红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法技术

红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法，属于中药提取技术领域。其包括以下步骤：1)对红花进行超声提取，采用单因素试验选择超声温度、超声时间、液料比和超声功率作为影响提取率的因素；2)根据Box‑Benhnken的中心组合设计原则进行超声温度、超声时间、液料比和超声功率四因素三水平的实验设计；3)采用HPLC测定HSYA和AHSYB的含量，计算出提取率；4)通过熵权法计算出HSYA和AHSYB权重值，并将综合评价值作为评价指标；5)采用响应面软件进行分析，取综合评价值为最大值，得到最优的提取条件。本发明专利技术能够高效快速有效地提取得到红花中的HSYA和AHSYB，提取时间短，提取率高。

Optimization of Extraction Technology of HSYA and AHSYB from Safflower

【技术实现步骤摘要】
红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法
本专利技术属于中药提取
，具体涉及红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法。
技术介绍
红花(CarthamustinctoriusL.)作为一种活血化瘀、疏通经络的中药，常用来治疗痛经、胸痛腹痛、跌打损伤和消除肿胀。临床上还可用于治疗各种心脑血管疾病，如冠心病、脑血栓和心肌缺血。HSYA是红花中最有效的水溶性生物活性成分之一，具有抑制血小板聚集和血栓形成、改善心肌缺血、抗炎和抗氧化等作用，通常用于食品着色添加剂和保健品的制造，也可用于制药工业。AHSYB是除HSYA以外红花中主要的生物活性成分。从它的化学结构来看，具有大量的酚羟基并有较强的抗氧化活性。但目前对于AHSYB的研究很少。传统的中药提取方法有很多种，包括煎煮法、浸渍法、加热回流法、渗漉法、超临界萃取法和超声提取法。其中超声提取法工艺简单方便，提取时间较短，提取率较高。中药有效成分的提取率受诸多因素影响，如提取温度、时间、溶剂浓度、液料比、PH值、超声功率、粒径大小和提取次数等。传统的中药提取方法的优化方法多基于实际实验，这样大大耗费了人力和物力而且未必能实现最优的效果。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术的目的在于设计提供一种红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法的技术方案。所述的红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法，其特征在于包括以下步骤：1)对红花进行超声提取，采用单因素试验选择超声温度、超声时间、液料比和超声功率作为影响提取率的因素；2)根据Box-Benhnken的中心组合设计原则进行超声温度、超声时间、液料比和超声功率四因素三水平的实验设计；3)采用HPLC测定HSYA和AHSYB的含量，计算出提取率；4)通过熵权法计算出HSYA和AHSYB权重值，并将综合评价值作为评价指标；5)采用响应面软件进行分析，取综合评价值为最大值，得到最优的提取条件。所述的红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法，其特征在于所述步骤3)中HPLC选用乙腈-0.1％甲酸水作为流动相，检测波长403nm。所述的红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法，其特征在于所述步骤3)中提取率＝C/C生药*100％，其中C为HSYA和AHSYB浓度，C生药为生药浓度。所述的红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法，其特征在于所述步骤4)中HSYA和AHSYB的权重系数分别为0.478和0.522，综合评价值＝HSYA提取率×0.478+AHSYB提取率×0.522。所述的红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法，其特征在于所述步骤5)中采用响应面软件进行分析得到综合评价指标为：Y＝-6.36227+0.038180A+0.036360B+0.61164C+9.86701*10-3D-8.69385*10-5AB+1.90308*10-4AC+8.67310*10-6AD-3.75000*10-4BC-7.33154*10-5BD-4.75769*10-5CD-2.96936*10-4A2-1.91736*10-4B2-0.019321C2-2.34436*10-5D2，其中A为超声温度，B为超声时间，C为液料比，D为超声功率。所述的红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法，其特征在于包括以下步骤：对红花进行超声提取，其中超声温度为66℃，超声时间为36min，液料比为16：1，超声功率为150W。本专利技术首先通过单因素试验对影响提取率的试验因素进行筛选，再用Box-Benhnken中心组合法对实验进行设计，然后HPLC法测定HSYA和AHSYB的含量，计算出提取率，并根据权重值计算出综合评价值作为评价指标，最后用响应面设计软件确定红花中这两种成分的最佳提取工艺条件。本专利技术能够高效快速有效地提取得到红花中的HSYA和AHSYB，提取时间短，提取率高。附图说明图1为混合对照品溶液(a)和红花供试品溶液(b)的HPLC图，1：HSYA；2:AHSYB；图2超声温度与超声时间对HSYA和AHSYB提取率影响的响应面；图3超声温度与液料比对HSYA和AHSYB提取率影响的响应面；图4超声温度与超声功率对HSYA和AHSYB提取率影响的响应面；图5超声时间与液料比对HSYA和AHSYB提取率影响的响应面；图6超声时间与超声功率对HSYA和AHSYB提取率的响应面；图7液料比与超声功率对HSYA和AHSYB提取率影响的响应面。具体实施方式以下结合实施例来进一步说明本专利技术。实施例：1.仪器与试剂1.1仪器XS250电子天平(梅特勒国际有限公司)、超纯水仪(MettlerToledo公司)、Waters2695型高效液相色谱仪(在线真空脱气机、自动进样系统、柱温箱、2498型紫外检测器、Empower软件，)、抽滤瓶、布氏漏斗、SHB-ⅢA循环水式多用真空泵(河南省太康科教器材厂)、2-16PK离心机(德国Sigma公司)、SK5210HP超声波清洗仪器(上海科导超声仪有限公司)1.2试剂红花购于杭州惠远实业有限公司(产地：新疆，批号：151020)、HSYA对照品购于南京世洲生物科技有限公司(批号SZ201702005QA，含量≥98％)、AHSYB对照品购于上海源叶生物科技有限公司(批号S08M9D60888，含量≥98％)、乙腈、甲醇(色谱纯，Tedia公司)；水为超纯水；其他试剂均为分析纯。2.方法与结果2.1HPLC方法的建立2.1.1色谱条件：色谱柱：Extend-C18；流动相：乙腈(B)、0.1％甲酸水(D)；梯度洗脱(0-12min，10％-22％B；12-20min，22％-26％B；20-30min，26％-95％B；30-40min，95％-10％B)；流速：1ml/min；柱温：25℃；检测波长：403nm；进样量：10μL。2.1.2对照品溶液的制备：分别精密称取羟基红花黄色素A和脱水红花黄色素B对照品适量，分别用纯净水配制成1mg/ml的对照品储备液。2.1.3供试品溶液的制备：称取红花样品5g，置于锥形品中，以液料比为16：1，温度为70℃、功率为200W条件下超声提取30min，提取液用布氏漏斗抽滤，滤液在12000r·min-1离心10min，取上清液过0.22μm微孔滤膜，即为供试品溶液。2.1.4标准曲线的制备：精密吸取HSYA对照品储备液，分别用水稀释至浓度为：0.3mg/ml、0.4mg/ml、0.5mg/ml、0.6mg/ml、0.7mg/ml。按照“2.1.1”色谱条件下进样检测，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标,绘制标准曲线，得到HSYA的标准曲线为：Y＝2×107X-1×106，R2＝0.9996；精密吸取AHSYB对照品储备液，分别用水稀释至浓度为：0.08mg/ml、0.10mg/ml、0.12mg/ml、0.14mg/ml、0.16mg/ml。按照“2.1.1”色谱条件下进样检测，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标,绘制标准曲线，得到AHSYB的标准曲线为：Y＝3×107X-476451，R2＝0.9997。2.1.5专属性试验：分别精密吸取混合对照品溶液和红花供试品适量，按照“2.1.1”项下色谱条件进行测定，HSYA和AHSY本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法，其特征在于包括以下步骤：1)对红花进行超声提取，采用单因素试验选择超声温度、超声时间、液料比和超声功率作为影响提取率的因素；2)根据Box‑Benhnken的中心组合设计原则进行超声温度、超声时间、液料比和超声功率四因素三水平的实验设计；3)采用HPLC测定HSYA和AHSYB的含量，计算出提取率；4)通过熵权法计算出HSYA和AHSYB权重值，并将综合评价值作为评价指标；5)采用响应面软件进行分析，取综合评价值为最大值，得到最优的提取条件。

【技术特征摘要】
1.红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法，其特征在于包括以下步骤：1)对红花进行超声提取，采用单因素试验选择超声温度、超声时间、液料比和超声功率作为影响提取率的因素；2)根据Box-Benhnken的中心组合设计原则进行超声温度、超声时间、液料比和超声功率四因素三水平的实验设计；3)采用HPLC测定HSYA和AHSYB的含量，计算出提取率；4)通过熵权法计算出HSYA和AHSYB权重值，并将综合评价值作为评价指标；5)采用响应面软件进行分析，取综合评价值为最大值，得到最优的提取条件。2.如权利要求1所述的红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法，其特征在于所述步骤3)中HPLC选用乙腈-0.1％甲酸水作为流动相，检测波长403nm。3.如权利要求1所述的红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法，其特征在于所述步骤3)中提取率＝C/C生药*100％，其中C为HSYA和AHSYB浓度，C生药为生药浓度。4.如权利要求1所述的红花中HSYA和AHSYB的提取工艺优化方法，其特征在于所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：万浩宇，张洋洋，虞立，何昱，万海同，
申请(专利权)人：浙江中医药大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33