针对FEL D1的人源抗体及其使用方法技术

本发明专利技术提供了与猫过敏原Fel d1结合的抗体、包含所述抗体的组合物、编码所述抗体的核酸以及所述抗体的使用方法。根据本发明专利技术的某些实施方式，所述抗体是与Fel d1结合的全人源单克隆抗体。本发明专利技术的所述抗体可用于在体内结合Fel d1免疫原，从而阻止Fel d1免疫原与在肥大细胞或嗜碱性粒细胞表面上预先形成的IgE结合。这样做时，所述抗体起到防止从肥大细胞和/或嗜碱性粒细胞释放组胺和其他炎性介质，从而缓解敏感个体对猫过敏原的不良反应。本发明专利技术的所述抗体还可以用于确定患者是否对Fel d1猫过敏原过敏的诊断目的。

Human Antibody Against FEL D1 and Its Application

【技术实现步骤摘要】
针对FELD1的人源抗体及其使用方法本申请为申请号为201380035000.9的中国专利申请的分案申请。专利
本专利技术涉及能够与猫过敏原Feld1特异性地结合的人源抗体和人源抗体的抗原结合片段，包含所述抗体的治疗组合物和这些抗体的使用方法。相关技术的声明Feld1蛋白是分泌型的猫蛋白，其属于仅在哺乳动物中发现的小二硫化物连接的异源二聚体蛋白的分泌球蛋白家族(Klug,J.etal.(2000),Ann.N.Y.Acad.Sci.923:348-354)。它是在人类中导致猫过敏的主要原因(Platts-Mills,T.A.等，(1997),J.AllergyClin.Immunol.100:S2-S24)。约90-95％对猫过敏的患者具有针对Feld1蛋白的IgE应答(vanRee等，(1999),J.AllergyClin.Immunol.104:1223-1230)。经受对Feld1产生过敏应答的患者的症状可以从轻微的关节炎和结膜炎到威胁生命的哮喘反应。Feld1由皮脂腺和鳞状腺和鳞状上皮细胞产生并且通过舔和梳毛转移至毛皮(Bartholome,K.等，(1985),J.AllergyClin.Immunol.76:503-506；Charpin,C.等，(1991),J.AllergyClin.Immunol.88:77-82；Dabrowski,A.J.(1990),等，J.AllergyClin.Immunol.86:462-465)。其还存在于唾液腺、肛门腺和泪腺中(Andersen,M.C.等，(1985),J.AllergyClin.Immunol.76:563-569；vanMilligen,F.J.(1992)，等，Int.Arch.AllergyAppl.Immunol.92(4):375-378)并且似乎其主要储存库为皮肤和毛皮(Mata,P.等，(1992),Ann.Allergy69(4):321-322)。天然的Feld1是约18kDa的异源二聚的糖蛋白。各异源二聚体均包含两条多肽链，其通过三个链间二硫键共价连接并且由两个独立的基因编码(Duffort,OA等，(1991),Mol.Immunol.28:301-309；Morgenstern,JP，等(1991),PNAS88:9690-9694；Griffith,I.J.等，(1992),Gene113:263-268；Kristensen,A.K.等，(1997),Biol.Chem.378:899-908)。链1包含70个氨基酸残基和链2包含约90-92个氨基酸残基。两条链在结构上是相似的，但是仅具有10-15％的序列一致性(Kaiser,L.等，(2003),J.Biol.Chem.278(39):37730-37735)。尽管有时将单独的各条链称为Feld1，但是对于全蛋白过敏原而言需要这两条链。Feld1蛋白对动物具有未知的功能，但是导致敏感人群的IgG或IgE反应(称为过敏或哮喘反应)。尽管其他猫过敏原是已知的，包括Feld2(白蛋白)和Feld3(胱抑素)，但是60％-90％的抗猫IgE是直接针对Feld1产生的(Leitermann,K.等，(1984),JAllergyClin.Immunol.74:147-153；Lowenstein,H.等，(1985),Allergy40:430-441；vanRee,R.等，(1999),J.AllergyClin.Immunol.104:1223-1230；Ichikawa,K.等，(2011),Clin.Exp.Allergy,31:1279-1286)。免疫球蛋白E(IgE)负责I型超敏反应，其表现为过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、花粉热、过敏性哮喘、蜂毒过敏和食物过敏。IgE在血液中循环并且与在嗜碱性和肥大细胞上的对IgE具有高亲和性的FcεR1α受体结合。在大部分的过敏反应中，过敏原通过吸入、摄食或通过皮肤进入机体。然后过敏原与预先已经与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面上的高亲和性受体结合的IgE结合，导致若干IgE分子交联并且触发导致各种过敏症状的组胺和其他炎性介质的释放。过敏症的治疗包括用于抑制免疫活性的类固醇和用于减轻哮喘症状的支气管扩张剂。针对严重的过敏患者还使用脱敏疗法。肽疫苗组合已经过测试，用于特定过敏原例如Feld1的个体脱敏(参见US2010/0239599A1和EP2380591A2)。已建议将抗体用于过敏症的治疗，因为其可能能够阻止过敏原分子进入粘膜组织，或者可以在过敏原有机会与结合于肥大细胞或嗜碱性粒细胞表面上的高亲和性受体的IgE结合之前先与过敏原结合，从而阻止组胺和其他炎性介质从这些细胞中释放。美国专利号5,670,626描述了单克隆抗体通过阻止过敏原与粘膜组织结合，用于治疗IgE介导的过敏性疾病如过敏性鼻炎、过敏性哮喘和过敏性结膜炎的用途。美国专利号6,849,259描述了使用过敏原特异性地抗体在过敏症的体内小鼠模型中抑制过敏性炎症。已对基于牛奶和基于蛋类的抗体系统进行了描述。例如，US20030003133A1公开了使用牛奶作为过敏原的载体诱导对猫鳞屑和其他过敏原的口服耐受。在US2010/0143266中描述了组合物和方法，通过使用抑制过敏原与肥大细胞结合能力的分子来降低在动物中对环境中的过敏原的过敏反应。deGroot等(deGroot等，(1988),J.AllergyClin.Immunol.82:778-786)描述了针对Feld1的其他抗体。专利技术简述本专利技术提供了一种与猫过敏原Feld1特异性地结合的全人源单克隆抗体(mAb)及其抗原结合片段。在致敏的患者暴露于猫过敏原后，此类抗体可以用于在体内结合Feld1过敏原，并且这样可以发挥促进Feld1的清除或阻止所述过敏原与肥大细胞或嗜碱性粒细胞表面上预先结合的IgE结合的作用。通过这样的作用，本专利技术的抗体可以阻止组胺或其他炎性介质从肥大细胞或嗜碱性粒细胞释放，从而阻止或减轻在对所述猫过敏原敏感的患者中观察到的不利作用。在某些实施方式中，所述抗体可能能够在对所述Feld1猫过敏原敏感的患者中减轻、最小化或阻止至少一种症状，如喷嚏、充血、鼻塞、咳嗽、气喘、支气管痉挛、鼻炎或结膜炎。在某些实施方式中，所述抗体可能能够在敏感个体中阻止甚至更加严重的与暴露于所述猫过敏原相关的体内并发症，如哮喘反应、过敏反应或者甚至死亡。本专利技术的抗体可以是全长的(例如IgG1或IgG4抗体)或者可以仅包括抗原结合部分(例如Fab、F(ab’)2或scFv片段)，并且可以被修饰以影响其功能性，例如消除残留的效应器功能(Reddy等，(2000),J.Immunol.164:1925-1933)。本专利技术的第一个方面提供了一种与Feld1特异性地结合的分离的人源单克隆抗体或其抗原结合片段。在一个实施方式中，所述抗体或其抗原结合片段是不同于IgA同种型的同种型。在一个实施方式中，所述分离的人源抗体或其抗原结合片段具有选自下组的同种型：IgG1、IgG2和IgG4。在一个实施方式中，所述分离的人源抗体或其抗原结合片段以等于或小于10-6M的KD与Feld1特异性地结合。在一个实施方式中，所述分离的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的人源单克隆抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段与Fel d1特异性地结合，其中所述抗体包含三个重链CDR(HCDR1、HCDR2和HCDR3)和三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，其中所述三个重链CDR和三个轻链CDR包含在重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)的氨基酸序列对SEQ ID NO：306/314中，并且其中所述抗体或其抗原结合片段是不同于IgA同种型的同种型。

【技术特征摘要】
2012.05.03 US 61/642,083;2012.10.24 US 61/718,044;1.一种分离的人源单克隆抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段与Feld1特异性地结合，其中所述抗体包含三个重链CDR(HCDR1、HCDR2和HCDR3)和三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，其中所述三个重链CDR和三个轻链CDR包含在重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)的氨基酸序列对SEQIDNO：306/314中，并且其中所述抗体或其抗原结合片段是不同于IgA同种型的同种型。2.根据权利要求1所述的分离的人源单克隆抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段具有选自下组的同种型：IgG1、IgG2和IgG4。3.根据要求1或2所述的分离的人源单克隆抗体或其抗原结合片段，其中通过表面等离子体共振测得所述人源抗体或其抗原结合片段与Feld1特异性结合的KD等于或小于10-6M。4.根据权利要求1-3中任意一项所述的分离的人源单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含SEQIDNO：306所示的HCVR氨基酸序列。5.根据权利要求1-4中任意一项所述的分离的人源单克隆抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQIDNO：314所示的LCVR氨基酸序列。6.根据权利要求1-5中任意一项所述的分离的人源单克隆抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQIDNO：306/314所示的HCVR/LCVR氨基酸序列对。7.根据权利要求6所述的分离的人源单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其片段与SEQIDNO:396的范围从约位置15至约位置24的氨基酸残基相互作用。8.根据权利要求1所述的分离的人源单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其片段与SEQIDNO:412相互作用。9.一种药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的根据权利要求1-8中任意一项所述的一种或多种特异性地与Feld1结合的分离的人源单克隆抗体或其抗原结合片段，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。10.一种药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的根据权利要求1-8中任意一项所述的特异性地与Feld1结合的第一分离的人源单克隆抗体或其抗原结合片段，和特异性地与Feld1结合的第二分离的人源单克隆抗体或其抗原结合片段，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。11.根据权利要求10所述的药物组合物，其中：(a)所述特异性地与Feld1结合的分离的第一人源单克隆抗体或其抗原结合片段包含具有如SEQIDNO:306所示的氨基酸序列的HCVR和具有如SEQIDNO:314所示的氨基酸序列的LCVR；并且(b)所述特异性地与Feld1结合的分离的第二人源单克隆抗体或其抗原结合片段包含HCVR，所述HCVR具有选自下组的氨基酸序列：SEQIDNO：18、130、162、322和370；和LCVR，所述LCVR具有选自下组的氨基酸序列：SEQIDNO：26、138、170、330和378。12.根据权利要求10所述的药物组合物，其中：(a)所述特异性地与Feld1结合的分离的第一人源单克隆抗体或其抗原结合片段包含SEQIDNO:306/314所示的HCVR/LCVR氨基酸序列对；并且(b)所述特异性地与Feld1结合的分离的第二人源单克隆抗体或其抗原结合片段包含选自下组的HCVR/LCVR氨基酸序列对：SEQIDNO：130/138、162/170、322/330和370/378。13.根据权利要求10所述的药物组合物，其中：(a)所述特异性地与Feld1结合的分离的第一人源单克隆抗体或其抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对：SEQIDNO：306/314；并且(b)所述特异性地与Feld1结合的分离的第二人源单克隆抗体或其抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对：130/138。14.根据权利要求10所述的药物组合物，其中：(a)所述特异性地与Feld1结合的分离的第一人源单克隆抗体或其抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对：SEQIDNO：306/314；和(b)所述特异性地与Feld1结合的分离的第二人源单克隆抗体或其抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对：SEQIDNO：322/330。15.根据权利要求10所述的药物组合物，其中：(a)所述特异性地与Feld1结合的分离的第一人源单克隆抗体或其抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对：SEQIDNO：306/314；和(b)所述特异性地与Feld1结合的分离的第二人源单克隆抗体或其抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对：SEQIDNO：162/170。16.根据权利要求10所述的药物组合物，其中：(a)所述特异性地与Feld1结合的分离的第一人源单克隆抗体或其抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对：SEQIDNO：306/314；和(b)所述特异性地与Feld1结合的分离的第二人源单克隆抗体或其抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对：SEQIDNO：370/378。17.一种核酸分子，所述核酸分子编码与Feld1特异性地结合的根据权利要求1-8中任意一项所述的人源单克隆抗体或其片段。18.一种表达载体，所述表达载体包含根据权利要求17所述的编码与Feld1特异性地结合的人源单克隆抗体或其片段的核酸分子。19.一种宿主细胞，所述宿主细胞含有根据权利要求18所述的表达载体。20.权利要求9-16中任意一项所述的药物组合物用于治疗对Feld1蛋白敏感或产...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·欧兰果，A·J·莫菲，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：美国,US