HLA限制性VGLL1肽及其用途制造技术

本文中提供了肿瘤抗原VGLL1特异性肽。本文中还提供了产生VGLL1特异性T细胞的方法以及它们用于治疗癌症的用途。此外，VGLL1特异性肽可用作疫苗。

HLA restricted vgll1 peptide and its application

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】HLA限制性VGLL1肽及其用途相关申请的交叉引用本申请要求于2016年10月7日提交的美国临时专利申请No.62/405,779的权益，其全部内容通过引用并入本文。包含在1KB(在MicrosoftWindows中测量的)的并且于2017年10月5日创建的名为“UTFCP1307WO_ST25.txt”的文件中的序列表通过电子提交随同提交，并且通过引用并入本文。专利技术背景1.
本专利技术总体上涉及免疫学和医学领域。更具体地，其涉及肿瘤抗原特异性肽及其用于治疗癌症的用途。2.
技术介绍
过继性T细胞治疗(adoptiveTcelltherapy，ACT；还称作“过继性细胞转移”)已经显示出作为用于治疗黑素瘤的方法的前景；遗憾的是，这种方法也已受到包括对非癌组织的毒性在内的限制的阻碍。ACT通常涉及将大量的自体活化的肿瘤特异性T细胞输注到患者中，例如以治疗癌症。ACT已经在黑素瘤患者中引起治疗性临床应答(Yee2002；Dudley2002；Yee2014)。一般来说，为了产生有效的抗肿瘤T细胞应答，通常需要以下三个步骤：使抗原特异性T细胞致敏(priming)并活化，使活化的T细胞迁移至肿瘤部位，以及通过抗原特异性T细胞来识别并杀伤肿瘤。靶抗原的选择对于诱导有效的抗原特异性T细胞是重要的。虽然已经鉴定了黑素瘤和少数其他实体瘤恶性肿瘤的数种肿瘤相关抗原，但是缺乏胰腺癌、卵巢癌、胃癌、肺癌、宫颈癌、乳腺癌和头颈癌的免疫原性靶标。因此，鉴定和验证这些常见和难以治疗的恶性肿瘤的新表位和靶抗原是有必要的。
技术实现思路
在一些实施方案中，本公开内容提供了VGLL1肽及其使用方法，例如在包括过继性T细胞治疗的治疗中。在一些实施方案中，所述肽可用于体外扩增施用于哺乳动物对象(例如人患者)以治疗疾病(例如癌症)的VGLL1特异性T细胞。在另一些实施方案中，对T细胞进行遗传改造以表达具有针对VGLL1的抗原特异性的T细胞受体(Tcellreceptor，TCR)。在另一些实施方案中，可将肽施用于哺乳动物对象以诱导免疫应答或对对象进行针对该肽的免疫接种，并且这样的免疫应答可用于治疗疾病(例如癌症)或降低获得或复发疾病的机会。在一个实施方案中，本公开内容提供了长度为35个氨基酸或更少(例如，34、33、32、31或30个氨基酸)的分离的VGLL1肽，其包含与SEQIDNO：1(LSELETPGKY)具有至少90％序列同一性的氨基酸序列，其中所述肽能够诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocyte，CTL)。在一些方面，肽包含与SEQIDNO：1具有至少91、92、93、94、95、96、97、98、99或100％序列同一性的氨基酸序列。在某些方面，肽的长度为30个氨基酸或更少，例如长度为29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11或10个氨基酸。在一些方面，肽与人I类HLA蛋白结合。在特定方面，人I类HLA蛋白是HLA-A*0101或HLA-A1家族的其他成员，例如HLA-A*0102和HLA-A*0103。在另一些方面，I类HLA蛋白是HLA-A*2902或HLA-A29家族的其他成员、或HLA-A*3002和HLA-A30家族的其他成员。在另一些方面，I类HLA蛋白是HLA-B*1801或HLA-B18家族的其他成员或HLA-B*4403或HLA-B44家族的其他成员。在另一个实施方案中，提供了药物组合物，其包含一些实施方案的分离的VGLL1肽和药物载体。在一些方面，药物组合物配制成用于肠胃外施用、静脉内注射、肌内注射、吸入或皮下注射。在某些方面，肽包含在脂质体、含脂质的纳米粒中，或基于脂质的载体中。在一些方面，药物制剂配制成用于注射或作为鼻喷雾剂吸入。另一些实施方案提供了编码一些实施方案的VGLL1肽的分离的核酸。本文中还提供了载体，其包含由编码VGLL1肽的核酸组成的连续序列。在另一个实施方案中，提供了在对象中促进免疫应答的方法，其包括向对象施用有效量的一些实施方案的VGLL1肽，其中所述肽在对象中诱导抗原特异性T细胞。在一些方面，对象被诊断为癌症。在某些方面，癌症是胰腺癌、卵巢癌、胃癌或乳腺癌。在特定方面，对象是人。在另外的一些方面，所述方法还包括施用至少第二种抗癌治疗。在一些方面，第二种抗癌治疗选白化学治疗、放射治疗、免疫治疗或手术。在特定方面，免疫治疗是免疫检查点抑制剂。在一个具体方面，免疫检查点抑制剂是抗PD1单克隆抗体。另一个实施方案提供了产生VGLL1特异性T细胞的方法，其包括获得起始T细胞群，以及使起始T细胞群与一些实施方案的VGLL1肽(例如SEQIDNO：1的肽)接触，从而产生VGLL1特异性T细胞。在一些方面，接触进一步限定为将起始T细胞群与抗原呈递细胞(antigenpresentingcell，APC)共培养，其中APC在其表面上呈递一些实施方案的VGLL1肽。在特定方面，APC是树突细胞。在一些方面，起始T细胞群是CD8+T细胞。在某些方面，T细胞是CTL。在一些方面，获得包括从外周血单核细胞(peripheralbloodmononuclearcell，PBMC)分离起始T细胞群。本文中还提供了药物组合物，其包含通过本文中的方法产生的VGLL1特异性T细胞。一个更进一步的实施方案提供了具有针对VGLL1的抗原特异性的抗原受体，例如T细胞受体(TCR)或嵌合抗原受体(chimericantigenreceptor，CAR)。另一个实施方案提供了经改造以表达VGLL1特异性TCR或CAR的T细胞。在一些方面，VGLL1特异性嵌合抗原受体包含细胞内信号传导结构域、跨膜结构域和/或细胞外结构域。在某些方面，编码CAR的DNA整合到细胞的基因组中。在一些方面，CAR的细胞外结构域包含VGLL1结合区。例如，VGLL1结合区可以是F(ab’)2、Fab’、Fab、Fv或scFv。在某些方面，CAR的细胞内信号传导结构域是T-淋巴细胞活化结构域。例如，CAR的细胞内信号传导结构域可包含CD3ξ、CD28、OX40/CD134、4-1BB/CDl37、FcεRIγ、ICOS/CD278、ILRB/CD122、IL-2RG/CD132、DAP分子、CD70、细胞因子受体、CD40或其组合。在某些方面，eCAR的跨膜结构域包含CD28跨膜结构域、IgG4Fc铰链、Fc区、CD4跨膜结构域、CD3ξ跨膜结构域、半胱氨酸突变的人CD3ξ结构域、CD16跨膜结构域、CD8跨膜结构域或促红细胞生成素受体跨膜结构域。另一个实施方案提供了在对象中治疗癌症的方法，其包括向对象施用有效量的一些实施方案的VGLL1特异性T细胞。在一些方面，癌症是胰腺癌、卵巢癌、胃癌、膀胱癌或乳腺癌。在特定方面，对象是人。在一些方面，抗原特异性T细胞是自体的。在一些方面，确定对象具有表达VGLL1的癌细胞。在某些方面，所述方法还包括在施用抗原特异性T细胞之前进行对象的淋巴细胞耗竭。在一些方面，淋巴细胞消除包括施用环磷酰胺和/或氟达拉滨。在一些方面，所述方法还包括施用至少第二种治疗剂。在某些方面，至少第二种治疗剂包括化学治疗、免疫治疗、手术、放射治疗或生物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.长度为35个氨基酸或更少的分离的VGLL1肽，其包含与SEQ ID NO：1具有至少90％序列同一性的氨基酸序列，其中所述肽能够诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.10.07 US 62/405,7791.长度为35个氨基酸或更少的分离的VGLL1肽，其包含与SEQIDNO：1具有至少90％序列同一性的氨基酸序列，其中所述肽能够诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。2.权利要求1所述的肽，其中所述肽包含与SEQIDNO：1具有至少95％序列同一性的氨基酸序列。3.权利要求1所述的肽，其中所述肽包含SEQIDNO：1的氨基酸序列。4.权利要求1或权利要求2所述的肽，其中所述肽与人I类HLA蛋白结合。5.权利要求4所述的肽，其中所述人1类HLA蛋白来自HLA-A1家族、HLA-A29家族、HLA-A30家族、HLA-B18家族或HLA-B44家族。6.权利要求4所述的肽，其中所述人1类HLA蛋白来自HLA-A1家族。7.权利要求4所述的肽，其中所述人I类HLA蛋白是HLA-A*0101、HLA-A*0102、HLA-A*0103、HLA-A*2902、HLA-A*3002、HLA-B*1801或HLA-B*4403。8.权利要求4所述的肽，其中所述人I类HLA蛋白是HLA-A*0101。9.权利要求1至5中任一项所述的肽，其中所述肽的长度为30个氨基酸或更少。10.权利要求1至5中任一项所述的肽，其中所述肽的长度为25个氨基酸或更少。11.权利要求1至5中任一项所述的肽，其中所述肽的长度为20个氨基酸或更少。12.权利要求1至5中任一项所述的肽，其中所述肽的长度为15个氨基酸或更少。13.权利要求1所述的肽，其中所述肽由SEQIDNO：1组成，并且其中所述肽选择性地结合HLA-A*0101。14.药物组合物，其包含权利要求1至13中任一项所述的分离的肽和药物载体。15.权利要求14所述的组合物，其中所述药物组合物配制成用于肠胃外施用、静脉内注射、肌内注射、吸入或皮下注射。16.权利要求14所述的组合物，其中所述肽包含在脂质体、含脂质的纳米粒中，或基于脂质的载体中。17.权利要求14所述的组合物，其中药物制剂配制成用于注射或作为鼻喷雾剂吸入。18.分离的核酸，其编码权利要求1至13中任一项所述的VGLLl肽。19.载体，其包含由权利要求18所述的核酸组成的连续序列。20.在对象中促进免疫应答的方法，其包括向所述对象施用有效量的权利要求1至13中任一项所述的肽，其中所述肽在所述对象中诱导VGLL1特异性T细胞。21.权利要求20所述的方法，其中所述对象被诊断为患有癌症。22.权利要求21所述的方法，其中所述癌症是胰腺癌、卵巢癌、胃癌或乳腺癌。23.权利要求20所述的方法，其中所述对象是人。24.权利要求20所述的方法，其还包括施用至少第二种抗癌治疗。25.权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：格雷戈里·利泽，卡西安·伊，亚诺什·罗西克，
申请(专利权)人：得克萨斯州大学系统董事会，
类型：发明
国别省市：美国,US