一种基于dsDNA-SYBR Green I光敏催化的化学发光传感方法技术

一种基于dsDNA‑SYBR Green I光敏催化的化学发光传感方法，主要将dsDNA‑SYBR Green I光敏产生的短寿命、强氧化能力的单线态氧的氧化能力用K4Fe(CN)6进行储存，将其氧化成K3[Fe(CN)6]。通过该简单的储存步骤，可使光敏氧化鲁米诺化学发光的强度提高约30倍，从而显著地提高检测DNA的灵敏度，对BRCA1、BRCA2、p53基因的检出限分别可达3 pM、6pM和5pM。而且，该法操作简便，无需分离、标记等步骤，并可拓展至其它任意序列DNA的检测，具有良好的应用前景。

A Chemiluminescence Sensing Method Based on dsDNA-SYBR Green I Photosensitive Catalysis

【技术实现步骤摘要】
一种基于dsDNA-SYBRGreenI光敏催化的化学发光传感方法
本专利技术涉及一种用光敏催化化学发光对DNA进行定性、定量测定的方法，属于生物传感

技术介绍
核酸是组成生命体最主要的生物大分子之一，也是基因表达的基础，指导和调控着蛋白质的合成以及有机体细胞的相关机能。迄今为止，核酸已被作为一种重要的生物标志物用于生物研究和医学诊断。核酸检测的方法有很多，主要有荧光法（Anal.Chem.,2010,82:1921-1927）、电化学法（Acc.Chem.Res.,2010,43:496-505）、比色法（Chem.Commun.,2015,51:14465-14468）和化学发光法（Anal.Chem.,2013,82:5511-5517）。相比之下，化学发光法具有设备简单、分析快速、线性范围宽和灵敏度高等显著优点而被分析工作者广泛应用。鲁米诺是最广泛使用的化学发光试剂之一，但其化学发光反应较为缓慢，因此在实际操作中需要加入酶类等催化剂，以加速其反应进程。生物酶如辣根过氧化物酶在用于核酸分析时需要标记、分离等步骤，操作复杂。Winner等发现Hemin能够与富含G碱基的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于dsDNA‑SYBR Green I光敏催化的化学发光传感方法，其特征在于包括以下三个步骤：（1）将目标基因和相应的互补链（即识别探针）在室温下孵育一段时间形成双链DNA，继而与SYBR Green I (SG) 孵育形成dsDNA‑SG复合物,（2）在上述的溶液中加入一定量的K4[Fe(CN)6]，在蓝色LED灯照射下，染料SG的光敏作用产生

【技术特征摘要】
1.一种基于dsDNA-SYBRGreenI光敏催化的化学发光传感方法，其特征在于包括以下三个步骤：（1）将目标基因和相应的互补链（即识别探针）在室温下孵育一段时间形成双链DNA，继而与SYBRGreenI(SG)孵育形成dsDNA-SG复合物,（2）在上述的溶液中加入一定量的K4[Fe(CN)6]，在蓝色LED灯照射下，染料SG的光敏作用产生1O2，1O2具有较高的反应活性，可将K4[Fe(CN)6]氧化为K3[Fe(CN)6],（3）取光照后的溶液，加入碱性鲁米诺溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：张信凤，范晓娅，邓莉，李琳，
申请(专利权)人：成都理工大学，
类型：发明
国别省市：四川,51