苦瓜中提取的新型降血糖化合物制造技术

本发明专利技术涉及一种从苦瓜中提取分离得到的新型化合物，所述化合物对蛋白质酪氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B)具有十分显著的抑制作用，能够显著降低糖尿病大鼠的血糖值，具有明显的降血糖效果，并且所述作用优于现有技术的已知化合物，因而能够应用于预防和治疗糖尿病。

A New Hypoglycemic Compound Extracted from Momordica charantia

【技术实现步骤摘要】
苦瓜中提取的新型降血糖化合物
本专利技术涉及医药领域，具体而言，本专利技术涉及一种苦瓜中提取的新型降血糖化合物，本专利技术还涉及所述化合物的制备方法和用途。
技术介绍
糖尿病(Diabetes)是多种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征，临床上以高血糖为主要特点。近年来很多研究显示：蛋白酪氨酸磷酸酶1B(ProteinTyrosinePhosphatase-1B，PTP1B)可能在胰岛素抵抗中发挥了重要的作用。它是胰岛素信号转导中一个十分关键的分子。通过去磷酸化信号分子，从而终止胰岛素信号转导。PTP1B缺失小鼠，其表型及寿命都正常，同时胰岛素和瘦素的敏感性明显增加，能够抵抗饮食诱导的肥胖的发生。许多研究也进一步证实PTP1B可以负性调节胰岛素和瘦素的信号转导。PTP1B与胰岛素信号传导：胰岛素信号传导首先需要胰岛素与胰岛素受体结合。胰岛素受体是由α2β2亚单位组成的四聚体，α亚单位与胰岛素结合后β亚单位的酪氨酸及胰岛素受体底物发生磷酸化而被激活。磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3-kianse，PI3K)等下游蛋白也被活化，葡萄糖转运蛋白4由细胞内转至细胞膜，最终葡萄糖进入细胞。在上述过程中的磷酸化反应可以被PTP1B等因子逆转，从而阻止胰岛素信号的传导。因此，PTP1B是胰岛素信号传导的一个重要负性调节物质。如果PTP1B结构或活性改变，将改变其对胰岛素信号传导的抑制作用。外周组织胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能受损是II型糖尿病发病机制的两个基本条件，而胰岛素信号传导被抑制是胰岛素抵抗的重要环节。PTP1B升高表达可引起胰岛素抵抗，从而引发II型糖尿病。资料表明，PTP1B的表达水平在糖尿病或发生胰岛素抵抗时明显升高。有关使转基因鼠表达人PTP1B的研究发现，与对照组相比，实验组鼠肌肉中胰岛素刺激引起的胰岛素受体酪氨酸磷酸化水平降低35％，PI3K活性降低40％～60％，葡萄糖转运所需的蛋白激酶c活性也减弱；表达PTP1B的小鼠全身葡萄糖清除和肌肉的葡萄糖摄取减少了40％～50％。有研究表明体重指数正常的初诊II型糖尿病较正常对照者存在明显的胰岛素抵抗，而PTP1B在前者内脏脂肪组织中的表达较后者显著增高，几乎是后者的4倍。另有研究报道采用PTP1B反义寡核苷酸处理糖尿病模型小鼠，抑制其PTP1B表达，发现在肝、脂肪和骨骼肌内PTP1B的表达下调时，小鼠血糖恢复正常，与糖代谢有关的各个指标也都趋于正常。以上结果说明，PTP1B在拮抗胰岛素信号传导中具有重要作用。苦瓜(MomordicacharantiaL.)为葫芦科苦瓜属植物。长期以来，我国民间将苦瓜广泛应用于清热解毒、明目解毒、健胃消渴、缓泻、驱虫等疾病。苦瓜中化学成分包括三萜皂苷、脑苷、蛋白质等。关于苦瓜降血糖作用的报道非常广泛。此外，也有不少文献报道了从苦瓜提取出具有降血糖活性的化合物，例如，CN101496806A报道了从苦瓜中分离得到的葫芦烷型三萜类化合物，其为葡萄糖摄取促进剂、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)上膜激动剂、一磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)激活剂，能够用于预防和治疗糖尿病和肥胖；CN103351420A报道了从苦瓜中提取的四个新化合物，其对于PTP1B具有显著的抑制作用，能够用于预防和治疗糖尿病。本申请通过对苦瓜进行更为彻底的提取和对提取物进行更为细致的分离，得到了现有技术中未报道过的新型化合物，其对于PTP1B具有十分显著的抑制作用，从而可用于降血糖，即可用于预防和治疗糖尿病。
技术实现思路
一方面，本专利技术提供了一种从苦瓜提取分离得到的新型化合物，所述化合物对于蛋白质酪氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B)具有十分显著的抑制作用，从而可用于降血糖，即可用于预防和治疗糖尿病。另一方面，本专利技术提供了一种所述化合物的制备方法。又一方面，本专利技术提供了包含所述化合物的药物组合物。再一方面，本专利技术提供了所述化合物在制备药物中的应用。为此，本专利技术提供了一种式I所示的化合物：本专利技术化合物对PTP1B具有十分显著的抑制作用，能够显著降低糖尿病大鼠的血糖值，具有明显的降血糖效果，并且所述作用优于现有技术的已知化合物，因而能够用于预防和治疗PTP1B介导的疾病，如糖尿病，特别是II型糖尿病。具体实施方式尽管在本申请中示出和描述了本专利技术优选的实施方案，但是对本领域技术人员而言明显的是，该实施方案仅以实例的方式提供。本领域技术人员将想起大量的变更、变换和置换，这些均在本专利技术范围内。应理解的是，在实践本专利技术中，可以使用本申请所述的本专利技术实施方案的各种备选方案。意在所附权利要求限定了本专利技术范围并且由此覆盖了在这些权利要求范围内的方法和结构及它们的等同形式。除非另外定义，本申请使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属领域技术人员通常所理解相同的含义。将本申请提及的所有专利和出版物通过引用的方式并入本文。化合物本专利技术提供了一种式I所示的化合物：制备方法本专利技术提供了一种式I所示的化合物的制备方法，包括以下步骤：a)提取步骤：取干燥的苦瓜研磨成粉，进行CO2超临界流体萃取，得到苦瓜提取物；b)水解步骤：将苦瓜提取物用酸进行水解，往水解后的反应液中加水，有沉淀析出，收集析出的沉淀，干燥得到苦瓜水解产物；c)分离步骤：将苦瓜水解产物用大孔吸附树脂柱层析分离，得到粗分产物；粗分产物再用高效液相制备色谱分离，得到式I所示的化合物。在本专利技术的一个实施方案中，步骤a中超临界流体萃取条件为：萃取温度30-60℃，压力5-35MPa，CO2流量为1-3L/min，萃取时间为10-300min，夹带剂选自甲醇、乙醇、甲醇水溶液、乙醇水溶液、乙酸乙酯或丙酮，夹带剂用量为单位时间CO2质量和夹带剂质量总和的1-10％。在本专利技术的一个实施方案中，步骤b中的酸选自无机酸，如盐酸或硫酸，或者有机酸，如乙酸、甲磺酸或对甲苯磺酸。在本专利技术的一个实施方案中，步骤c中的大孔吸附树脂是市售的HP-20，如DiaionHP-20；层析的洗脱剂选自H2O、甲醇、乙醇、甲醇水溶液、乙醇水溶液、乙酸乙酯或丙酮。在本专利技术的一个实施方案中，步骤c中的层析包括依次用H2O、50％乙醇、70％乙醇、95％乙醇以及乙酸乙酯进行洗脱，得到五个组分。在本专利技术的一个实施方案中，步骤c中高效液相制备色谱为反相高效液相制备色谱，其填充材料为反相硅胶C18，粒径5-10μm；流动相为100％的HPLC级甲醇或乙腈；定量环为2-10mL，采取满环进样，流速为5-25mL/min；柱温控制在15-25℃。组合物本专利技术另一方面提供一种药物组合物，其包含式I所示的化合物作为药物活性成分。所述药物组合物还任选包含一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。在用于口服、舌下给药、皮下给药、肌肉给药、静脉内给药、透皮给药、局部给药或直肠给药的药物组合物中，单独使用或与其他活性成分一起使用的活性成分可以与传统的药物载体混合，以给药单位剂型的形式给动物或人给药。适当的给药单位剂型包括口服的形式，如片剂、胶囊剂、丸剂、粉末剂、颗粒剂、口香糖剂型和口服溶液或悬浮液、舌下和经颊给药的形式、气溶胶、植入体、局部给药的形式、透皮给药的形式、皮下给药的形式、肌肉给药的形式、静脉内本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种式I所示的化合物：

【技术特征摘要】
1.一种式I所示的化合物：2.根据权利要求1所述的化合物的制备方法，其包括以下步骤：a)提取步骤：取干燥的苦瓜研磨成粉，进行CO2超临界流体萃取，得到苦瓜提取物；b)水解步骤：将苦瓜提取物用酸进行水解，往水解后的反应液中加水，有沉淀析出，收集析出的沉淀，干燥得到苦瓜水解产物；c)分离步骤：将苦瓜水解产物用大孔吸附树脂柱层析分离，得到粗分产物；粗分产物再用高效液相制备色谱分离，得到式I所示的化合物。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤a中超临界流体萃取条件为：萃取温度40-70℃，压力5-35MPa，CO2流量为1-3L/min，萃取时间为10-300min，夹带剂选自甲醇、乙醇、甲醇水溶液、乙醇水溶液、乙酸乙酯或丙酮，夹带剂用量为单位时间CO2质量和夹带剂质量总和的1-10％。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤b中的酸选自无机酸，如盐酸或硫酸，或者有机酸，如乙酸、甲磺酸或对甲苯磺酸。5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤c...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾东升，谢晓亮，李茜云，温春秀，崔施展，王腾，魏曼，刘灵娣，
申请(专利权)人：河北省农林科学院经济作物研究所，
类型：发明
国别省市：河北,13