一种建立无花粉百合高效再生体系的方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种亚洲无花粉百合品种‘小小的吻’高效再生体系的建立方法，该方法包括以下步骤：(1)培养获得无菌苗；(2)选取生长一致、品质良好的无菌苗叶片作为外植体接入到愈伤组织诱导培养基中进行培养获得愈伤组织；(3)选取所获得的愈伤组织转移至分化培养基中进行初代培养得到不定芽；(4)将初代培养中诱导出的不定芽接种至增殖培养基中进行增殖培养获得未生根无菌苗；(5)将未生根无菌苗移入生根培养基中进行生根培养获得‘小小的吻’无菌苗；(6)对‘小小的吻’无菌苗进行驯化和移栽。本发明专利技术建立了无花粉亚洲百合‘小小的吻’高效再生体系，为后续的无花粉百合遗传转化、无花粉百合组培快繁、无花粉百合脱毒研究奠定基础。

【技术实现步骤摘要】
一种建立无花粉百合高效再生体系的方法及应用
本专利技术涉及无花粉百合组培快繁再生体系研究。具体涉及一种建立无花粉百合高效再生体系的方法及应用。本专利技术方法将为无花粉百合遗传转化、无花粉百合生殖发育机制、以及无花粉污染百合‘小小的吻’种苗脱毒和组培快繁奠定重要基础。
技术介绍
百合(Liliumspp.)是百合科(Liliaceae)多年生球根花卉，花朵硕大、花色丰富、花姿优美、芳香怡人。百合具有‘球根花卉之王’的美誉，可以广泛用于鲜切花，盆花，还可以应用于风景园林，具有极高的观赏价值。同时有些百合还可以药用和食用，具有极高的观赏与经济价值。百合种类繁多，分布广泛，在国内外鲜切花市场占有十分重要的地位。然而，现有绝大部分百合品种花粉含量都很大，在开花过程中大量散粉会引起花粉污染，明显缩短了百合的观赏期，降低了其花期的观赏品质及百合的商业价值，同时还容易造成部分人群花粉过敏等不良反应。所以，开展培育无花粉或者散粉少的百合新品种研究具有重要意义。关于亚洲百合‘小小的吻’再生体系的建立还未见报道，因此，有必要专利技术一种建立无花粉百合高效再生体系的研究方法，为无花粉百合遗传转化及无花粉百合本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种亚洲无花粉百合品种‘小小的吻’高效再生体系的建立方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)培养获得无菌苗：培养获得无菌苗的方法为a)或b)；a)选取无花粉百合‘小小的吻’种球鳞片，冲洗干净后进行消毒，然后接种到培养基中进行培养获得无菌苗；b)选取步骤a)中生长一致、品质良好的无菌苗叶片作为外植体接入到诱导培养基中进行培养获得小鳞茎；(2)选取a)中生长一致、品质良好的无菌苗叶片或b)中小鳞茎上的生长一致、品质良好的无菌苗叶片作为外植体接入到愈伤组织诱导培养基中进行培养获得愈伤组织；(3)选取所获得的愈伤组织转移至分化培养基中进行初代培养得到不定芽；(4)将初代培养中诱导出的不定芽接种...

【技术特征摘要】
1.一种亚洲无花粉百合品种‘小小的吻’高效再生体系的建立方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)培养获得无菌苗：培养获得无菌苗的方法为a)或b)；a)选取无花粉百合‘小小的吻’种球鳞片，冲洗干净后进行消毒，然后接种到培养基中进行培养获得无菌苗；b)选取步骤a)中生长一致、品质良好的无菌苗叶片作为外植体接入到诱导培养基中进行培养获得小鳞茎；(2)选取a)中生长一致、品质良好的无菌苗叶片或b)中小鳞茎上的生长一致、品质良好的无菌苗叶片作为外植体接入到愈伤组织诱导培养基中进行培养获得愈伤组织；(3)选取所获得的愈伤组织转移至分化培养基中进行初代培养得到不定芽；(4)将初代培养中诱导出的不定芽接种至增殖培养基中进行增殖培养获得未生根无菌苗；(5)将未生根无菌苗移入生根培养基中进行生根培养获得‘小小的吻’无菌苗；(6)对‘小小的吻’无菌苗进行驯化和移栽。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤a)中所述消毒的方法为采用75％的乙醇消毒30s后，再用1％的次氯酸钠消毒20min。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤a)中所述培养基的配方为：MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA；步骤b)中所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：滕年军，张德花，余佳，吴泽，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32