with cytokines. In some embodiments, the antigen binding protein is a tetravalent bispecific CD30 / cd16a tandem double antibody.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗CD16A抗体与细胞因子的组合
本专利技术涉及结合CD16A的抗原结合蛋白,其间歇性地与细胞因子一起施用,用于基于NK细胞的免疫疗法。在具体的实施方案中,本专利技术涉及具有CD16A抗原结合位点的双特异性四价串联双抗体(diabody),其用于与NK细胞结合以用于治疗癌症或(病毒)感染,其中所述串联双抗体间歇性地与细胞因子组合施用。实例是结合CD16A的串联双抗体,例如CD30/CD16A串联双抗体AFM13、EGFR/CD16A串联双抗体AFM24和BCMA/CD16A串联双抗体AFM26。
技术介绍
WO2006/125668描述了抗原结合蛋白,即CD30/CD16A双特异性串联双抗体,及其用于基于NK细胞的免疫疗法的用途。WO2016/177846描述了CD30/CD16A双特异性串联双抗体和PD-1拮抗剂的组合,其用于治疗霍奇金淋巴瘤。自然杀伤(NK)细胞是细胞毒性的、产生IFN-γ的先天淋巴细胞,其被认为构成对抗病毒感染的细胞和癌细胞的第一道防线(CerwenkaandLanier,2001;Spits,etal.,2013)。与CD8+T细胞相反,NK细胞通过一组定义的胚系编码受体(例如抑制性KIR受体和NKG2A受体以及活化性受体NKG2D、DNAM-1和NCR受体)来区分异常细胞(Kochetal,2013;PahlandCerwenka,2017)。NK细胞对显示出降低水平的抑制性MHCI类分子或抑制性MHCI类分子的不相容谱库(repertoire)的细胞起作用,使得能够识别可能已经逃脱CD8+T细胞应答的某些癌细胞。抑制性配体的低表达与靶细胞上高水平活化配体的组合导致NK细胞活化和穿孔素及颗粒酶B的释放,介导靶细胞死亡(GasserandRaulet,2006;Moretta,etal.,2006)。此外,NK细胞活化由增强NK细胞对靶细胞的反应性的细胞因子(例如IL-2或IL-15)引发(Koehletal,2016)。除了它们的直接抗肿瘤活性外,NK细胞还有助于诱导适应性抗癌响应,并可以发挥免疫调节功能(Schusteretal.,2016)。越来越多的证据支持NK细胞亚群可以包含广泛的表型和功能多样性的观点(RoelleandBrodin,2016;Tesi,etal.,2016)。此外,NK细胞可以获得适应性免疫和免疫记忆的特性,例如特定亚群扩增和抗原特异性响应(Sunetal.,2014)。在这种情况下,IL-12/15/18预活化的NK细胞已被证明能增强和延长NK细胞对肿瘤细胞和细胞因子的反应性,这与IFN-γ基因座的表观遗传重塑有关(CerwenkaandLanier,2016;Luetke-Eversloh,etal.,2014;Ni,etal.,2016;Romeeetal.,2016)。虽然根据定义,NK细胞不需要事先致敏,但未经进一步活化的新分离的(即“未致敏(naive’)”)人NK细胞只能对有限数量的肿瘤细胞(例如典型靶细胞系K562)有反应性(Vivier,2011)。特别地,来自癌症患者的NK细胞显示出对自体肿瘤细胞的低反应性,除非用细胞因子离体活化(Parkhurstetal.,2011,Reinersetal.,2013)。这可能反映了肿瘤细胞识别不充分、免疫抑制性癌症微环境的抑制作用以及体内NK细胞反应性的连续调节。即使存在自身MHCI类,肿瘤反应性治疗性抗体也可以显著改善未致敏NK细胞对肿瘤细胞的细胞毒性(Harris,2004;Pahletal.,2012;Parkhurstetal.,2011;Reinersetal.,2013)。这种抗体介导的细胞毒性(ADCC)是通过ITAM偶联的NK细胞活化性受体CD16A(FcγRIIIA)识别人源化和嵌合IgG1抗体的人Fc部分介导的(deLandazuri,etal.,1979;Lanier,etal.,1988;Vivier,etal.,1991)。从携带高亲和力CD16A同种异型(158V对158F基因多态性)的患者预后更好这一观察结果可以推断出NK细胞和ADCC在治疗性抗体临床反应中的作用(Bibeau,etal.,2009;Dall'Ozzo,etal.,2004;Musolino,etal.,2008)。然而,与其他癌症患者或健康个体相比,多发性骨髓瘤患者的血清IgG水平升高,并且骨髓瘤患者中CD16A亲和力的差异以及与常规治疗性抗体在这种病理生理血清浓度下对人IgG的CD16A结合的潜在竞争可能妨碍ADCC和NK细胞在体内发挥全部潜力(Lietal.,2016)。为了改善CD16A结合(engagement),已经开发了抗体形式,其以不依赖于Fc的方式以高亲和力结合CD16A(Rothe,etal.,2015;Wiernik,etal.,2013)。AFM13是四价双特异性CD30/CD16A串联双抗体其以高的亲和力和特异性与CD30和CD16A二价结合(Reuschetal.,2014)。AFM13正在在CD30+经典和非经典霍奇金淋巴瘤患者中进行2期单一疗法测试,并与派姆单抗(pembrolizumab)联合进行1b期临床试验(WO2016/177846)。
技术实现思路
尽管CD16A是人NK细胞上的有效活化性受体,介导NK细胞对抗体调理的癌细胞的细胞毒性,但是希望通过抗原结合蛋白的CD16A结合进一步提高活化NK细胞的细胞毒性的效率和效力。本专利技术人发现,通过多特异性抗体例如双特异性CD30/CD16A串联双抗体(AFM13)的CD16A结合改变了原代NK细胞的表型和功能。在最初改善NK细胞功能后,抗CD16A抗原结合蛋白暴露(通过串联双抗体)导致细胞毒性效力的瞬时选择性降低。然而,这种受损的NK细胞毒性可以通过细胞因子刺激来恢复。在实施例中,显示在没有抗原结合蛋白暴露的情况下在IL-2存在下培养NK细胞一段时间后,这些经CD16A-处理的(CD16A-experienced)NK细胞在用细胞因子或其他抗性肿瘤细胞再刺激时表现出更强的细胞毒性和IFN-γ产生,表明记忆样(memory-like)功能。因此,本文提出的专利技术揭示了尚未发现的CD16A触发(triggering)在引发和增强NK细胞对细胞因子和随后肿瘤细胞再刺激的应答的作用。本专利技术提供了抗CD16A抗原结合蛋白的间歇给药方案,例如CD30/CD16A串联双抗体(AFM13)、EGFR/CD16A串联双抗体AFM24或BCMA/CD16A串联双抗体AFM26中的任一种与用活化NK细胞的细胞因子进行的治疗联合一段时间而不暴露于抗CD16A抗原结合蛋白,该方案改善NK细胞反应。本专利技术揭示了CD16A在引发和增强NK细胞对细胞因子和随后肿瘤细胞再刺激的应答的新的额外作用。这意味着,在实施例中用CD30/CD16A串联双抗体刺激不仅可以杀死未经调理的CD30+肿瘤细胞,甚至可以杀死CD30-肿瘤细胞,CD30-肿瘤细胞不是CD30/CD16A串联双抗体直接靶向的。这些发现保证了抗本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.抗原结合蛋白和至少一种细胞因子用于基于NK细胞的免疫疗法的用途,所述抗原结合蛋白包含至少一个CD16A的抗原结合位点,其中所述抗原结合蛋白以剂量周期间歇性施用,并包括以下步骤:/n(a)施用第一剂量的所述抗原结合蛋白;和/n(b)在步骤(a)之后,在所述抗原结合蛋白的半衰期的至少3倍时间后施用第二剂量的所述抗原结合蛋白,以及(c)在步骤(a)至步骤(b)的间隔期间施用一定剂量的所述至少一种细胞因子。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170228 EP 17158563.11.抗原结合蛋白和至少一种细胞因子用于基于NK细胞的免疫疗法的用途,所述抗原结合蛋白包含至少一个CD16A的抗原结合位点,其中所述抗原结合蛋白以剂量周期间歇性施用,并包括以下步骤:
(a)施用第一剂量的所述抗原结合蛋白;和
(b)在步骤(a)之后,在所述抗原结合蛋白的半衰期的至少3倍时间后施用第二剂量的所述抗原结合蛋白,以及(c)在步骤(a)至步骤(b)的间隔期间施用一定剂量的所述至少一种细胞因子。


2.根据权利要求1所述的抗原结合蛋白和细胞因子,其中包含步骤(a)-(b)的间隔的剂量周期重复至少一次。


3.根据权利要求1或2所述的抗原结合蛋白和细胞因子,其中在步骤(a)之后,在所述抗原结合蛋白的半衰期的至少1倍的时间后施用所述细胞因子。


4.根据权利要求1-3中任一项所述的抗原结合蛋白和细胞因子,其中所述抗原结合蛋白的半衰期小于1周,优选小于24小时。


5.根据权利要求1-4中任一项所述的抗原结合蛋白和细胞因子,其中所述抗原结合蛋白包含至少两个CD16A的抗原结合位点。


6.根据权利要求1-5中任一项所述的抗原结合蛋白和细胞因子,其中所述抗原结合蛋白是多特异性的,并且包含至少一个不同于CD16A的靶抗原的抗原结合位点。


7.根据权利要求6所述的抗原结合蛋白和细胞因子,其中所述靶抗原为肿瘤抗原或病毒抗原。


8.根据权利要求1-7中任一项所述的抗原结合蛋白和细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员:约阿希姆·科赫马丁·特里德延斯·帕尔乌维·罗伊施索斯藤·罗斯埃里希·拉伊科维奇阿德尔海德·凯尔文卡
申请(专利权)人:阿菲姆德股份有限公司
类型:发明
国别省市:德国;DE

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