醋酸巴多昔芬在抗结核分枝杆菌药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及醋酸巴多昔芬在抗结核分枝杆菌药物中的应用。醋酸巴多昔芬是第三代选择性雌激素受体调节剂；而本发明专利技术研究发现其具有抗结核的作用，具有很好的开发价值；本发明专利技术涉及的醋酸巴多昔芬在抗结核分枝杆菌药物中的应用以及醋酸巴多昔芬具有明显的抗结核分枝杆菌的作用属于首次公开。

Application of Badoxifen Acetate in Antituberculosis Drugs

【技术实现步骤摘要】
醋酸巴多昔芬在抗结核分枝杆菌药物中的应用
本专利技术涉及生物工程
，特别涉及醋酸巴多昔芬在抗结核分枝杆菌药物中的应用。
技术介绍
由于缺乏有效预防性疫苗，缺乏有效诊断技术，克服临床耐药是当前结核病防控的重大课题和研究热点，然而新型有效的抗结核药物研发缓慢，并且这些药物都是直接作用于结核菌本身，始终存在着交叉耐药的风险。醋酸巴多昔芬是第三代选择性雌激素受体调节剂(SERM)，它在欧盟和日本获得批准，并且处于美国食品和药物管理局(FDA)审查的后期阶段。醋酸巴多昔芬的作用机制具有独特之处，作为一种新型的选择性雌激素受体调节剂(SERM)，对雌激素受体具有选择性的调节作用，它可以竞争性地抑制17α-雌二醇与ERα和ERβ的结合，对骨骼有雌激素激动剂活性，能改善脊椎和髋部的骨密度，故能显著降低骨质疏松症绝经妇女的椎骨骨折风险。单独使用对人乳癌细胞系无激动剂活性，其首要适应证为治疗和预防绝经期后的骨质疏松症，巴多昔芬在人体骨骼具有和雌激素相同的作用，即可延缓骨老化，降低骨折发生。巴多昔芬减少骨吸收并将骨转换的生化指标降低至绝经前范围，这些对骨重建的影响导致骨矿物质密度(BMD)的增加，这反过来有助于降低骨折风险。巴多昔芬主要作为子宫和乳腺组织中的雌激素受体拮抗剂起作用。无论妇女是否已伴有椎体骨折，巴多昔芬均可降低绝经后女性椎体骨折风险。此外，巴多昔芬对有髋部骨折风险的患者也具有预防作用。巴多昔芬与结合雌激素(CEE)联合使用已被证明可以缓解血管舒缩症状，降低骨转换率及防止骨质疏松症。醋酸巴多昔芬化学名为1-【4-(2-氮杂环庚烷-1-基-乙氧基-苄基)-2-(4-羟基-苯基)-3-甲基-1H-吲哚-5-酚乙酸，分子式为C32H38N2O6，分子量为530.65，其结构式如下：本研究发现此药具有抗结核的作用，具有很好的开发价值。
技术实现思路
本专利技术的目的是研发高效的抗结核新药，发现了醋酸巴多昔芬的抗结核作用以及在抗结核分枝杆菌药物中的应用，安全性高，具有很好的开发价值。本专利技术的技术方案主要为醋酸巴多昔芬在抗结核分枝杆菌药物中的应用。进一步地，结核分枝杆菌具体为结核分枝杆菌H37Rv。本专利技术还提供了醋酸巴多昔芬在制备抗结核药物中的应用。在本专利技术的一个实施例方案中，提供了一种有效成分为醋酸巴多昔芬的抗结核药物。这种抗结核药物能够应用于治疗结核病。本专利技术的优点在于：(1)本专利技术首次发现了醋酸巴多昔芬具有明显的抗结核分枝杆菌的作用，作为潜在的靶向HDT的药物，已经被FDA批准，安全性高，具有很好的开发价值；(2)本专利技术首次提出了醋酸巴多昔芬在制备抗结核药物中的应用；(3)本专利技术发现了醋酸巴多昔芬在细胞中可以显著增强细胞杀伤结核菌。附图说明图1为本专利技术实施例1中不同浓度醋酸巴多昔芬对细胞的存活率的影响；图2为本专利技术实施例2中醋酸巴多昔芬对细胞中结核分枝杆菌存活率的影响。具体实施方式下面结合附图和具体实施方式对本专利技术做进一步说明，以下实施例旨在说明本专利技术而不是对本专利技术的进一步限定。本专利技术测定醋酸巴多昔芬在细胞内抗结核分枝杆菌的活性，结果显示醋酸巴多昔芬具有抗结核分枝杆菌的作用。以下实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所有原料均为通用材料。实施例11.U937巨噬细胞(编号BNCC100967)的分化：将悬浮的U937巨噬细胞培养于含有10％FBS的RPMI-1640培养基中，并于放置于温度为37℃，含有5％CO2的细胞培养箱中培养,加入终浓度为20ng/ml的PMA，培养过夜，将其分化成巨噬细胞，用PBS清洗两遍，利用胰酶消化、重悬后，加入96孔细胞培养板中，使每孔的细胞数为1x104个；2.细胞存活率的测定：将上述U937巨噬细胞培养24h后，加入不同浓度的药物，使药物终浓度为100uM、10uM、1uM，每个浓度分别重复3次实验，利用DMSO作为平行对照实验，对照组中加入与药物体积相同的DMSO，分别重复3次实验，在48h后每孔加入10ulWST-1溶液，在温度为37℃的条件下继续培养4h，利用酶标仪测定OD450nm吸光值；细胞存活率按照以下公式计算：细胞存活率％＝[A/A0]×100；其中，A0为DMSO对照的吸光值，A为不同浓度药物处理的吸光值。图1表示不同浓度醋酸巴多昔芬对细胞的存活率的影响；其中，“**”代表具有显著性差异，“ns”代表没有统计学差异。实验结果显示，醋酸巴多昔芬浓度为100uM、10uM、1uM，对应的细胞存活率分别为：52％、100％、100％；当药物浓度为10uM时，细胞存活率与对照组相比没有统计学差异。实施例2：1.U937巨噬细胞的分化：将悬浮的U937巨噬细胞培养于含有10％FBS的RPMI-1640培养基中，并于放置于温度为37℃，含有5％CO2的细胞培养箱中培养，加入终浓度为20ng/ml的PMA，培养过夜，将其分化成巨噬细胞，用PBS洗两遍，利用胰酶消化、重悬后，加入96孔细胞培养板中，使每孔的细胞数为1x104个；2.细胞内杀菌活性测定：将上述U937巨噬细胞培养24h后，加入醋酸巴多昔芬使其终浓度为10uM，每个浓度分别重复3次实验，利用DMSO作为平行对照实验，对照组中加入与药物体积相同的DMSO，分别重复3次实验，在4h后吸去培养基，用PBS洗两遍，加入新鲜培养基72h后加入裂解液，梯度稀释后涂布于7H10平板上，3周后计算菌落；结果如附图2所示，利用10uM醋酸巴多昔芬处理细胞，其对细胞中结核菌的存活率相对于对照组只有15.1％，而且在这个浓度下没有明显的细胞毒性，可用于开发高效、低毒的抗结核药物。最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本专利技术而并非限制本专利技术所描述的技术方案；本领域的普通技术人员应当理解，仍然可以对本专利技术进行修改或等同替换；而一切不脱离本专利技术的精神和范围的技术方案及其改进，其均应涵盖在本专利技术的权利要求限定的范围中。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.醋酸巴多昔芬在抗结核分枝杆菌药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.醋酸巴多昔芬在抗结核分枝杆菌药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗结核分枝杆菌药物为体内抗结核分支杆菌的药物。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述结核分枝杆菌为结核分枝杆菌H37Rv。4.醋酸巴...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡毅，陈心春，欧阳琪，
申请(专利权)人：深圳大学，
类型：发明
国别省市：广东,44