一种适宜糖尿病人的高抗性淀粉水稻的选育方法技术

本发明专利技术属于水稻育种领域，具体涉及一种适宜糖尿病人的高抗性淀粉水稻的选育方法，S1、选择含有高抗性淀粉的水稻作为母本，含有中低直链淀粉含量的水稻作为父本，进行杂交得到F1代水稻种子；S2‑S5；S6、将步骤S5得到的单株通过SSR分子标记辅助选择，结合胶稠度、碱消值测定筛选出碱消值高于5级、软胶稠度70mm以上的单株，重复上述过程，自交2‑4次，即得到适宜糖尿病人的高抗性淀粉水稻。本发明专利技术的有益效果是：本发明专利技术采取高抗性淀粉水稻和中低直链淀粉优质水稻杂交，选育高抗性淀粉、中等直链淀粉、碱消值、软胶稠度兼顾双亲的优质水稻品种，针对性强，是优质性状有效聚合。

Breeding method of high resistant starch rice suitable for diabetic patients

The invention belongs to the field of rice breeding, in particular to a breeding method of high resistant starch rice suitable for diabetes patients. S1. Select rice containing high resistant starch as the female parent, and rice containing low and medium amylose content as the male parent to hybridize to obtain F1 generation rice seeds; S2 \u2011 S5; S6. Select a single plant obtained in step S5 through SSR molecular marker assisted selection, and combine with glue Through the determination of consistency and alkali elimination value, a single plant with alkali elimination value higher than grade 5 and soft gel consistency higher than 70mm was selected. Repeat the above process and self cross for 2 \u2011 4 times to get a high resistant starch rice suitable for diabetic patients. The beneficial effect of the invention is: the invention adopts high resistant starch rice and low and medium amylose high-quality rice to crossbreed, and selects high-quality rice varieties with high resistant starch, medium amylose, alkali elimination value and soft gel consistency, which have strong pertinence and are effective polymerization of high-quality properties.

【技术实现步骤摘要】
一种适宜糖尿病人的高抗性淀粉水稻的选育方法
本专利技术属于水稻育种领域，具体涉及一种适宜糖尿病人的高抗性淀粉水稻的选育方法。
技术介绍
随着人民生活水平的提高，人们的生活方式和饮食结构发生了改变，使得亚健康人群的数量越来越多，即人们周知的“富贵病”(吴伟等,2006)，这也是2型糖尿病发病率上升的重要诱因之一(Chenetal.,2011)。根据2016年世界卫生组织发布的《全球糖尿病报告》，全球有约4亿人口的糖尿病人。据最新的《中国成人糖尿病流行与控制现状》调查研究显示，中国18岁及以上成人糖尿病患病率已高达11.6％，糖尿病前期的患病率更是达到了惊人的50.1％。糖尿病日益威胁着人类健康，而通过药物治疗的成本高且副作用大。因此，培育糖尿病人食用的功能性稻米倍受人们的关注。抗性淀粉(ResistantStarch，RS)最初由Englyst等(1982)提出，在人体的小肠中不被吸收，血糖生成指数(GI)较低，可降低餐后血糖水平，增加饱腹感，满足糖尿病人食用米饭的愿望，提升2型糖尿病人的胰岛素敏感性，且能降低肥胖风险、预防肠道疾病和慢性肾病(Kiefferetal.,2016；Bindelsetal.,2017；Emilienetal.,2017；Meenuetal.2018)。水稻是中国人的主要口粮，食用大米中有近80％的成分为淀粉，但大多数水稻品种的RS含量低于3％(Yangetal.,2006；Huetal.,2004)，其GI一般都高于80，而高RS、低GI的品种严重匮乏。因此，培育高RS水稻品种具有重要的应用价值。尽管目前在水稻高RS的育种研究方面已取得了一定的成绩，但是仍然存在一些亟待解决的问题。最近的研究表明，RS与直链淀粉的比例呈正相关(Caietal.,2015；Linetal.,2016；Chenetal.,2017；Xiaetal.2018)。高RS水稻品种的直链淀粉含量往往比较高，口感较差，糖尿病人难以接受，改良口感是高RS水稻品种培育的重点研究方向。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提供一种适宜糖尿病人的高抗性淀粉水稻的选育方法，选育出的水稻抗性淀粉含量高，直链淀粉含量低且口感较好，适合糖尿病人食用。本专利技术提供了如下的技术方案：一种适宜糖尿病人的高抗性淀粉水稻的选育方法，S1、选择含有高抗性淀粉的水稻作为母本，含有中低直链淀粉含量的水稻作为父本，进行杂交得到F1代水稻种子；S2、将F1代植株与父本进行回交获得BC1F1代水稻种子；S3、在BC1F1代水稻植株中选择与父本性状接近的单株水稻与父本进行回交；S4、重复步骤S3，连续回交2-4次，选取与父本性状接近的单株水稻进行自交，选取直链淀粉含量17％～20％和抗性淀粉含量8％以上的单株进行自交；S5、开展系统选育，选取直链淀粉含量为10％-15％、抗性淀粉含量为10％的单株；S6、将步骤S5得到的单株通过SSR分子标记辅助选择，结合胶稠度、碱消值测定筛选出碱消值高于5级、软胶稠度70mm以上的单株，重复上述过程，自交2-4次，即得到适宜糖尿病人的高抗性淀粉水稻。优选的，所述S6中SSR分子标记辅助选择的步骤为：提取待检测植株的全基因组DNA，以RM336为SSR分子标记辅助选择的引物进行PCR扩增，检测、筛选扩增出大小为119bp的分子标记片段。优选的，所述SSR分子标记RM336所示的引物为:RM336F:CTTACAGAGAAACGGCATCGR:GCTGGTTTGTTTCAGGTTCG。优选的，PCR扩增的反应体系为：20μL反应体系包括0.15μmol/L引物，200μmol/LdNTP0.8μL，1×PCR反应缓冲液2μL，50-100ng的DNA模板2μL，1UTaq酶0.1μL，双蒸水14.5μL；所述1×PCR反应缓冲液包括50mmol/LKCl水溶液，10mmol/LTris-HCl，pH8.3，1.5mmol/LMgCl2水溶液，0.01％明胶。优选的，所述的PCR扩增的反应程序为：DNA95℃预变性3min后；94℃变性30s，58℃退火60s，72℃延伸30s，循环30次；72℃延伸10min.优选的，所述母本为浙辐111，所述父本为Q恢25。本专利技术的有益效果是：本专利技术采取高抗性淀粉水稻和中低直链淀粉优质水稻杂交，选育高抗性淀粉、中等直链淀粉、碱消值、软胶稠度兼顾双亲的优质水稻品种，针对性强，是优质性状有效聚合。培育的优质水稻保持高抗性淀粉功能特性的同时，满足籼稻大米消费者的选择。对高抗性淀粉含量水稻大面积推广与产业化采取膳食策略从源头预防我国糖尿病的发生意义重大。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术做具体说明。浙辐111是浙江大学和中国科学院遗传与发育生物学研究所培育的糖尿病专用籼稻新品种。该品种已向农业部植物新品种保护办公室申请并授权，申请号：20080431.6，可购于浙江大学农学院。Q恢25是重庆市农科院和重庆中一种业有限公司联合培育的优质恢复系，可购或惠赠于重庆中一种业有限公司。实施例1一种适宜糖尿病人的高抗性淀粉水稻的选育方法，S1、选择含有高抗性淀粉的水稻作为母本，含有中低直链淀粉含量的水稻作为父本，进行杂交得到F1代水稻种子；S2、将F1代植株与父本进行回交获得BC1F1代水稻种子；S3、在BC1F1代水稻植株中选择与父本性状接近的单株水稻与父本进行回交；S4、重复步骤S3，连续回交2-4次，选取与父本性状接近的单株水稻进行自交，选取直链淀粉含量17％～20％和抗性淀粉含量8％以上的单株进行自交；S5、开展系统选育，选取直链淀粉含量为10％-15％、抗性淀粉含量为10％的单株；S6、将步骤S5得到的单株通过SSR分子标记辅助选择，结合胶稠度、碱消值测定筛选出碱消值高于5级、软胶稠度70mm以上的单株，重复上述过程，自交2-4次，即得到适宜糖尿病人的高抗性淀粉水稻。所述S6中SSR分子标记辅助选择的步骤为：提取待检测植株的全基因组DNA，以RM336为SSR分子标记辅助选择的引物进行PCR扩增，检测、筛选扩增出大小为119bp的分子标记片段。所述SSR分子标记RM336所示的引物为:RM336F:CTTACAGAGAAACGGCATCGR:GCTGGTTTGTTTCAGGTTCG。PCR扩增的反应体系为：20μL反应体系包括0.15μmol/L引物，200μmol/LdNTP0.8μL，1×PCR反应缓冲液2μL，50-100ng的DNA模板2μL，1UTaq酶0.1μL，双蒸水14.5μL；所述1×PCR反应缓冲液包括50mmol/LKCl水溶液，10mmol/LTris-HCl，pH8.3，1.5mmol/LMgCl2水溶液，0.01％明胶。所述的PCR扩增的反应程序为：DNA95℃预变性3min后；9本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种适宜糖尿病人的高抗性淀粉水稻的选育方法，其特征在于，/nS1、选择含有高抗性淀粉的水稻作为母本，含有中低直链淀粉含量的水稻作为父本，进行杂交得到F1代水稻种子；/nS2、将F1代植株与父本进行回交获得BC

【技术特征摘要】
1.一种适宜糖尿病人的高抗性淀粉水稻的选育方法，其特征在于，
S1、选择含有高抗性淀粉的水稻作为母本，含有中低直链淀粉含量的水稻作为父本，进行杂交得到F1代水稻种子；
S2、将F1代植株与父本进行回交获得BC1F1代水稻种子；
S3、在BC1F1代水稻植株中选择与父本性状接近的单株水稻与父本进行回交；
S4、重复步骤S3，连续回交2-4次，选取与父本性状接近的单株水稻进行自交，选取直链淀粉含量17％～20％和抗性淀粉含量8％以上的单株进行自交；
S5、开展系统选育，选取直链淀粉含量为10％-15％、抗性淀粉含量为10％的单株；
S6、将步骤S5得到的单株通过SSR分子标记辅助选择，结合胶稠度、碱消值测定筛选出碱消值高于5级、软胶稠度70mm以上的单株，重复上述过程，自交2-4次，即得到适宜糖尿病人的高抗性淀粉水稻。


2.根据权利要求1所述的一种适宜糖尿病人的高抗性淀粉水稻的选育方法，其特征在于，所述S6中SSR分子标记辅助选择的步骤为：提取待检测植株的全基因组DNA，以RM336为SSR分子标记辅助选择的引物进行PCR扩增，检测、筛选扩增出大小为119bp的分子标记片段。


3.根据权利要求2所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：欧阳杰，李贤勇，王楚桃，刘剑飞，何永歆，蒋刚，朱子超，黄乾龙，管玉圣，熊英，
申请(专利权)人：重庆市农业科学院，
类型：发明
国别省市：重庆;50