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一种核酸适配体与其靶标相结合的监测装置制造方法及图纸

技术编号:22551725 阅读:47 留言:0更新日期:2019-11-13 18:13
本实用新型专利技术公开了一种核酸适配体与其靶标相结合的监测装置,包括一底座、一托盘、不同尺寸且可相互组合或替换的若干制孔模具和一光滑玻璃板;上述托盘通过底座的上开口置于底座的盒体的内腔,光滑玻璃板置于托盘上,上述若干制孔模具的至少之一盖设于盒体的上开口,以通过若干圆柱状凸起在上述凝胶上形成若干加样孔。本实用新型专利技术的监测装置能够重复使用,所制得的加样孔的底部均一,边缘圆润,且尺寸一致性好。

A monitoring device combining aptamer with its target

The utility model discloses a monitoring device combining nucleic acid aptamer with its target, which comprises a base, a tray, a number of hole making molds of different sizes which can be combined or replaced with each other and a smooth glass plate; the tray is arranged in the inner cavity of the box body of the base through the upper opening of the base, the smooth glass plate is arranged on the tray, at least one of the hole making molds is arranged on the The upper opening of the box body forms a plurality of sample holes on the above gel through a plurality of cylindrical projections. The monitoring device of the utility model can be reused, the bottom of the sample adding hole is uniform, the edge is round, and the size is consistent.

【技术实现步骤摘要】
一种核酸适配体与其靶标相结合的监测装置
本技术具体涉及一种核酸适配体与其靶标相结合的监测装置及其应用。
技术介绍
适体,单链的核酸即RNA或者单链DNA(ssDNA),经自身卷曲折叠,形成特定的三维空间结构,他们能够通过非共价的形式高亲和力和特异性地结合于其靶标分子,从而具备类似抗体的性质,且靶标分子范围广泛包括小分子,离子,蛋白,细胞,组织乃至生物体。适体的制备无需使用动物,可以体外合成;具有分子量小,靶标更广泛,免疫源性低,质控和储存简单等优点。适体由于具有广泛的前景而备受关注,但适体领域面临的瓶颈问题之一依然是筛选问题。适体,最先于1990年通过三个独立的研究人员独立开发,并且适体是通过(SystematicEvolutionofLigandsbyEXponentialenrichment,SELEX)技术体外筛选获得。通常从一个随机ssDNA和RNA(库容量为1015-1016)通过三个主要的步骤:筛选,分离以及扩增。尽管适体有可能实现高通量筛选、自动化筛选等等,但目前依然是高成本、高失败率、耗时费力的工作,很多研究者对此望而却步。在SELEX的每一轮筛选中对文库的富集情况进行监测是决定适体筛选方向是否正确以及保证筛选成功率和效率的关键步骤,现阶段也有很多的靶标和适体结合的测定方法例如点杂交(Dotblotting),凝胶迁移实验(Electrophoreticmobilityshiftassay,EMSA),基于适体的免疫吸附实验(Aptamer-linkedimmobilizedsorbentassay,ALISA),表面等离子体共振(SurfacePlasmonResonance,SPR),石英晶体微天平(QuartzCrystalMicrobalance,QCM)以及实时荧光定量PCR(real-timeQuantitativePCR,qPCR)等,但现阶段绝大多数方法均需要相对昂贵的仪器,需要对适体进行一定的化学修饰或者需要专业的仪器操作人员,因此,在常规筛选过程中存在着诸多的不足与不便。CN204154725U公开了一种用于双向琼脂糖扩散试验的平皿,其在平皿主体上设计了凸起,在凝胶凝固后用打孔器对着凸起打孔,从而避免打穿凝胶,但其存在打孔底部不均一,打孔边缘不圆润等缺点。
技术实现思路
本技术的目的在于克服现有技术缺陷,提供一种核酸适配体与其靶标相结合的监测装置。本技术的技术方案如下:一种核酸适配体与其靶标相结合的监测装置,包括一底座,为一具有上开口的盒体,其底板的两侧分别具有一沿底板所在平面向外延伸的压板;一托盘,其形状尺寸适配盒体的上开口,其两端的边缘分别向上形成二侧壁;不同尺寸且可相互组合或替换的若干制孔模具,每一制孔模具均包括一顶板,该顶板的下表面为光滑的,该下表面向下凸设阵列分布、表面光滑且尺寸相同的若干圆柱状凸起;一光滑玻璃板,其尺寸与托盘的尺寸适配,以于盒体内承托凝胶;上述托盘通过底座的上开口置于底座的盒体的内腔,光滑玻璃板置于托盘上,上述若干制孔模具的至少之一盖设于盒体的上开口,以通过若干圆柱状凸起在上述凝胶上形成若干加样孔。在本技术的一个优选实施方案中,所述盒体的内腔的长度为81-243mm,宽度为26-78mm,高度为8-15mm。进一步优选的,所述托盘的长度比所述盒体的内腔的长度短0.5-1mm,所述托盘的宽度比所述盒体的内腔的宽度短0.5-1mm。进一步优选的,所述托盘的二侧壁的高度比所述盒体的内腔的高度长10-20mm。在本技术的一个优选实施方案中,所述圆柱状凸起的高度为2-8mm,直径为0.9-3mm。本技术的有益效果是:1、本技术的监测装置能够重复使用,所制得的加样孔的底部均一,边缘圆润,且尺寸一致性好。2、应用本技术的进行监测的方法将适体、靶标和对照面对面加到孔内,进行类双向免疫扩散,克服了现有结合监测测定方法的需昂贵的仪器设备以及适体需要化学标记的缺点;本技术的监测方法与常规的类免疫方法及荧光法相比减少了适体的标记的步骤(如Biotin及FAM等);与利用SPR及QCM等检测方法相比不需要复杂昂贵的检测设备,也不需要昂贵的芯片耗材,减低了成本;与利用qPCR进行检测相比,本实验操作简单,不存在由于PCR错误扩增等不稳定因素对结果造成影响,实验结果观测容易。3、应用本技术的进行监测的方法基于物质在凝胶中的自由扩散,这种扩散是以加样点为中心呈圆周扩散;当核酸适体(含偶联配体核酸)和其对应靶标加到不同的孔中,在一定的距离内,两者均呈现以加样孔为中心的圆周自由扩散,但当两者相遇接触后并开始结合形成复合物,核酸靶标复合物的扩散速度较自由核酸慢,从而与对照组相比出现了明显差异,这种差异可以通过凝胶成像技术进行检测。4、应用本技术的进行监测的方法中由于是基于物质在凝胶均相体系中的自由扩散,对靶标分子没有特殊的要求,与Dotblotting,EMSA,ALSIA以及SPR等相比,靶标范围更广。5、应用本技术的进行监测的方法与常规的双向免疫扩散相比,制备的凝胶更为均一且孔底部与载玻片之间存在相同的间距,以保证扩散的均匀性和连续性,并且可以用适体和靶标的结合缓冲液进行凝胶配制,避免了缓冲液对适体和靶标结合的影响。附图说明图1为本技术的组装状态部分结构剖视图。图2为本技术的俯视图。具体实施方式以下通过具体实施方式结合附图对本技术的技术方案进行进一步的说明和描述。实施例1如图1和图2所示,一种核酸适配体与其靶标相结合的监测装置,包括一底座1、一托盘2、不同尺寸且可相互组合或替换的若干制孔模具3和一光滑玻璃板4,除光滑玻璃板4外,其余均优选由3D打印机利用SLA技术进行打印完成,打印精度为0.10mm。底座1,为一具有上开口的盒体,其底板10的两侧分别具有一沿底板10所在平面向外延伸的压板11;盒体的内腔的长度为81-243mm(优选81mm),宽度为26-78mm(优选26mm),高度为8-15mm(优选10mm);托盘2,其形状尺寸适配盒体的上开口,其两端的边缘分别向上形成二侧壁20;托盘2的长度比盒体的内腔的长度短0.5-1mm,托盘2的宽度比盒体的内腔的宽度短0.5-1mm,托盘2的二侧壁20的高度比盒体的内腔的高度长10-20mm,优选的,托盘2的长度为80.5mm,宽度为25.5mm,二侧壁20的高度为24.5mm;不同尺寸且可相互组合或替换的若干制孔模具3,每一制孔模具3均包括一顶板30,该顶板30的下表面为光滑的,该下表面向下凸设阵列分布、表面光滑且尺寸相同的若干圆柱状凸起31,圆柱状凸起31的高度为2-8mm(优选3.20mm),直径为0.9-3mm(优选1.7mm);光滑玻璃板4,其尺寸与托盘2的尺寸适配,以于盒体内承托凝胶,该光滑玻璃板4优选为市售常规载玻片;上述托盘2通过底座1的上开口置于底座1的盒体的内腔,光滑玻璃板4置于托盘2上,上述若干制孔模具3的至少之一盖设于盒体的上开口,以通过若干圆柱状凸起31在上述凝胶上形成若干加样孔。用上述监测装置进行监测的方法,其原理为:当核酸适体(含偶联配体核酸)和其对应靶标加到不同的加样孔中,在一定的距离内,两者均呈现以加样孔为中心的圆周自本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种核酸适配体与其靶标相结合的监测装置,其特征在于:包括一底座,为一具有上开口的盒体,其底板的两侧分别具有一沿底板所在平面向外延伸的压板;一托盘,其形状尺寸适配盒体的上开口,其两端的边缘分别向上形成二侧壁;不同尺寸且可相互组合或替换的若干制孔模具,每一制孔模具均包括一顶板,该顶板的下表面为光滑的,该下表面向下凸设阵列分布、表面光滑且尺寸相同的若干圆柱状凸起;一光滑玻璃板,其尺寸与托盘的尺寸适配,以于盒体内承托凝胶;上述托盘通过底座的上开口置于底座的盒体的内腔,光滑玻璃板置于托盘上,上述若干制孔模具的至少之一盖设于盒体的上开口,以通过若干圆柱状凸起在上述凝胶上形成若干加样孔。

【技术特征摘要】
1.一种核酸适配体与其靶标相结合的监测装置,其特征在于:包括一底座,为一具有上开口的盒体,其底板的两侧分别具有一沿底板所在平面向外延伸的压板;一托盘,其形状尺寸适配盒体的上开口,其两端的边缘分别向上形成二侧壁;不同尺寸且可相互组合或替换的若干制孔模具,每一制孔模具均包括一顶板,该顶板的下表面为光滑的,该下表面向下凸设阵列分布、表面光滑且尺寸相同的若干圆柱状凸起;一光滑玻璃板,其尺寸与托盘的尺寸适配,以于盒体内承托凝胶;上述托盘通过底座的上开口置于底座的盒体的内腔,光滑玻璃板置于托盘上,上述若干制孔模具的至少之一盖设于盒体的上开口...

【专利技术属性】
技术研发人员:张伟林俊生郑志发刘清秀吴莉婷
申请(专利权)人:华侨大学
类型:新型
国别省市:福建,35

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