一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法技术

技术编号:22155573 阅读:24 留言:0更新日期:2019-09-21 06:21
本发明专利技术公开了一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法,包括下述步骤:S1:选取含硒可食性农作物作为供体;S2:选取晚稻作为母体;S3:提取所述含硒可食性农作物的DNA;S4:将含硒可食性农作物的DNA导入晚稻母体;S5:收集步骤S4晚稻母体的远缘杂交种子。采用本方法培育出来了种子,稻米中硒含量高达0.087mg/kg。采用远缘杂交技术,将含硒农作物的特性转移给水稻,提升水稻稻米中硒含量。

A Functional Rice Biotechnology Breeding Method for Increasing Selenium Content in Late Rice

【技术实现步骤摘要】
一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法
本专利技术涉及一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法,属于水稻的育种方法

技术介绍
我国约60%的人口以稻米为主食,因而水稻增产是我国农业可持续发展和确保粮食安全的重大课题。由于工业化、城镇化进程正在吞食着稻田,要满足人口增长对粮食需求的挑战,保证国民经济的稳步发展,根本出路在于提高单位面积的产量潜力。粮食是一种特殊的战略商品,事关国计民生、政治稳定、社会安定。一旦缺粮,吃饭问题解决不了,经济发展和社会稳定就会失去坚实的基础。目前及今后很长一段时间已不可能靠扩大水稻种植面积增加水稻产量,而且由于其他方面对土地的需求,要维持现有的水稻种植面积也非常困难,未来粮食增产总量约80%需要来自单产的提高。由于农业设施不完善,农业投入低,水稻的生长环境还很脆弱;因而水稻生产的现状可描写为脆弱的作物生长在脆弱的环境下满足人们的“温饱”需求。提高单位面积的水稻产量潜力成为了水稻生产中的主要目标。由于水稻杂交技术面世,水稻的产量得到了大幅度的提升,但是稻米中硒的含量并不高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于,提供一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法,采用本方法培育出来了种子,稻米中硒含量高达0.087mg/kg。为解决上述技术问题,本专利技术采用如下的技术方案:一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法,包括下述步骤:S1:选取含硒可食性农作物作为供体;S2:选取晚稻作为母体;S3:提取所述含硒可食性农作物的DNA;S4:将含硒可食性农作物的DNA导入晚稻母体;S5:收集步骤S4晚稻母体的远缘杂交种子。前述的一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法中,所述步骤S1中含硒可食性农作物蔬菜----大蒜。前述的一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法中,所述步骤S2中选取粤审稻2005010黄华占作为晚稻母体。前述的一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法中,所述步骤S3包括下述步骤:S31:称取供体苗的第一至第四个嫩叶0.2g,去除表面的DNA污染,置于研钵中与液氮共研成细粉;S32:将供体细粉转入2ml离心管中,立即加入1000μl预热至65℃的CTAB抽提液,于65℃温育30min,然后常温混匀;S33:放至室温,加入1000μl氯仿/异戊醇抽提匀浆液,使充分混合,于4℃在离心机上以10000r/min转速离心5min;S34:将上清液转移至新的离心管中,加入1/10体积的65℃的CTAB/NaCl溶液,充分混匀;S35:再次加入1000μl的氯仿/异戊醇,充分混合,于4℃在离心机上以10000r/min离心5min,抽提至上清液澄清;S36:将上清液转移至新的离心管中,加入1000μlCTAB沉淀液,混匀,室温放置15min后,于4℃10000r/min离心5min,弃上清;S37:加入200μl的高盐TE缓冲液和2μlRNaseA储备液重悬沉淀,于37℃温育30min;S38:加入2000μl预冷的无水乙醇,混匀,于4℃在离心机上以10000r/min离心15min;S39:将沉淀用70%乙醇清洗两次后,晾干,加入50μlTE溶解沉淀。提取DNA过程中用到的试剂:1、2-巯基乙醇(2-ME)2、CTAB抽提液:2%(W/V)CTAB,100mmol/LTris·Cl,pH8.0;20mmol/LEDTA,pH8.0;1.4mol/LNaCl;3、CTAB/NaCl溶液:10%CTAB,0.7mol/LNaCl;4、24:1(V/V)氯仿/异戊醇5、CTAB沉淀液:1%(W/V)CTAB,50mmol/LTris·Cl,pH8.0;10mmol/LEDTA,pH8.0。6、高盐TE缓冲液:10mmol/LTris·Cl,pH8.0;1mmol/LEDTA,pH8.0;1mol/LNaCl7、70%乙醇8、TE缓冲液:10mmol/LTris·Cl,pH8.0;1mmol/LEDTA,pH8.0。前述的一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法中,所述步骤S4还包括下述步骤:S41:在母体水稻开花后1至3小时,将颖壳剪掉三分之一;S42:去掉颖壳内雄花和已经开过的或未开过的花朵,保留正在开的花朵;S43:将供体DNA导入颖壳内,然后套袋。前述的一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法中,所述步骤S5后还包括步骤S6,将步骤S5中收集的远缘杂交种子选育七代后获得生长稳定的植物新品系种子。与现有技术相比,采用本方法培育出来了种子,稻米中硒含量高达0.087mg/kg。采用远缘杂交技术,将含硒农作物的特性转移给水稻,提升水稻稻米中硒含量。具体实施方式本专利技术的实施例1:一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法,包括下述步骤:S1:选取含硒可食性农作物作为供体;S2:选取晚稻作为母体;S3:提取所述含硒可食性农作物的DNA;S4:将含硒可食性农作物的DNA导入晚稻母体;S5:收集步骤S4晚稻母体的远缘杂交种子;S6:将步骤S5中收集的远缘杂交种子选育七代后获得生长稳定的植物新品系种子。所述步骤S1中含硒可食性农作物是洋葱、大麦、雀麦。所述步骤S2中选取粤审稻2005010作为晚稻母体。提取DNA的方法包括下述步骤:S31:称取供体苗的第一至第四个嫩叶0.2g,去除表面的DNA污染,置于研钵中与液氮共研成细粉;S32:将供体细粉转入2ml离心管中,立即加入1000μl预热至65℃的CTAB抽提液,于65℃温育30min,然后常温混匀;S33:放至室温,加入1000μl氯仿/异戊醇抽提匀浆液,使充分混合,于4℃在离心机上以10000r/min转速离心5min;S34:将上清液转移至新的离心管中,加入1/10体积的65℃的CTAB/NaCl溶液,充分混匀;S35:再次加入1000μl的氯仿/异戊醇,充分混合,于4℃在离心机上以10000r/min离心5min,抽提至上清液澄清;S36:将上清液转移至新的离心管中,加入1000μlCTAB沉淀液,混匀,室温放置15min后,于4℃10000r/min离心5min,弃上清;S37:加入200μl的高盐TE缓冲液和2μlRNaseA储备液重悬沉淀,于37℃温育30min;S38:加入2000μl预冷的无水乙醇,混匀,于4℃在离心机上以10000r/min离心15min;S39:将沉淀用70%乙醇清洗两次后,晾干,加入50μlTE溶解沉淀。DNA的导入方法包括下述步骤:S41:在母体水稻开花后1至3小时,将颖壳剪掉三分之一;S42:去掉颖壳内雄花和已经开过的或未开过的花朵,保留正在开的花朵;S43:将供体DNA导入颖壳内,然后套袋。本育种方法已经试验多年,于2009年在海南种植了第一代,2010年在长沙种植第二代和第三代,2011年在长沙种植第四代,2012年在长沙东郊作晚稻种植第五代稳定,2013年晚稻品比试验,至今面积逐步扩大。经湖南农科院稻米及制品检测中心检测结果,硒含量0.087mg/kg,符合国家富硒稻谷标准(0.04mg/kg-0.3mg/kg)要求。2016年12月国家(北京)食品研究所检测一致。并且水稻的株高100厘米左右,穗长22cm左右,株型松散适中,茎秆粗壮,剑叶直立,主茎叶片1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法,其特征在于,包括下述步骤:S1:选取含硒可食性农作物作为供体;S2:选取晚稻作为母体;S3:提取所述含硒可食性农作物的DNA;S4:将含硒可食性农作物的DNA导入晚稻母体;S5:收集步骤S4晚稻母体的远缘杂交种子。

【技术特征摘要】
1.一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法,其特征在于,包括下述步骤:S1:选取含硒可食性农作物作为供体;S2:选取晚稻作为母体;S3:提取所述含硒可食性农作物的DNA;S4:将含硒可食性农作物的DNA导入晚稻母体;S5:收集步骤S4晚稻母体的远缘杂交种子。2.根据权利要求1所述的一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法,其特征在于,所述步骤S1中含硒可食性蔬菜----大蒜。3.根据权利要求1所述的一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法,其特征在于,所述步骤S2中选取粤审稻2005010黄华占作为晚稻母体。4.根据权利要求1所述的一种提升晚稻硒含量的功能水稻生物技术育种方法,其特征在于,所述步骤S3包括下述步骤:S31:称取供体苗的第一至第四个嫩叶0.2g,去除表面的DNA污染,置于研钵中与液氮共研成细粉;S32:将供体细粉转入2ml离心管中,立即加入1000μl预热至65℃的CTAB抽提液,于65℃温育30min,然后常温混匀;S33:放至室温,加入1000μl氯仿/异戊醇抽提匀浆液,使充分混合,于4℃在离心机上以10000r/min转速离心5min;S34:将上清液转移至新的离心管中,加入1/10体积...

【专利技术属性】
技术研发人员:何登骥其他发明人请求不公开姓名
申请(专利权)人:重庆汇鑫云强实业集团有限公司重庆归胜农业科技研究院有限公司何登骥
类型:发明
国别省市:重庆,50

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