一种环草石斛生物碱有效部位及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种环草石斛生物碱有效部位及其制备方法和应用。所述环草石斛生物碱有效部位含有生物碱石斛宁。本发明专利技术提供了一种全新组成的环草石斛生物碱有效部位，该有效部位明确了有效成分，有利于药物的质量控制以及用药安全。动物体内活性研究表明，本发明专利技术所述的环草石斛生物碱有效部位可显著降低db/db糖尿病小鼠的血糖，改善Ⅱ型糖尿病小鼠的高血脂状态，具有开发成治疗Ⅱ型糖尿病的辅助药物或保健品的应用前景。

An Active Component of Dendrobium Cyclinum Alkaloids and Its Preparation Method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种环草石斛生物碱有效部位及其制备方法和应用
本专利技术涉及中药
，更具体地，涉及一种环草石斛生物碱有效部位及其制备方法和应用。
技术介绍
中药治疗糖尿病在我国具有几千年的悠久历史，有较西医毒性较小的优点。石斛在中医临床上常用于治疗热病津伤，口干烦渴，胃阴不足，食少干呕，病后虚热不退，阴虚火旺，骨蒸劳热，目暗不明，筋骨痿软等症。有报道石斛与多味中药共煎煮，对降低II型糖尿病患者的血糖、血脂、减轻胰岛素抵抗有确切的疗效。环草石斛（Dendrobiumloddigesii）也叫小环钗石斛、美花石斛、粉花石斛，主要分布于贵州、广西、云南和广东等省，自2000年起被中国药典收载，是中医临床上广泛应用的石斛药材的代表。有研究显示，石斛生物总碱能降低糖尿病大鼠血糖的作用。另外，中药有效部位是指从中药中提取的一类或几类化学成分的混合体，其含量达到总提取物的50%以上，而且这一类或几类已知化学成分要被认为是有效成分。中药有效部位新药由于既能体现中药多成分、多靶点、多途径发挥药效的特点，又能使药物有效成分更加富集，药理作用和临床疗效增强，以及利于质量控制水平提高等优势，近年来成为中药、天然药新药开发的重要方向之一。严格地说有效部位也是一种提取物，是一种由主要有效成分清楚、有效部位化学类型明确、含量占主导地位和功能上具药效作用的物质集团组成的提取物，“有效性”是其基本特征之一。然而，目前在有效部位“有效性”的筛选和确定方面做的工作不足。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种环草石斛生物碱有效部位及其制备方法和应用。本专利技术的第一个目的是提供一种环草石斛生物碱有效部位。本专利技术的第二个目的是提供一种所述环草石斛生物碱有效部位的制备方法。本专利技术的第三个目的是以上所述环草石斛生物碱有效部位，或所述石斛宁在制备治疗糖尿病和/或高血脂症的辅助治疗药物或保健品中的应用。为了实现上述目的，本专利技术是通过以下技术方案予以实现的：一种环草石斛生物碱有效部位，含有生物碱石斛宁。石斛宁的结构式如下所示：。式中字母g所标注的质子为本专利技术在应用定量核磁共振技术进行含量测定时选用的靶质子。优选地，生物碱石斛宁含量占该有效部位总质量的30%以上。更优选地，生物碱石斛宁含量占该有效部位总质量的30～99%。另外，以上所述环草石斛生物碱有效部位的制备方法，包含如下步骤：S1.将环草石斛用亲水性有机溶剂-水的混合溶液作为提取液，进行提取，浓缩干燥后得到环草石斛提取物；S2.将S1所得的环草石斛提取物，去除脂溶性成份，浓缩干燥后得到粗环草石斛生物碱有效部位。S3.将S2所得粗环草石斛生物碱有效部位溶解、再经除糖，洗脱，收集含石斛宁纯净斑点的馏分，得到石斛宁富集的环草石斛生物碱有效部位。优选地，步骤S1中，所述亲水性有机溶剂为甲醇、乙醇等。优选地，步骤S1中，以体积计，亲水性有机溶剂-水的混合溶液中亲水性有机溶剂占70%～80%。更优选地，步骤S1中，以体积计，亲水性有机溶剂-水的混合溶液中亲水性有机溶剂占80%。优选地，步骤S1中，提取液体积与环草石斛原料的质量比，以mL/g计为8～10：1更优选地，步骤S1中，提取液体积与环草石斛原料的质量比，以mL/g计为8：1优选地，步骤S1中，提取方式为室温冷浸，用超声波辅助提取，提取次数为2～3次。更优选地，步骤S1中，用超声波辅助提取，80min/d，放置48h。更优选地，步骤S1中，提取次数为3次。优选地，步骤S2中，加甲醇/或水溶解，上固相萃取柱去除脂溶性成份，用水洗脱。优选地，步骤S2中，所述固相萃取柱固定相是C-18反相硅胶、非极性大孔吸附树脂，或非极性小孔吸附树脂之一。更优选地，所述固相萃取柱固定相为非极性大孔吸附树脂柱或C-18反相硅胶柱。优选地，步骤S2中，固相萃取柱固定相的床体积与步骤S1所得环草石斛提取物的质量比，以mL/g计为1：0.4。优选地，步骤S2中，洗脱所用的水的用量为5～6倍床体积。更优选地，步骤S2中，洗脱所用的水的用量为6倍床体积。优选地，步骤S2中获得的粗环草石斛生物碱有效部位再加甲醇溶解、再经SephadexLH-20柱除糖，甲醇洗脱，收集含石斛宁纯净斑点的馏分，进行石斛宁纯化。优选的，以上所述环草石斛生物碱有效部位的制备方法，包含如下步骤：S1.将环草石斛用80%甲醇/乙醇水溶液室温冷浸，料液比为8：1，超声波辅助提取，80min/d，放置48h，过滤，将滤液浓缩，得环草石斛提取物；重复提取3次；S2.将S1所得的环草石斛提取物，加适量甲醇/或水溶解、上C-18反相硅胶柱/非极性大孔吸附树脂柱固相萃取，固相萃取柱固定相的床体积与步骤S1所得环草石斛提取物的质量比，以mL/g计为1：0.4，上样完毕，用6倍床体积的水洗脱，除脂溶性部位，收集水洗脱液，浓缩干燥后即得粗环草石斛生物碱有效部位；S3.将S2所得的粗环草石斛生物碱有效部位再加甲醇溶解、再经SephadexLH-20柱除糖，甲醇洗脱，收集含石斛宁纯净斑点的馏分，进行石斛宁纯化。最优选的，以上所述环草石斛生物碱有效部位的制备方法，包含如下步骤：S1.将环草石斛用80%乙醇水溶液室温冷浸，料液比为8：1，超声波辅助提取，80min/d，放置48h，过滤，将滤液浓缩，得环草石斛提取物；重复提取3次；S2.将S1所得的环草石斛提取物，加适量水溶解、上非极性大孔树脂吸附树脂柱固相萃取，固相萃取柱固定相的床体积与步骤S1所得环草石斛提取物的质量比，以mL/g计为1：0.4，上样完毕，用6倍床体积的水洗脱，除脂溶性部位，收集水洗脱液，浓缩干燥后即得粗环草石斛生物碱有效部位；S3.将S2所得的粗环草石斛生物碱有效部位再加甲醇溶解、再经SephadexLH-20柱除糖，甲醇洗脱，收集含石斛宁纯净斑点的馏分，进行石斛宁纯化。另外，由以上方法制备得到的环草石斛生物碱有效部位，也应在本专利技术的保护范围之内。经过实验结果表明，本专利技术上述的环草石斛生物碱有效部位有较强的降血糖、降血脂作用，因此，以上所述环草石斛生物碱有效部位，或所述石斛宁在制备治疗糖尿病和/或高血脂症等疾病的辅助治疗药物或保健品中的应用，也应在本专利技术的保护范围之内。优选地，所述糖尿病为Ⅱ型糖尿病。优选地，所述高血脂症包括Ⅱ型糖尿病并高脂血症。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：（1）本专利技术提供了一种全新组成的环草石斛生物碱有效部位，该有效部位明确了有效成分，有利于药物的质量控制以及用药安全。（2）动物体内活性研究表明，本专利技术所述的环草石斛生物碱有效部位可显著降低dbdb糖尿病小鼠的血糖，改善Ⅱ型糖尿病小鼠的高血脂状态。具有开发成治疗Ⅱ型糖尿病的辅助药物或保健品的应用前景。具体实施方式下面结合说明书和具体实施例对本专利技术作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。实施例1环草石斛生物碱有效部位的制备S1.将1kg环草石斛用80%甲醇水溶液室温冷浸，料液比为8：1，超声波辅助提取，80min/d，放置48h，过滤，将滤液浓缩，得环草石斛提取物；重复提取3次。S2.将S1所得的环草石斛提取物，加适量甲醇本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种环草石斛生物碱有效部位，其特征在于，含有生物碱石斛宁。

【技术特征摘要】
1.一种环草石斛生物碱有效部位，其特征在于，含有生物碱石斛宁。2.根据权利要求1所述的环草石斛生物碱有效部位，其特征在于，生物碱石斛宁含量占该有效部位总质量的30%以上。3.根据权利要求1所述环草石斛生物碱有效部位，其特征在于，由包含如下步骤的方法制备得到：S1.将环草石斛用亲水性有机溶剂-水的混合溶液作为提取液，进行提取，浓缩干燥后得到环草石斛提取物；S2.将S1所得的环草石斛提取物，去除脂溶性成份，浓缩干燥后得到粗环草石斛生物碱有效部位；S3.将S2所得粗环草石斛生物碱有效部位溶解，再经除糖、洗脱、收集含石斛宁纯净斑点的馏分，得到石斛宁富集的环草石斛生物碱有效部位。4.根据权利要求3所述环草石斛生物碱有效部位，其特征在于，步骤S1中，以体积计，亲水性有机溶剂-水混合溶液中亲水性有机溶剂为甲醇/乙醇，含量占70%～80%：提取液体积与环草石斛原料的质量比，以mL/g计为8～10：1。5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：王军，李雪文，刘岚，陈慧萍，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东,44