一种用于预防或治疗口腔疾病的药物组合物和食品制造技术

本发明专利技术公开了一种用于预防或治疗口腔疾病的药物组合物和食品，所述药物组合物和食品中均包含副干酪乳杆菌L9和唾液葡萄球菌LD11。研究表明L9和LD11能够显著缓解咬合面E级龋齿的发生程度，服用含L9和LD11后，口腔菌群结构变化显著，尤其是放线菌门显著上调，且在属分类水平上的克雷伯菌属、气球菌属、Gemella、棒状杆菌和铜绿假单胞菌显著下调，降低了口腔疾病的风险。服用L9和LD11可唾液物种丰富度显著下调，唾液葡萄球菌科、放线菌科、消化链球菌科等口腔疾病相关菌的相对丰度显著下调，可能对牙周炎疾病有缓解作用；牙菌斑菌群物种多样性显著下调，纤毛菌科、梭杆菌科及黄杆菌科的相对丰度均显著降低，可能对牙周病、口臭、龋齿等口腔疾病有缓解作用。

A pharmaceutical composition and food for the prevention or treatment of oral diseases

The invention discloses a pharmaceutical composition and food for preventing or treating oral diseases, both of which contain Lactobacillus paracasei L9 and Staphylococcus salivarius LD11. The results showed that L9 and LD11 could significantly alleviate the occurrence of E-class caries on the occlusal surface. After taking L9 and LD11, the structure of oral microflora changed significantly, especially the actinomycetes increased significantly, and the Klebsiella, balloonia, Gemella, Corynebacterium and Pseudomonas aeruginosa decreased significantly at the level of genus classification, reducing the risk of oral disease. Taking L9 and LD11 can significantly reduce the abundance of salivary species, and the relative abundance of oral disease-related bacteria such as Staphylococcus, actinomycetes and Streptococcus Alimentarius, which may alleviate periodontitis; the species diversity of dental plaque bacteria is significantly reduced, and the relative abundance of Trichoderma, fusobacteria and flavobacteriaceae is significantly reduced, which may be related to periodontal disease Oral diseases such as halitosis and caries can be alleviated.

【技术实现步骤摘要】
一种用于预防或治疗口腔疾病的药物组合物和食品
本专利技术属于口腔疾病的预防、治疗领域，特别涉及一种用于预防或治疗口腔疾病的药物组合物和食品。
技术介绍
随着我国居民生活质量的提高，口腔健康已经成为一个备受关注的公共健康问题。长期以来，一些口腔常见疾病，如龋病、牙周病及粘膜病等发病率逐年上升。口腔疾病不仅影响着人们的口腔健康，也会引发一些全身性疾病，而口腔致病菌是引起这些疾病的关键性因素，因此，对口腔中致病菌的控制和预防黏附是对预防口腔及其他系统疾病具有至关重要的意义。已有大量临床研究证明，益生菌在预防或降低口腔疾病方面起着举足轻重的作用。其中，鼠李糖乳杆菌LGG不仅在体外能够抑制口腔致病菌的生长，同时还能够定殖在口腔中，降低变异链球菌的含量从而降低儿童口腔龋病的发病率；有研究表明，通过使用益生菌咀嚼片作为学龄前儿童每日使用含氟牙膏的辅助剂，可以减少幼儿龋齿的发展。本研究所用到的菌株副干酪乳杆菌L9和唾液葡萄球菌LD11，是从长寿老人粪便中分离得到的益生菌株，已有实验证明该菌株具有较高的安全性，目前还未应用于口腔的研究。
技术实现思路
本专利技术的目的是研究副干酪乳杆菌L9和唾液葡萄球菌LD11在口腔致病菌的抑制黏附作用，并监控副干酪乳杆菌L9和唾液葡萄球菌LD11对口腔菌群的调节作用，从而为预防和控制口腔疾病提供有效措施和理论依据。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：一种用于预防或治疗口腔疾病的药物组合物，所述组合物中包含副干酪乳杆菌L9的菌体或菌体培养物或它们的提取物，以及唾液葡萄球菌LD11的菌体或菌体培养物或它们的提取物，副干酪乳杆菌L9的保藏编号为CGMCCNo.9800，所述唾液葡萄球菌LD11的保藏编号为CGMCCNo.17880。进一步的，所述副干酪乳杆菌L9通过抑制变异链球菌和戈式链球菌的黏附以及抑制牙菌斑生物膜的发展过程中的蔗糖依赖性黏附来预防或治疗口腔疾病。进一步的，所述组合物中副干酪乳杆菌L9的菌体或菌体培养物或它们的提取物的含量为15wt％-20wt％，所述组合物中唾液葡萄球菌LD11的菌体或菌体培养物或它们的提取物的含量为15wt％-20wt％。进一步的，所述口腔疾病包括龋齿、口臭和牙周病。进一步的，所述副干酪乳杆菌L9和唾液葡萄球菌LD11为具有活性的菌株或去活性的菌株。一种用于预防口腔疾病的食品，所述食品中包含副干酪乳杆菌L9的菌体或菌体培养物或它们的提取物，，以及唾液葡萄球菌LD11的菌体或菌体培养物或它们的提取物，副干酪乳杆菌L9保藏编号为CGMCCNo.9800，所述唾液葡萄球菌LD11的保藏编号为CGMCCNo.17880。进一步的，所述食品中副干酪乳杆菌L9的菌体或菌体培养物或它们的提取物的含量为5wt％-10wt％，所述食品中唾液葡萄球菌LD11的菌体或菌体培养物或它们的提取物的含量为5wt％-10wt％。进一步的，所述副干酪乳杆菌L9和唾液葡萄球菌LD11为具有活性的菌株或去活性的菌株。生物保藏：本专利技术的副干酪乳杆菌L9(Lactobacillusparacasei)，于2014年10月22日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)(保藏单位的缩写为CGMCC)，保藏编号为CGMCCNo.9800。本专利技术的唾液葡萄球菌LD11(Streptococcussalivarius)，于2019年5月31日被保藏，保藏编号为CGMCCNo.17880。本专利技术相比现有技术的有益效果为：1、本专利技术首次对所述的副干酪乳杆菌L9和唾液葡萄球菌LD11进行口腔相关的研究，通过在体外构建口腔模型，建立了基于RT-PCR技术的致病菌的定量检测方法，并且证明副干酪乳杆菌L9和唾液葡萄球菌LD11均显著抑制了戈氏链球菌和变异链球菌在羟磷灰石上的黏附，在培养2、6、18h后，戈氏链球菌和变异链球菌的黏附量均显著降低，同时副干酪乳杆菌L9显著减少了变异链球菌在羟磷灰石上形成的生物膜的厚度和密度；2、本专利技术利用变异链球菌诱导小鼠龋齿模型，进一步探究副干酪乳杆菌L9对小鼠口腔龋齿的预防和对口腔菌群的调节作用，研究结果显示：与模型组相比，L9组显著缓解咬合面E级龋齿的发生程度；通过多种致龋因子的RT-PCR的分析，表明L9的预防龋齿功能与其抑制变异链球菌的初始黏附和牙菌斑生物膜的发展过程中的蔗糖依赖性黏附有关；口腔菌群的16srDNA高通量测序结果表明，模型组口腔菌群多样性指数无显著差异，但菌群结构变化显著，尤其是放线菌门显著上调，而L9组的放线菌门明显下调，且在属分类水平上的克雷伯菌属、气球菌属、Gemella、棒状杆菌和铜绿假单胞菌显著下调，降低了口腔疾病的风险；3、通过高通量测序的方法检测L9对正常人群唾液和牙菌斑菌群的影响，并同时检测唾液pH和口腔中VSC含量的变化情况。研究结果显示，两周食用L9益生菌含片后，唾液物种丰富度显著下调，唾液链球菌科、放线菌科、消化链球菌科等口腔疾病相关菌的相对丰度显著下调，可能对牙周炎疾病有缓解作用；牙菌斑菌群物种多样性显著下调，纤毛菌科、梭杆菌科及黄杆菌科的相对丰度均显著降低，可能对牙周病、口臭、龋齿等口腔疾病有缓解作用。附图说明图1为变异链球菌和格式链球菌定量检测的标准曲线；图2为羟基磷灰石模型粘附实验的流程图；图3变异链球菌拷贝数随黏附时间的变化结果图；其中，(a)为预防组，(b)为治疗组；图4为戈氏链球菌拷贝数随黏附时间的变化结果图；其中，(a)为预防组，(b)为治疗组；图5为羟磷灰石圆盘形成生物膜厚度及其示意图；其中，(a)为羟磷灰石圆盘厚度显著性分析，*表示该组与对照组有显著性差异(P＜0.05)；(b)、(c)、(d)分别为对照组、L9组、LD11组生物膜的正面示意图，(e)、(f)、(g)分别为对照组、L9组、LD11组生物膜的侧面示意图；图6为致龋因子扩增产物电泳图；图7为spap、luxs及CiaH基因相对表达量柱形图；图8为gtf基因相对表达量柱形图；图9为小鼠牙菌斑稀释曲线图；图10为核心物种数与样本量的关系示意图；图11为门水平小鼠牙菌斑微生物群落组成热图；图12为科(a)和属(b)水平小鼠牙菌斑微生物群落组成热图；图13为OUT水平小鼠牙菌斑微生物PCoA图；图14为属水平模型组与对照组小鼠牙菌斑物种差异分析；图15为属水平小鼠牙菌斑物种差异分析示意图；图16为种水平小鼠牙菌斑链球菌物种差异分析示意图；图17为人体口腔菌群多样性的实验流程图；图18为总物种数与核心物种数与样本量的关系示意图；其中，a为唾液，b为牙菌斑，test2(4)表示第2(4)周，横坐标表示样本数量，a1、b1纵坐标表示检测到的总OUT数，a2、b2纵坐标表示核心OUT数；图19为人群唾液及牙菌本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于预防或治疗口腔疾病的药物组合物，其特征在于，所述组合物中包含副干酪乳杆菌L9的菌体或菌体培养物或它们的提取物，以及唾液葡萄球菌LD11的菌体或菌体培养物或它们的提取物，副干酪乳杆菌L9的保藏编号为CGMCC No.9800，所述唾液葡萄球菌LD11的保藏编号为CGMCC No.17880。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于预防或治疗口腔疾病的药物组合物，其特征在于，所述组合物中包含副干酪乳杆菌L9的菌体或菌体培养物或它们的提取物，以及唾液葡萄球菌LD11的菌体或菌体培养物或它们的提取物，副干酪乳杆菌L9的保藏编号为CGMCCNo.9800，所述唾液葡萄球菌LD11的保藏编号为CGMCCNo.17880。


2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述副干酪乳杆菌L9通过抑制变异链球菌和戈式链球菌的黏附以及抑制牙菌斑生物膜的发展过程中的蔗糖依赖性黏附来预防或治疗口腔疾病。


3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物中副干酪乳杆菌L9的菌体或菌体培养物或它们的提取物的含量为15wt％-20wt％，所述组合物中唾液葡萄球菌LD11的菌体或菌体培养物或它们的提取物的含量为15wt％-20wt％。


4.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述口腔疾病包括龋齿、口...

【专利技术属性】
技术研发人员：张明，韩雨婷，董园园，赵亮，
申请(专利权)人：北京工商大学，
类型：发明
国别省市：北京;11