【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】可筛选的肝脏疾病模型和方法
本专利技术涉及3D组织培养领域及其在药物测试中的应用。引言肝纤维化是几乎所有慢性肝损伤的常见结果,慢性肝损伤包括病毒性肝炎(即,乙型肝炎和丙型肝炎)、酒精性或肥胖相关的脂肪性肝炎(即,非酒精性脂肪性肝炎(NASH))、寄生虫病(即,血吸虫病)、代谢紊乱(即肝豆状核变性)、血色素沉着症和其他贮积症、先天性异常、自身免疫和慢性炎症(即,结节病)和药物毒性等(Puche、Saiman和Friedman,2013)。肝纤维化被世界卫生组织定义为由于新纤维形成而存在过量胶原蛋白。由于静止的肝星状细胞活化成肌成纤维细胞,因此细胞外基质(ECM)产生纤维。目前主要在动物实验中研究肝纤维化,但也使用分离的肝细胞类型来体外研究纤维化。在Liedtke等人的2013的综述中总结了肝纤维化的体内实验模型。简而言之,肝纤维化最常见的动物模型是手术胆管结扎。其他模型使用基因工程动物,比如Mdr2敲除小鼠或显性失活的TGF-βRII小鼠。另一种类型的动物模型通过注射化学物质(例如,四氯化碳、硫代乙酰胺、二甲基亚硝胺)或通过喂食(例如,高脂肪饮食、胆碱缺乏的饮食)诱导肝纤维化。目前用于肝纤维化的体外模型通常使用肝星状细胞系(HSC,例如,hTERT-HSC、LX2)或新鲜分离的人或啮齿动物HSC的2D培养物。这些培养系统的共同限制是由于HSC与2D培养皿的相互作用而让HSC在培养物中激活成肌成纤维细胞。此外,这些模型仅仅是肝脏形态和生理学的不完整表示,这限制了它们在临床前应用中的使用,例如,测定药物引起纤维化的风险。近年来,3D球体培养物的使用已成为获得 ...
【技术保护点】
1.人工球状微组织,其至少包含肝细胞和肝的星状细胞以及进一步包括至少一种类型的肝的炎症细胞。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.12.23 GB 1622149.11.人工球状微组织,其至少包含肝细胞和肝的星状细胞以及进一步包括至少一种类型的肝的炎症细胞。2.权利要求1的人工球状微组织,其中所述肝的炎症细胞是库普弗细胞。3.权利要求1或2的人工球状微组织,其中所述微组织进一步包括内皮细胞。4.权利要求1至3中任一项的人工球状微组织,其中所述微组织具有≥30μm和≤500μm的直径。5.权利要求1至4中任一项的人工球状微组织,其中所述微组织总共包含≥500和≤10000个细胞。6.权利要求1至5中任一项的人工球状微组织,其中所述窦内皮细胞形成包围包含其他细胞类型的三维微组织的细胞层。7.前述任一项权利要求的人工球状微组织,其中所述微组织中的细胞是哺乳动物细胞,优选选自以下:·人细胞,·猴细胞,·猪细胞,·犬细胞,和/或·啮齿类细胞。8.前述任一项权利要求的人工球状微组织,其中a)所述微组织包含促活化的星状细胞,和/或b)所述微组织代表基础状态的肝脏模型。9.权利要求8b的人工球状微组织,其中所述微组织进展至选自下列的状态之一:a)胰岛素抗性状态,b)脂肪变性状态,c)炎症状态,d)纤维化状态,e)NASH/纤维化表型、选项1,f)NASH/纤维化表型、选项2。10.制备至少包含肝细胞、肝的星状细胞、肝的炎症细胞以及进一步的内皮细胞的球状微组织的方法,所述方法包括以下步骤:a)产生或提供至少包含肝细胞、肝的星状细胞和肝的炎症细胞的微组织,b)产生或提供包含窦内皮细胞的悬浮液,c)将所述悬浮液分配到包含步骤a)的一个或多个微组织的孔或容器中,以及d)温育所述孔或容器以使窦内皮细胞粘附于微组织。11.权利要求10的方法,其中所述方法的所述微组织在悬滴系统中生长和培养。12.权利要求10的方法,其中所述方法的所述微组织在低粘附孔中生长和培养。13.权利要求10至12中任一项的方法,其中所述方法的至少一些细胞是在加工前解冻的冷冻保存的细胞。14.权利要求10至12中任一项的方法,其中所述方法的至少一些细胞是非冷冻细胞。15.根据权利要求10至14中任一项的方法获得的球状微组织。16.用于肝脏疾病建模的模型平台,所述模型平台包括权利要求1至9以及15中任一项的微组织。17.权利要求16的模型平台,所述模型平台允许选自以下的至少一种:·疾病进展的机制研究,·通过药理学或饮食干预预防疾病进展,和/或·疾病状态的逆转。18.权利要求16至17中任一项的模型平台,其进一步地以由能够建立和重现疾病特定的状态以及代表特定的预防和治疗进入点的基本培养基和试剂组成的测定就绪的形式提供。19.权利要求18的模型平台,其中所述平台还包含质量控制数据和校准数据,所述数据特定于生产批次,并提供关于选自以下的至少一个特征的信息...
【专利技术属性】
技术研发人员:S·梅斯纳,J·M·克尔姆,R·科斯塔迪诺娃安杰洛娃,W·莫里茨,
申请(专利权)人:银丝佛若有限公司,
类型:发明
国别省市:瑞士,CH
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