一种移液器容量的校准方法技术

本发明专利技术公开了一种移液器容量的校准方法，该方法采用紫外可见分光光度法对移液器的容量进行校准，采用单染色模式对1μL以上的容量校准，通过标准工作曲线和溶液在特定波长下的吸光度，计算出移液器在待校准点的容量；采用双染色模式对1μL以下的容量校准，测量时采用微孔比色板，双染色模式中的稀释液体积通过测量溶液在730nm下的吸光度换算得到，消除了稀释液的添加过程引入的不确定度，提高了测量准确度。本发明专利技术相对于现有技术，一方面，克服了衡量法中液体自然蒸发的影响，降低了对环境条件的要求；另一方面，通过单染色和双染色模式，同时实现了1μL以上与1μL以下容量的准确校准，能够满足不同准确度等级下的校准需求。

A calibration method of pipette capacity

The invention discloses a calibration method for the capacity of the pipette, which uses the ultraviolet visible spectrophotometry to calibrate the capacity of the pipette, uses the single dye mode to calibrate the capacity above 1 \u03bc L, calculates the capacity of the pipette at the point to be calibrated through the standard working curve and the absorbance of the solution at a specific wavelength, and uses the double dye mode to calibrate the capacity below 1 \u03bc L The volume of the diluent in the double staining mode is obtained by conversion of the absorbance of the solution at 730nm. The uncertainty introduced in the process of diluent addition is eliminated and the measurement accuracy is improved. Compared with the prior art, on the one hand, the invention overcomes the influence of natural evaporation of liquid in the measurement method and reduces the requirements for environmental conditions; on the other hand, through the single dye and double dye modes, the accurate calibration of capacity above 1 \u03bc L and below 1 \u03bc L is realized at the same time, which can meet the calibration requirements under different accuracy levels.

【技术实现步骤摘要】
一种移液器容量的校准方法
本专利技术涉及移液器
，尤其涉及一种移液器容量的校准方法。
技术介绍
移液器作为常用的微量液体容量计量器具之一，由于携带方便，操作简单，移液器被广泛用于医院、卫生防疫站、输血站、生化实验室、环境实验室、食品分析实验室中，其应用越来越广，属于精密液体取样仪器，可以对少量液体样品及试液进行迅速、准确的定量取样和加样，对于可调移液器，操作人员还可以根据实际需要调整移液器的容量值。特别是随着生物制药，基因工程与分子诊断的快速发展，该行业对微量液体容量的应用需求越来越高，测量人员对移液器的准确度也越来越关注。移液器作为移液时必要的设备，其容量的校准直接影响测定结果，但在长期使用过程中，操作、温度、人为因素等都会对其精度造成影响，不达标的移液器在使用过程中存在移液不足或过量，可能会导致生产事故或研究成果偏差，为保证结果数据具有良好的精密度、准确度和可信度，必须对其进行定期校准。现有技术中，对微小容量进行计量校准时通常采用衡量法，即称量被检移液器某一刻度内所放出的纯水的质量，再由此及水的密度求得被检移液器的实际容积，并与检定点容量进行比对。该方法需要配备分度值为0.001mg的精密电子天平，且对使用环境，例如温度、压力、湿度等的要求很高，一般只能在精密恒温实验室进行测量，并且在测量过程中，校准的容量越小，由液体自然蒸发带来的影响也越大，并且人工操作也会带来一定的误差。本领域迫切需要提供一种移液器容量的校准方法，以解决上述技术问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种移液器容量的校准方法，以解决
技术介绍
中的移液器采用衡量法校准存在的技术缺陷。一种移液器容量的校准方法，包括以下步骤：S1、配制显色液；S2、移取定量的稀释液至若干比色瓶中；S3、按照比例移取所述显色液配置成系列标准溶液；S4、采用分光光度计测定所述系列标准溶液的吸光度值，得到标准工作曲线；S5、将步骤S2中的装有所述稀释液的比色瓶放入所述分光光度计中进行调零；将移液器调至需要校准的容量，移取对应容量的所述显色液，加入至所述比色瓶中并摇匀，测量吸光度值，根据标准工作曲线计算出在待校准容量点的容量值和误差；S6、按照预设的校正次数重复步骤S5，计算测量重复性。进一步地，所述显色液中的显色剂为丽春红S，所述分光光度计的检测波长为520nm。进一步地，所述移液器所校准的容量在1μL以上，所述预设的校正次数大于等于3次。进一步地，所述稀释液为纯水，若干个所述比色瓶的吸光度相同。一种移液器容量的校准方法，包括以下步骤：S1、配制显色液，所述显色液中含有第一显色剂；S2、配制稀释液，所述稀释液中含有第二显色剂；S3、配制基线溶液；S4、将所述显色液和所述稀释液按比例配制成系列标准溶液，所述系列标准溶液对应不同量程的移液器的校准；S5、采用分光光度计测量所述系列标准溶液的吸光度值，计算出各标准溶液中所述第一显色剂和所述第二显色剂在最大吸收波长处单位光程下的吸光度；S6、将所述基线溶液放入所述分光光度计内进行基线校正；将移液器调至要校准的容量，移取对应容量的所述标准溶液至微孔比色板的微孔中，然后再移取一定量的所述稀释液至所述微孔中并混合均匀，将所述微孔比色板放入所述分光光度计中测量所述第一显色剂和所述第二显色剂的吸光度值，根据所述微孔中的液体总体积、所述标准溶液中所述第一显色剂和所述第二显色剂在最大吸收波长处单位光程下的吸光度，计算出在待校准容量点的容量值和误差；S7、按照预设的校正次数重复步骤S6，计算测量重复性。进一步地，所述第一显色剂为丽春红S；所述第二显色剂通过氯化铜与乙二胺四乙酸络合形成，所述稀释液的pH为6.0。进一步地，所述分光光度计的检测波长为520nm和730nm。进一步地，所述微孔呈截锥形，所述微孔的直径自所述微孔的底部逐渐增大。进一步地，所述微孔具有已知的锥角角度和底部直径尺寸。进一步地，所述移液器所校准的容量在1μL以下，所述预设的校正次数大于等于3次。实施本专利技术，具有如下有益效果：本专利技术的移液器容量的校准方法，采用紫外可见分光光度法对移液器的容量进行校准，采用单染色模式对1μL以上的容量进行校准，通过标准工作曲线和溶液在特定波长下的吸光度，计算出在待校准点的容量；采用双染色模式对1μL以下的容量进行校准，测量时采用微孔比色板，双染色模式中的稀释液体积通过溶液在730nm下的吸光度换算得到，消除了稀释液的添加过程引入的不确定度，提高了测量准确度。该移液器容量的校准方法，一方面，克服了衡量法中液体自然蒸发的影响，降低了校准过程对环境条件和人员操作的要求；另一方面，通过单染色和双染色模式，同时实现了1μL以上与1μL以下容量的准确校准，能够满足不同准确度等级下的校准需求。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案和优点，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单的介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它附图。图1是本专利技术实施例中的标准工作曲线；图2是本专利技术实施例中的微孔比色板上微孔的结构示意图；其中，图中：横坐标为各标准溶液的理论计算标准容量值，单位为μL，纵坐标为吸光度，单位为Abs，l为液体的深度，D为微孔的底部直径，θ为截锥形微孔的锥角。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合实施例对本专利技术作进一步地详细描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例本实施例提供了一种移液器容量的校准方法，包括以下步骤：S1、配制显色液；S2、移取定量的稀释液至若干比色瓶中；S3、按照比例移取显色液配置成系列标准溶液；S4、采用分光光度计测定系列标准溶液的吸光度值，得到标准工作曲线；S5、将步骤S2中的装有稀释液的比色瓶放入分光光度计中进行调零；将移液器调至需要校准的容量，移取对应容量的显色液，加入至比色瓶中并摇匀，测量吸光度值，根据标准工作曲线计算出在待校准容量点的容量值和误差；S6、按照预设的校正次数重复步骤S5，计算测量重复性。下面将对本实施例的具体实施方式作详细的说明。本实施例中所用的仪器设备及规格分别如下：紫外可见分光光度计，±1nm；玻璃量器，A级；精密电子天平，0.001mg；电子天平，0.1mg；移液器，0.5～10μL。在溶液配制过程中，所用的仪器设备还包括：真空抽滤装置、磁力搅拌器、容量瓶、单标线吸量管和带盖玻璃比色瓶。本实施例中所用的试剂及等级如下：丽本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种移液器容量的校准方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、配制显色液；/nS2、移取定量的稀释液至若干比色瓶中；/nS3、按照比例移取所述显色液配置成系列标准溶液；/nS4、采用分光光度计测定所述系列标准溶液的吸光度值，得到标准工作曲线；/nS5、将步骤S2中的装有所述稀释液的比色瓶放入所述分光光度计中进行调零；将移液器调至需要校准的容量，移取对应容量的所述显色液，加入至所述比色瓶中并摇匀，测量吸光度值，根据标准工作曲线计算出在待校准容量点的容量值和误差；/nS6、按照预设的校正次数重复步骤S5，计算测量重复性。/n

【技术特征摘要】
1.一种移液器容量的校准方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、配制显色液；
S2、移取定量的稀释液至若干比色瓶中；
S3、按照比例移取所述显色液配置成系列标准溶液；
S4、采用分光光度计测定所述系列标准溶液的吸光度值，得到标准工作曲线；
S5、将步骤S2中的装有所述稀释液的比色瓶放入所述分光光度计中进行调零；将移液器调至需要校准的容量，移取对应容量的所述显色液，加入至所述比色瓶中并摇匀，测量吸光度值，根据标准工作曲线计算出在待校准容量点的容量值和误差；
S6、按照预设的校正次数重复步骤S5，计算测量重复性。


2.根据权利要求1所述的移液器容量的校准方法，其特征在于，所述显色液中的显色剂为丽春红S，所述分光光度计的检测波长为520nm。


3.根据权利要求1所述的移液器容量的校准方法，其特征在于，所述移液器所校准的容量在1μL以上，所述预设的校正次数大于等于3次。


4.根据权利要求2所述的移液器容量的校准方法，其特征在于，所述稀释液为纯水，若干个所述比色瓶的吸光度相同。


5.一种移液器容量的校准方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、配制显色液，所述显色液中含有第一显色剂；
S2、配制稀释液，所述稀释液中含有第二显色剂；
S3、配制基线溶液；
S4、将所述显色液和所述稀释液按比例配制成系列标准溶液，所述系列标准溶液对应不同量程的移液器的校准；
S5、采用...

【专利技术属性】
技术研发人员：许诚，张诚春，张怡雯，杨传飞，
申请(专利权)人：苏州市计量测试院，
类型：发明
国别省市：江苏;32