臭七次生代谢物及其制备方法与其在制药中的应用技术

本发明专利技术提供臭七次生代谢物1‑7及其制备方法，以其为活性成分的药物组合物，及其在制备预防炎症性病变的药物中的应用，以及其在制备治疗炎症性疾病的药物中的应用。本发明专利技术主要是采用植物化学研究手段，从臭七中获得上述化合物1‑7，并制成固体、液体或膏状体剂型。本发明专利技术所得抗炎化合物为天然产物，对人体细胞无毒无害。

Secondary metabolites of notoginseng and its preparation and application in pharmaceutical industry

The invention provides the secondary metabolite 1 \u2011 7 of notoginseng and a preparation method thereof, a pharmaceutical composition with the active ingredient thereof, an application in the preparation of a medicine for preventing inflammatory diseases, and an application in the preparation of a medicine for treating inflammatory diseases. The invention mainly adopts the plant chemistry research method to obtain the compound 1 \u2011 7 from notoginseng and make it into a solid, liquid or paste form. The anti-inflammatory compound is a natural product, which is non-toxic and harmless to human cells.

【技术实现步骤摘要】
臭七次生代谢物及其制备方法与其在制药中的应用
：本专利技术属于医药领域，具体地，涉及臭七次生代谢物及其制备方法与其在抗炎药物组合物中的应用及其在制药中的应用。
技术介绍
：三七(Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen)又名田七、血参、金不换等，为我国重要的传统中药，常用作滋补品或调节血液循环的药物。在心血管、脑血管、神经、免疫等系统具有多方面的药理活性，还具有对肝损伤的保护作用和抗肿瘤、抗炎等作用。因其具有很高的药用价值和经济价值，在我国已有400多年的栽培历史。三七自然分布区域狭窄，仅生长于海拔1500-1800米，北纬23.5°地区。适栽于我国西南地区的云南省文山州及文山州与广西省接壤的小部分地区。近几十年来，由于三七产业的不断发展，对三七原材料需求的持续增长，三七种植面积不断向外扩张。然而，三七属于典型的生态脆弱型植物，对环境中的光照、温度及空气湿度等因子十分敏感，适宜生长区外的扩大种植极易因病原微生物的侵染而导致三七根腐病的发生。染病后的三七根部腐烂，并伴有似鸡屎的臭味，又名臭七。每年因根腐病危害导致的臭七上万吨，严重影响了三七产业的发展。然而，三七因遭受病原微生物侵染向臭七转变过程中势必会启动防疫机制，改变自身的代谢方式，产生一系列有别于健康生长状态下的防疫性次生代谢物，这些防疫性次生代谢物可能对人体具有特殊的生理活性。研究者有必要探究臭七次生代谢物的分子结构及其生理活性，进一步研究臭七的开发利用，不仅有利于减小三七因病害带来的损失，还能丰富具有生理活性的三七天然小分子化合物库。然而，迄今为止，现有技术中未见有从臭七中分离得到20(S)-dammar-25-ene-24(S)-hydroperoxyl-3β,6α,12β,20-tetrol(1),20(S)-dammar-3-oxo-23-ene-25-hydroperoxyl-6α,12β,20-triol(2),20(S)-dammar-12-oxo-23-ene-25-hydro-peroxyl-3β,6α,20-triol(3),20(S)-dammar-3-oxo-23-ene-25-hydroperoxyl-12β,20-diol(4),20(S),24(R)-epoxy-3,4-seco-dammar-25-hydroxy-12-one-3-oicacid(5),20(S),24(R)-epoxy-3,4-seco-dammar-25-hydroxy-12-one-3-oicacidmethylester(6),and6α-hydroxy-22,23,24,25,26,27-hexanordammar-3,12,20-trione(7)等化合物及其制备方法的相关报导，未见其在抗炎相关药理活性方面的报道，也未见其在治疗抗炎药物及药物制剂中的报道。
技术实现思路
：本专利技术旨在提供一种臭七次生代谢物20(S)-dammar-25-ene-24(S)-hydroperoxyl-3β,6α,12β,20-tetrol(1),20(S)-dammar-3-oxo-23-ene-25-hydroperoxyl-6α,12β,20-triol(2),20(S)-dammar-12-oxo-23-ene-25-hydro-peroxyl-3β,6α,20-triol(3),20(S)-dammar-3-oxo-23-ene-25-hydroperoxyl-12β,20-diol(4),20(S),24(R)-epoxy-3,4-seco-dammar-25-hydroxy-12-one-3-oicacid(5),20(S),24(R)-epoxy-3,4-seco-dammar-25-hydroxy-12-one-3-oicacidmethylester(6),and6α-hydroxy-22,23,24,25,26,27-hexanordammar-3,12,20-trione(7)的制备方法，以其为活性成分的药物组合物，及其在制备预防炎症性病变的药物中的应用，以及其在制备治疗炎症性疾病的药物中的应用。为了实现本专利技术的上述目的，本专利技术提供了如下的技术方案：如下结构式所示的臭七次生代谢物1-7，臭七次生代谢物1-7来源于臭七即感染根腐病的腐根三七的次生代谢物。抗炎药物组合物，其含有臭七次生代谢物1-7，单体或混合物作为有效成分，并至少还包含一种药学上可接受的载体。本专利技术同时提供了臭七次生代谢物1-7的制备方法，该方法是将风干的臭七粉碎，60℃条件下甲醇回流提取3次，过滤。滤液经真空浓缩去除有机溶剂，上大孔树脂层析柱，以纯水洗脱去除多糖，再用甲醇洗脱得皂苷粗品。皂苷粗品上硅胶层析柱，用氯仿：甲醇体积比为7：3的溶剂洗脱，得三个部分即A，B和C。B部分继续上RP-18，用甲醇：水体积比从1：9到9：1的溶剂进行梯度洗脱，得到8个部分即B1-B8，将B1继续上硅胶层析柱，用氯仿：甲醇体积比10：1的溶剂洗脱得4个部分即B1.1-B1.4，将B1.2上RP-18半制备柱层析，用甲醇：水体积比从1：1到9：1的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物2和3；B3部分上硅胶半制备层析柱，用乙腈：水体积比35：65的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物1；B4部分上硅胶层析柱，用氯仿：甲醇体积比200：1的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物7；B5部分上硅胶层析柱，氯仿：甲醇体积比200：1到50：1的溶剂洗脱得5个部分即B5.1-B5.5，B5.5部分经半制备高效液相色谱仪纯化，经乙腈：水体积比43:57的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物4；B7部分上硅胶柱层析，氯仿：甲醇体积比200：1到50：1的溶剂洗脱得5个部分即B7.1-B7.5，B7.3部分上RP-18层析柱，甲醇：水体积比为50:50的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物6；并经半制备高效液相色谱仪纯化，用乙腈：水体积比43:57的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物5。本专利技术同时还提供了臭七次生代谢物1-7在制备预防炎症性病变的药物中的应用和在制备治疗炎症性疾病的药物中的应用。本专利技术此外还提供了所述的药物组合物在制备预防炎症性病变的药物中的应用，以及所述的药物组合物在制备治疗炎症性疾病的药物中的应用。所述的上述臭七次生代谢物1-7的制备是采用天然产物系统分离方法从臭七中分离、纯化和结构鉴定。所述的臭七次生代谢物1-7的结构鉴定是指将分离得到的单体化合物进行红外光谱、紫外光谱、高分辨质谱和核磁共振图谱分析，确定结构。本专利技术另外还提供了臭七次生代谢物1-7对抑制小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7一氧化氮产生的影响评价方法。该方法是指将从中科院上海细胞库获得的小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7接种于96空板中，接种密度为1.5×105个细胞/孔。化合物1-7分别溶解于DMSO溶剂中，制备出浓度为50μM的溶液及其连续梯度稀释溶液，之后进行细胞处理(每个处理设本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.如下结构式所示的臭七次生代谢物1-7，/n

【技术特征摘要】
1.如下结构式所示的臭七次生代谢物1-7，





2.如权利要求1所述的臭七次生代谢物1-7，其特征在于该7个化合物来源于臭七的次生代谢物。


3.抗炎药物组合物，其含有权利要求1所述的臭七次生代谢物1-7单体或混合物作为有效成分，并至少包含一种药学上可接受的载体。


4.权利要求1所述的臭七次生代谢物1-7的制备方法，其特征在于该方法是将风干的臭七粉碎，60℃条件下甲醇回流提取3次，过滤，滤液经真空浓缩去除有机溶剂，上大孔树脂层析柱，以纯水洗脱去除多糖，再用甲醇洗脱得皂苷粗品，皂苷粗品上硅胶层析柱，用氯仿︰甲醇体积比为7︰3的溶剂洗脱，得三个部分A，B和C；B部分继续上RP-18，用甲醇︰水体积比从1︰9到9︰1的溶剂进行梯度洗脱，得到8个部分B1-B8，将B1继续上硅胶层析柱，用氯仿︰甲醇体积比10︰1的溶剂洗脱得4个部分B1.1-B1.4，将B1.2上RP-18半制备柱层析，用甲醇︰水体积比从1︰1到9︰1的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物2和3；B3部分上硅胶半制备层析柱，用乙腈︰水体积比35︰65的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物1；B4部分上硅胶层析柱，用氯仿︰甲醇体积比200︰1的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物7；B5部分上硅胶层析柱，氯仿︰甲醇体积比200︰1到50︰1的溶剂洗脱得5个部分B5.1-B5.5，B5.5部分经半制备高效液相色谱仪纯化，经乙腈︰水体积比43:57的溶剂洗脱、浓缩干燥得化合物4；B7部分上硅胶柱层析，氯...

【专利技术属性】
技术研发人员：张颖君，朱宏涛，尚佳欢，王东，杨崇仁，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：云南;53