一种宝乐果单体、提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于天然药物化学技术领域，涉及从南美水果宝乐果(Borojo)中分离的宝乐果酸1～宝乐果酸13及其制备方法和应用，以宝乐果的成熟果实为原料，去皮和种子，果肉加水混匀磨浆或宝乐果冻干粉加水混匀，过滤，滤液加乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层浓缩至干，乙酸乙酯层再经硅胶、十八烷基硅烷键合硅胶(ODS)、葡聚糖凝胶Sephadex LH‑20和制备高效液相色谱(Pre‑HPLC)等色谱分离技术，从宝乐果中分离得到了13个宝乐果酸类化合物，其中宝乐果酸1～宝乐果酸10为新化合物，3个首次从宝乐果中分离得到的已知化合物。经实验证明，本发明专利技术制备的化合物具有抗氧化、抗炎和降血糖活性。

【技术实现步骤摘要】
一种宝乐果单体、提取物及其制备方法和应用
本专利技术属于天然药物化学领域，具体涉及一种宝乐果中单体化合物、提取物及其制备方法和应用。
技术介绍
宝乐果是茜草科林果属植物BorojoapatinoiCuatrec和BorojoasorbilisCuatrec的成熟果实。分布在亚马逊河流域厄瓜多尔热带雨林，原产于哥伦比亚、厄瓜多尔和巴拿马。宝乐果富含果糖和葡萄糖，水溶性的B族维生素，氨基酸和蛋白质，极具开发利用价值。当地土著居民认为食用宝乐果能够消除疲劳、增强免疫、壮阳、改善呼吸道炎症症状及抗炎。文献报道宝乐果具有抗氧化(国际药学研究杂志,2013:817-821)和降血糖活性，也有文献报道宝乐果中的多糖成分能够增强免疫力，但目前未见文献报道宝乐果中单体化合物的抗炎、抗氧化及降血糖作用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种宝乐果提取物及其单体化合物的制备方法及用途。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：宝乐果提取物及其单体化合物，具体制备步骤如下：(1)宝乐果粉用水混悬后，过滤，滤液通过大孔树脂吸附，可选用AB-8、D101、D102、ZTC-1或1300-I型大孔树脂；(2)用水或10％以下乙醇洗脱除去杂质，再用20％-80％乙醇水洗脱，收集洗脱液，浓缩至干；即得宝乐果提取物(3)将宝乐果提取物经硅胶柱层析(石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，100:0→0:100)，经TLC分析并合并成分相似的流分，得到10个主流分(Fr.1～Fr.10)。Fr.4经中低压ODS柱层析，甲醇-水梯度洗脱(90:10→100:0)，得到7个亚流分(Fr.4a～Fr.4g)。其中Fr.4c、Fr.4d和Fr.4e分别经SephadexLH-20凝胶柱层析、制备型HPLC及重结晶得到化合物宝乐果酸-1、宝乐果酸-2、宝乐果酸-7、宝乐果酸-10。Fr.6经中低压ODS柱层析，甲醇-水梯度洗脱(95:5→100:0)得到6个亚流分(Fr.6a～Fr.6f)。Fr.6c和Fr.6d分别经SephadexLH-20凝胶柱层析及制备型HPLC得到化合物宝乐果酸-8、宝乐果酸-9。Fr.7经中低压ODS柱层析，甲醇-水梯度洗脱(95:5→100:0)得到8个亚流分(Fr.7a～7J)。Fr.7d、Fr.7e和Fr.7f分别经SephadexLH-20凝胶柱本专利技术宝乐果提取物成分分析：上述的宝乐果提取物中的主要成分已进行了结构鉴定，明确其主要成分为11个新化合物和2个已知的环烯醚萜苷，其化学式为：本专利技术还提供宝乐果提取物或单体作为制备抗炎或降血糖药物的用途。本专利技术还提供宝乐果提取物或单体作为制备抗氧化/防衰老或降血糖类功能性食品的用途。本专利技术还提供一种宝乐果的宝乐果酸提取物，其包含以下化合物：该提取物还进一步包括以下化合物：本专利技术还提供一种宝乐果的宝乐果酸提取物，包括以下制备步骤：取新鲜的宝乐果为原料，加水混匀磨浆或取宝乐果冻干粉加水混匀，过滤，滤液加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯层，减压浓缩至干得宝乐果的宝乐果酸提取物。本专利技术的宝乐果是来源于茜草科林果属植物BorojoapatinoiCuatrec和BorojoasorbilisCuatrec的成熟果实。附图说明图1宝乐果酸-1的高分辨质谱图图2宝乐果酸-1的核磁共振氢谱图3宝乐果酸-1的核磁共振碳谱图4宝乐果酸-2的高分辨质谱图图5宝乐果酸-2的核磁共振氢谱图6宝乐果酸-2的核磁共振碳谱图7宝乐果酸-3的高分辨质谱图图8宝乐果酸-3的核磁共振氢谱图9宝乐果酸-3的核磁共振碳谱图10宝乐果酸-4的高分辨质谱图图11宝乐果酸-4的核磁共振氢谱图12宝乐果酸-4的核磁共振碳谱图13宝乐果酸-5的高分辨质谱图图14宝乐果酸-5的核磁共振氢谱图15宝乐果酸-5的核磁共振碳谱图16宝乐果酸-6的高分辨质谱图图17宝乐果酸-6的核磁共振氢谱图18宝乐果酸-6的核磁共振碳谱图19宝乐果酸-7的高分辨质谱图图20宝乐果酸-7的核磁共振氢谱图21宝乐果酸-7的核磁共振碳谱图22宝乐果酸-8的高分辨质谱图图23宝乐果酸-8的核磁共振氢谱图24宝乐果酸-8的核磁共振碳谱图25宝乐果酸-9的高分辨质谱图图26宝乐果酸-9的核磁共振氢谱图27宝乐果酸-9的核磁共振碳谱图28宝乐果酸-10的高分辨质谱图图29宝乐果酸-10的核磁共振氢谱图30宝乐果酸-10的核磁共振碳谱图31宝乐果酸-11的高分辨质谱图图32宝乐果酸-11的核磁共振氢谱图33宝乐果酸-11的核磁共振碳谱图34宝乐果酸-1的单晶X衍射结构图35宝乐果酸-12的单晶X衍射结构具体实施方式下面结合实施例及附图对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。实施例1宝乐果提取物的制备取新鲜的宝乐果50kg，去皮和种子，果肉加水200L搅拌，磨浆混匀，过滤。果渣再加入100L水搅拌，磨浆混匀，过滤。合并两次滤液，加300L的乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯层。水层加300L乙酸乙酯，分取乙酸乙酯层。水层再加300L乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯层。合并3次乙酸乙酯层，减压浓缩至干，得宝乐果提取物650g。实施例2宝乐果提取物的制备取宝乐果粉5kg，加水50L搅拌，混匀，过滤。滤渣再加入50L水搅拌，混匀，过滤。合并两次滤液，加100L的乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯层。水层每次加100L乙酸乙酯再萃取3次，每次分取乙酸乙酯层。合并4次乙酸乙酯层，减压浓缩至干，得宝乐果提取物480g。实施例3化合物制备与结构鉴定宝乐果提取物500g加入甲醇复溶，用80-100目的硅胶拌样后，经200-300目的硅胶柱层析，依次用95:5、90:10、85:115、80:20、75:25、70:30、60:40、50:50、0:100的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，根据TLC检测，合并薄层斑点相类似的流分，得到Fr.1-Fr.9共9个组分。Fr.4经中低压ODS柱层析，甲醇-水梯度洗脱(90:10→100:0)，得到7个亚流分(Fr.4a～Fr.4g)。其中Fr.4c、Fr.4d和Fr.4e分别经SephadexLH-20、Pre-HPLC及重结晶得到化合物宝乐果酸1(171mg)、宝乐果酸2(163mg)、宝乐果酸7(201mg)和宝乐果酸10(167mg)。Fr.6经中低压ODS柱层析，甲醇-水梯度洗脱(95:5→100:0)得到6个亚流分(Fr.6a～Fr.6f)。Fr.6c和Fr.6d分别经SephadexLH-20、Pre-HPLC得到化合物宝乐果酸8(195mg)和宝乐果酸9(218mg)。Fr.7(2.5g)经中低压ODS柱层析，甲醇-水梯度洗脱(95:5→100:0)得到8个亚流分(Fr.7a～7J)。Fr.7d、Fr.7e和Fr.7f分别经SephadexLH-20、Pre-HPLC得到化合物宝乐果酸3(146mg)、宝乐果酸4(160mg)、宝乐果酸5(185mg)、宝乐果酸6(260mg)、宝乐果酸11(136mg)、宝乐果酸12(564mg)和宝乐果酸13(428mg)。宝乐果酸-1((1R,5S)-5-methylcyclopent-2-ene-1,2-dicarboxylicacid)无色细针状晶体，化学结构式为：光谱数据如下：HR-ESI-MSm/z193.0本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.宝乐果中制备的宝乐果酸类化合物，其特征在于，选自下列结构式化合物之一：

【技术特征摘要】
2018.04.02 CN 20181028735131.宝乐果中制备的宝乐果酸类化合物，其特征在于，选自下列结构式化合物之一：2.根据权利要求1所述的宝乐果酸类化合物的制备方法，其特征在于：包括以下制备步骤：取新鲜的宝乐果为原料，加水混匀磨浆或取宝乐果冻干粉加水混匀，过滤，滤液加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯层，减压浓缩至干得宝乐果提取物；浸宝乐果提取物加入甲醇复溶，用硅胶拌样后，经硅胶柱层析，依次用95:5、90:10、85:115、80:20、75:25、70:30、60:40、50:50、0:100的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，得到Fr.1-Fr.9共9个组分；Fr.4经中低压ODS柱层析，甲醇-水梯度洗脱，得到7个亚流分Fr.4a～Fr.4g，其中Fr.4c、Fr.4d和Fr.4e分别经SephadexLH-20、Pre-HPLC及重结晶得到化合物宝乐果酸1、宝乐果酸2、宝乐果酸7和宝乐果酸10；Fr.6经中低压ODS柱层析，甲醇-水梯度洗脱，得到6个亚流分Fr.6a～Fr.6f，Fr.6c和Fr.6d分别经SephadexLH-20、Pre-HPLC得到化合物宝乐果酸8和宝乐果酸9；Fr.7经中低压ODS柱层析，甲醇-水梯度洗脱，得到...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶文才，范春林，王英，梅炬铭，刘俊珊，黄晓君，许琳，赵轩，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：广东,44