一种丁酸梭菌高密度发酵及其微生态菌剂的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种丁酸梭菌高密度发酵及其微生态菌剂的制备方法，属于微生物发酵生产领域。本发明专利技术通过在菌种种子发酵阶段控制至对数生长后期，并且在发酵初始以及发酵4‑5h、12‑15h过程中，分别控制发酵的罐压、通风量、发酵pH以及发酵温度，有效解决丁酸梭菌菌种活力低，脱芽孢率低等问题，芽孢率可达98％以上，芽孢完全脱落率达到95％以上，且本发明专利技术发酵工艺简单，有效减少发酵染菌以及降低发酵原料和时间成本。本发明专利技术制备的微生态菌剂，可显著提高菌剂稳定性，菌剂存活率高达97％以上，可实现菌种生产的产业化标准。

High density fermentation of Clostridium butyricum and preparation of its microbial agent

【技术实现步骤摘要】
一种丁酸梭菌高密度发酵及其微生态菌剂的制备方法
本专利技术属于微生物发酵生产领域，具体涉及一种丁酸梭菌高密度发酵及其微生态菌剂的制备方法。技术背景丁酸梭菌(Clostridiumbutyricum)属于芽孢杆菌科，梭菌属，革兰氏阳性，有芽孢，孢子卵圆，偏心或次端生，其直径为(0.6-1.2)×(3.0-7.0)μm，可抵抗不良环境。丁酸梭菌做为饲料添加剂在饲料中应用，在动物肠道内可体现六大生物特性:一是促进动物肠道有益菌群(双歧杆菌,乳酸杆菌)的增殖和发育，抑制肠道内有害菌和腐败菌的生长、繁殖，纠正肠道菌群紊乱，减少肠毒素的发生；二是在动物肠道内能产生B族维生素、维生素K、淀粉酶等物质，具有保健作用；三是厌氧或者兼性厌氧芽孢杆菌，不受胃酸、胆汁酸等影响；四是对多种饲用抗生素有较强的耐受性,可配伍使用；五是对于减少当前饲料中抗生素产品的滥用、减少药物在肉品中的残留、降低动物细菌的耐药性和保障动物健康方面有着重要的意义。丁酸梭菌属于产芽孢的、肠道严格厌氧的共生梭菌群的一员，是近年来厌氧型微生态制剂的研发重点，但受制于厌氧发酵技术和产品稳定性，丁酸梭菌行业整体发酵生产水平不高，且芽孢率本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种丁酸梭菌高密度发酵及其微生态菌剂的制备方法，其特征在于：具体步骤如下：(1)种子培养：将丁酸梭菌分别进行一级种子和二级种子培养，在所述二级种子培养中：静置培养至菌种对数生长后期，得到二级种子液；所述二级种子液活菌数为5‑7.6×10

【技术特征摘要】
1.一种丁酸梭菌高密度发酵及其微生态菌剂的制备方法，其特征在于：具体步骤如下：(1)种子培养：将丁酸梭菌分别进行一级种子和二级种子培养，在所述二级种子培养中：静置培养至菌种对数生长后期，得到二级种子液；所述二级种子液活菌数为5-7.6×108cfu/ml；(2)发酵培养：将所述二级种子液按照接种量2-8％接入发酵培养基中，发酵初始通入氮气，控制罐压0.05-0.06MPa，风量0.8-1L/min，转速80-120rpm，发酵温度37-38℃，发酵过程中维持pH6.5-7.2；当发酵至4-5h，降低罐压至0.03-0.04MPa，降低通风量至0.5-0.6L/min；当发酵至12-15h，调节pH至6.5-6.8,调整温度至34-35℃，直至发酵结束，得到发酵液，总发酵时间为24-28小时；(3)制备菌剂：向所述发酵液中加入保护剂，混合，进行喷雾干燥，得到丁酸梭菌菌剂。2.如权利要求1所述一种丁酸梭菌高密度发酵及其微生态菌剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，菌种对数生长后期具体为菌种生长曲线斜率k值为0.6-0.8时期。3.如权利要求1所述一种丁酸梭菌高密度发酵及其微生态菌剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，种子的培养步骤为：将丁酸梭菌按照接种量0.7％-4％接入一级种子培养基中，在32-38℃条件下，静置培养40-48小时，得到一级种子液；将所述一级种子液进行75-85℃水浴5-10min高温处理后，按照接种量1-5％接入二级种子培养基中，在32-38℃条件下，静置培养，当菌种生长曲线斜率k值达到0.6-0.8时，停止发酵，得到二级种子液。4.如权利要求1所述一种丁酸梭菌高密度发酵及其微生态菌剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，种子培养还包括三级种子的培养，所述培养步骤具...

【专利技术属性】
技术研发人员：王连民，刘珂飞，孟铁健，
申请(专利权)人：天津市圣世莱科技有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12