本发明专利技术涉及一种Skiv2l2(MTR4)基因在肿瘤治疗中的用途，属于基因治疗和医学诊断领域。本发明专利技术提供了Skiv2l2(MTR4)基因作为靶标在筛选肿瘤治疗药物中的用途，所述Skiv2l2(MTR4)基因的DNA序列如SEQ ID NO：1所示。本发明专利技术利用shRNA进行基因敲低，降低Skiv2l2(MTR4)在肝癌细胞的表达，有效抑制了肿瘤细胞的生长、增殖、体内成瘤能力；由此，Skiv2l2(MTR4)可在肝癌治疗中作为肿瘤靶向治疗的应用，通过敲低其表达来达到治疗肝癌的效果。
The use of skiv2l2 (mtr4) gene in tumor therapy
The invention relates to the use of skiv2l2 (mtr4) gene in tumor therapy, belonging to the field of gene therapy and medical diagnosis. The invention provides the use of skiv2l2 (mtr4) gene as a target in the screening of tumor treatment drugs. The DNA sequence of skiv2l2 (mtr4) gene is shown in SEQ ID No: 1. The invention uses shRNA to knock down gene, reduces the expression of skiv2l2 (mtr4) in liver cancer cells, effectively inhibits the growth, proliferation and tumorigenesis of tumor cells in vivo; therefore, skiv2l2 (mtr4) can be used as tumor targeted therapy in liver cancer treatment, and achieves the effect of treating liver cancer by knocking down its expression.
【技术实现步骤摘要】
Skiv2l2（MTR4）基因在肿瘤治疗中的用途
本专利技术涉及一种Skiv2l2(MTR4)基因在肿瘤治疗中的用途，属于基因治疗和医学诊断领域。
技术介绍
癌基因与抑癌基因的发现在肿瘤研究室史上具有划时代的意义，是人类在癌症的病因研究上认识的不断丰富完善的结果，也是人们开始从分子水平认识肿瘤的重要标志。它们广泛的存在于细胞内，参与细胞的增殖、分化及凋亡等正常的生理过程调节，是细胞生命活动中不可缺少的重要组成成分。癌基因是通过其表达产物可在体外引起正常细胞转化、在体内引起癌瘤的一类基因。癌基因被发现存在于病毒中，随后在正常细胞基因组中也存在，以及与病毒癌基因相似的同源，这类基因无促癌活性的被成为原癌基因，其表达产物参与细胞增殖、分化等重要的生理调节过程。当细胞受到各种生物、理化作用时，原癌基因可通过突变、重组等发生结构或表达水平异常，成为促进细胞转化的癌基因，最终引起肿瘤的发生。因此，癌基因的研究可以让我们对肿瘤的发生、发展有更深的认识，对肿瘤的诊断、分型、治疗方案的选择、治疗反应和预后判断上有广阔的应用前景,为临床上肿瘤的治疗提供进一步的策略。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处而提供一种Skiv2l2(MTR4)基因在肿瘤治疗中的用途，通过降低Skiv2l2(MTR4)基因在肿瘤细胞中的表达，可有效地抑制肿瘤细胞生长、增殖，从而达到抗肿瘤的目的。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：第一方面，本专利技术提供了Skiv2l2(MTR4)基因作为靶标在筛选肿瘤治疗药物中的用途，所述Skiv2l2(MTR4)基因的DNA序列如SEQIDNO：1所示。研究表明，Skiv2l2(MTR4)基因在肝癌细胞中过表达，当降低Skiv2l2(MTR4)基因在肝癌细胞中的表达时，可有效抑制肿瘤细胞的生长、增殖，从而达到抗肿瘤的目的。由此，可将Skiv2l2(MTR4)基因作为靶标用于筛选肿瘤治疗药物。作为上述技术方案的优选实施方式，所述肿瘤为肝癌。作为上述技术方案的优选实施方式，所述肿瘤治疗药物包含shRNA，所述shRNA的碱基序列为GGAAGGATTTCCGATGGATTT(如SEQIDNO：2所示)。shRNA即短发夹RNA。shRNA可通过RNA干扰降低目的基因的表达来引起表型改变。本专利技术利用shRNA敲底Skiv2l2(MTR4)基因在肝癌细胞中的表达。作为上述技术方案的优选实施方式，所述肿瘤治疗药物还包含可诱导shRNA在体内表达的诱导剂。第二方面，本专利技术提供了可降低肿瘤细胞中Skiv2l2(MTR4)基因表达的试剂在制备肿瘤治疗药物中的用途，所述Skiv2l2(MTR4)基因的DNA序列如SEQIDNO：1所示。降低肿瘤细胞中Skiv2l2(MTR4)基因表达的试剂包括但不限于使Skiv2l2(MTR4)基因表达敲底的试剂。作为上述技术方案的优选实施方式，所述肿瘤为肝癌。作为上述技术方案的优选实施方式，所述可降低肿瘤细胞中Skiv2l2(MTR4)基因表达的试剂包含shRNA，所述shRNA的碱基序列为GGAAGGATTTCCGATGGATTT(如SEQIDNO：2所示)。第三方面，本专利技术还提供了一种肿瘤治疗药物，所述肿瘤治疗药物包含可降低肿瘤细胞中Skiv2l2(MTR4)基因表达的试剂，所述Skiv2l2(MTR4)基因的DNA序列如SEQIDNO：1所示。作为上述技术方案的优选实施方式，所述可降低肿瘤细胞中Skiv2l2(MTR4)基因表达的试剂包含shRNA，所述shRNA的碱基序列为GGAAGGATTTCCGATGGATTT(如SEQIDNO：2所示)。作为上述技术方案的优选实施方式，所述肿瘤治疗药物还包含可诱导shRNA在体内表达的诱导剂；更优选地，所述可诱导shRNA在体内表达的诱导剂为强力霉素(Doxycycline)。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：Skiv2l2(MTR4)在肝癌细胞中过表达，本专利技术利用shRNA进行基因进行敲低，降低Skiv2l2(MTR4)在肝癌细胞的表达，有效抑制了肿瘤细胞的生长、增殖。由此，Skiv2l2(MTR4)可在肿瘤治疗中作为肿瘤靶向治疗的应用，通过敲低其表达来达到治疗肿瘤的效果。本专利技术还根据敲低后观察对肿瘤的表型变化来研究Skiv2l2(MTR4)在肿瘤发生发展中作用，以此来阐明其对肿瘤的作用模式和调控机制，为开发临床肿瘤治疗的靶点奠定基础。附图说明图1为本专利技术实施例1条件性敲低(条件性即指四环素调控表达系统)Skiv2l2(MTR4)表达对人肝癌细胞株HEPG2体内成瘤性的影响；图2为本专利技术实施例1条件性敲低(条件性即指四环素调控表达系统)Skiv2l2(MTR4)表达对人肝癌细胞株PLC/RPF/5体内成瘤性的影响；图3为本专利技术实施2敲低Skiv2l2(hMTR4)表达对人肝癌细胞株HEPG2及PLC/RPF/5体外对肿瘤增殖及集落形成的影响；图4为MTR4shRNA与对照组对人肝癌细胞株HepG2和PLC/RPF/5的影响结果图；其中，SC表示scrambled；KD表示knockdown。具体实施方式为更好地说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明。实施例1本专利技术Skiv2l2(MTR4)基因在肿瘤治疗中的用途的一种实施例，本实施例采用shRNA降低肿瘤细胞中Skiv2l2(MTR4)基因的表达，本实施例的具体实验步骤如下：A、动物模型建立a、实验动物动物6～8周龄的NOD/SCID小鼠10只，体重20～25g，由北京实验动物中心提供。b、分实验组和对照组对照组：转入含有条件性(条件性即指四环素调控表达系统)敲低Skiv2l2(MTR4)载体(该载体含有ShMTR4靶向序列，ShMTR4靶向序列如SEQIDNO：2所示，具体为GGAAGGATTTCCGATGGATTT)的HepG2、PLC/RPF/5细胞株；实验组：转入含有条件性(条件性即指四环素调控表达系统)敲低Skiv2l2(MTR4)载体(该载体含有ShMTR4靶向序列，ShMTR4靶向序列如SEQIDNO：2所示，具体为GGAAGGATTTCCGATGGATTT)的HepG2、PLC/RPF/5细胞株，药物诱导目标基因敲低。c、皮下成瘤取10只小鼠(20～25g/只)，将转入含有条件性Skiv2l2(MTR4)敲低载体的HepG2、PLC/RPF/5细胞收集，并用冷的150ulPBS重悬，分别接种于左右下肢皮下。当移植后第2-3周左右长出移植瘤，当移植瘤长到5mm3左右时，分为两组，一组给Doxycycline(强力霉素)诱导shRNA的体内表达，一组不给Doxycycline(强力霉素)，连续给药12天，解剖后拍照并剥下皮下瘤体，称瘤重，拍照。实验结果敲低Skiv2l2(MTR4)表达对人肝癌细胞株HEPG2体内成瘤性的影响如图1所示，敲低Skiv2l2(MTR4)表达对人肝癌细胞株PLC/RPF/5体内成瘤性的影响如图2所示。由图1和图2可见，加诱导剂Doxycycline，诱导Skiv2l2(MTR4)表达降低组，移植瘤其大小和重量比对照组低和轻，其生长也相对缓慢。结论：上述实验结果表明：利用基因敲低技术，降低S本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.Skiv2l2(MTR4)基因作为靶标在筛选肿瘤治疗药物中的用途，所述Skiv2l2(MTR4)基因的DNA序列如SEQ ID NO：1所示。
【技术特征摘要】
1.Skiv2l2(MTR4)基因作为靶标在筛选肿瘤治疗药物中的用途，所述Skiv2l2(MTR4)基因的DNA序列如SEQIDNO：1所示。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肿瘤为肝癌。3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肿瘤治疗药物包含shRNA，所述shRNA的碱基序列为GGAAGGATTTCCGATGGATTT。4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述肿瘤治疗药物还包含可诱导shRNA在体内表达的诱导剂。5.可降低肿瘤细胞中Skiv2l2(MTR4)基因表达的试剂在制备肿瘤治疗药物中的用途，所述Skiv2l2(MTR4)基因的DNA序列如SEQIDNO：1所示。6.如权利要求5所述的用途，其特征在于，所述肿瘤为肝癌。7.如权利要求5所述的用途，其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐洋，喻莉莉，
申请(专利权)人：南方医科大学，中山大学附属第八医院深圳福田，
类型：发明
国别省市：广东,44
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