一种生物防治非洲菊根腐病的方法技术

一种生物防治非洲菊根腐病的方法，包括以下步骤：1)生物菌剂的制备：包括枯草芽孢杆菌菌液的制备；所述生物菌剂为所述枯草芽孢杆菌菌液；2)生物菌剂泥浆的制备：在所述生物菌剂中加细壤黄心土调成稀泥浆，其中生物菌剂和黄心土的配比为4:1；3)非洲菊种苗泥浆蘸根及定植；4)隐地疫霉发酵液的制备；5)隐地疫霉灌根及发病情况观察。本发明专利技术利用生物菌剂泥浆蘸根法，既可保护和促进根系生长，促使非洲菊种苗安全快速地度过缓苗期；又能够增强根系对不良环境及有害菌的抵抗能力，提前预防病害的发生，从而高效无污染地防治非洲菊根腐病，具有较高的应用价值和经济价值，可有效保护非洲菊免受根腐病原菌的侵害。

A Biological Control Method of Gerbera Root Rot

【技术实现步骤摘要】
一种生物防治非洲菊根腐病的方法
本专利技术涉及植物病害防治
，尤其是指一种生物防治非洲菊根腐病的方法。
技术介绍
非洲菊(GerberajamesoniiBolus)，又名扶郎花、太阳花等，是菊科大丁草属多年生宿根草本花卉。原产于南非德瓦士兰地区，后被引入英国，之后广泛栽培于世界各地。非洲菊因花色繁多，花枝挺拔，花期长且不易衰败，深受花卉种植者和消费者喜爱，具有极高的经济价值，是世界五大鲜切花之一，以其独特的魅力风靡全球。近年来，随着种植面积的不断扩大及周年生产导致土传病害、植物自毒的累积、使非洲菊病害尤其是根腐病日益严重，尤其是春夏季高温高湿之际、更加快有害病原菌的增殖和传播，是病害高发期，一般发病率为20%-30%，严重时甚至高达80%，已成为制约我国非洲菊产业可持续发展的重要因素。目前针对非洲菊根腐病，主要以物理清除和化学药剂喷施为主，且一旦发病将很难挽救；而使用化学农药所带来的农药残留、环境污染等问题也日趋严重，并且化学防治易使病原菌产生抗药性，给防治工作带来困难。随着“绿色农业，绿色食品”的提出及践行，生物防治在国内外引起了广泛的重视，而且这种防治方法已在棉花、番茄、辣椒、小麦、茄子、玉米、水稻、甜瓜、马铃薯、黄瓜等作物病害上得以成功应用，并取得了良好的效果。生物菌剂泥浆蘸根法一方面可保护和促进根系生长，促使种苗安全快速地度过缓苗期；另一方面能够增强根系对不良环境及有害菌的抵抗能力，提前预防病害的发生。现有的生物防治非洲菊根腐病的方法中，并未采用生物菌剂泥浆蘸根法，导致非洲菊的根系生长存在隐患。
技术实现思路
本专利技术提供一种生物防治非洲菊根腐病的方法，其主要目的在于克服现有的生物防治非洲菊根腐病技术中非洲菊根系对不良环境及有害菌的抵抗能力较差的缺陷。为解决上述技术问题，本专利技术采用如下技术方案：一种生物防治非洲菊根腐病的方法，包括以下步骤：1)生物菌剂的制备：包括枯草芽孢杆菌菌液的制备；所述生物菌剂为所述枯草芽孢杆菌菌液；2)生物菌剂泥浆的制备：在所述生物菌剂中加细壤黄心土调成稀泥浆，其中生物菌剂和黄心土的配比为4:1；3)非洲菊种苗泥浆蘸根及定植；4)隐地疫霉发酵液的制备；5)隐地疫霉灌根及发病情况观察。进一步的，具体包括以下步骤：1)生物菌剂的制备：包括枯草芽孢杆菌菌液的制备；所述生物菌剂为所述枯草芽孢杆菌菌液；所述枯草芽孢杆菌菌液的制备具体为：活化枯草芽孢杆菌菌株，然后从该菌株的菌落边缘挑取直径为5mm的菌块接种于LB固体培养基上，并置于30℃培养箱内暗培养5天；之后，挑取所述LB固体培养基上的菌落边缘直径为5mm的菌块2块，置于LB液体培养基内，在30℃、200r/min的摇床内培养2d；取所述LB液体培养基中的发酵液在5000r/min的条件下离心10min后，倒掉上清液，加水稀释菌体获得浓度为5×106cfu/mL的枯草芽孢杆菌菌液；2)生物菌剂泥浆的制备：在所述生物菌剂中加细壤黄心土调成稀泥浆，其中生物菌剂和黄心土的配比为4:1；3)非洲菊种苗泥浆蘸根及定植：将生长良好的非洲菊穴盘苗拔出穴盘，并把其根系全部放进所述生物菌剂泥浆中1～2min，待泥浆蘸均后取出，之后再将该穴盘苗定植至装有腐殖质的花盆中，以蘸清水泥浆的为对照，置于25±2℃的温室内培养，光照强度为1500±200lx，光照时间为12h/d；4)隐地疫霉发酵液的制备：活化隐地疫霉菌株，然后从该隐地疫霉菌株的菌落边缘挑取气生菌丝接种于PDA固体培养基上，于28℃培养箱内暗培养5天；之后，挑取所述PDA固体培养基上的菌落边缘直径为5mm的菌块2块于PDA液体培养基内，在28℃、200r/min的摇床内培养2天，取该PDA液体培养基中的发酵液在10000r/min的条件下离心10min后，倒掉上清液，加水稀释菌体获得浓度为3×106cfu/mL的隐地疫霉发酵液；5)隐地疫霉灌根及发病情况观察：将所述隐地疫霉发酵液对步骤3中定植1个月后获得的非洲菊种苗进行灌根处理，从处理后第2天开始观察统计发病率情况。进一步的，步骤1中，所述生物菌剂的制备还包括哈茨木霉菌菌液的制备；所述生物菌剂为把枯草芽孢杆菌菌液与哈茨木霉菌菌液按1:1的比例混合均匀得到的枯草芽孢杆菌+哈茨木霉菌复合菌剂；所述哈茨木霉菌菌液的制备具体为：活化哈茨木霉菌菌株，然后从哈茨木霉菌菌株的菌落边缘挑取直径为5mm的菌块接种于PDA固体培养基上，于30℃培养箱内暗培养5天；之后，挑取所述PDA固体培养基上的菌落边缘直径为5mm的菌块2块，置于PDA液体培养基内，在30℃、200r/min的摇床内培养2d，取该PDA液体培养基的发酵液在5000r/min离心10min后，倒掉上清液，加水稀释菌体获得浓度为5×106cfu/mL哈茨木霉菌菌液。进一步的，步骤1中，所述生物菌剂的制备还包括印度梨形孢菌发酵液的制备；所述生物菌剂为把枯草芽孢杆菌菌液、哈茨木霉菌菌液、印度梨形孢菌发酵液按1：1：1的比例混合均匀得到的枯草芽孢杆菌+哈茨木霉菌+印度梨形孢菌复合菌剂；所述印度梨形孢菌发酵液的制备具体为：活化印度梨形孢菌菌株，然后从该印度梨形孢菌菌株的菌落边缘挑取直径为5mm的菌块接种于KF固体培养基上，于28℃培养箱内暗培养7天；之后，挑取KF固体培养基上的菌落边缘直径为5mm的菌块2块，置于KF液体培养基内，在28℃、200r/min的摇床内培养4d，经单层纱布过滤后收集滤液，加水稀释获得孢子浓度为5×106cfu/mL的印度梨形孢菌发酵液。进一步的，步骤1中，所述生物菌剂的制备还包括印度梨形孢菌发酵液的制备；所述生物菌剂为把枯草芽孢杆菌菌液、印度梨形孢菌发酵液按1：1的比例混合均匀得到的枯草芽孢杆菌+印度梨形孢菌复合菌剂；所述印度梨形孢菌发酵液的制备具体为：活化印度梨形孢菌菌株，然后从该印度梨形孢菌菌株的菌落边缘挑取直径为5mm的菌块接种于KF固体培养基上，于28℃培养箱内暗培养7天；之后，挑取KF固体培养基上的菌落边缘直径为5mm的菌块2块，置于KF液体培养基内，在28℃、200r/min的摇床内培养4d，经单层纱布过滤后收集滤液，加水稀释获得孢子浓度为5×106cfu/mL的印度梨形孢菌发酵液。进一步的，所述黄心土经孔径4mm园艺筛过筛。和现有技术相比，本专利技术产生的有益效果在于:1、本专利技术中所采用的枯草芽孢杆菌具有在自然界中存在广泛、生长快、在土壤中易于存活、营养简单以及其生物制剂具有对人畜安全、无污染、不易产生抗药性、高效性、广谱性、促进植物生长等优点，对其宿主植物不仅促进其生长，还增强植物抑菌防病和抗逆能力；此外，利用生物菌剂泥浆蘸根法，既可保护和促进根系生长，促使非洲菊种苗安全快速地度过缓苗期；又能够增强根系对不良环境及有害菌的抵抗能力，提前预防病害的发生，从而高效无污染地防治非洲菊根腐病，具有较高的应用价值和经济价值，有效解决生产上非洲菊根腐病带来的难题。2、本专利技术中所采用的哈茨木霉菌可产生多种对植物病原真菌、细菌及昆虫具有拮抗作用的生物活性物质，比如细胞壁降解酶类和次级代谢产物，并能提高农作物的抗逆性，改良土壤，促进植物生长和提高农产品产量。3、本专利技术中所采用的印度梨形孢菌宿主范围广、对其宿主植物具有广泛的促进生长和增强植物对生物和非生物胁迫抗性的作用，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生物防治非洲菊根腐病的方法，其特征在于，包括以下步骤：1) 生物菌剂的制备：包括枯草芽孢杆菌菌液的制备；所述生物菌剂为所述枯草芽孢杆菌菌液；2) 生物菌剂泥浆的制备：在所述生物菌剂中加细壤黄心土调成稀泥浆，其中生物菌剂和黄心土的配比为4:1；3) 非洲菊种苗泥浆蘸根及定植；4) 隐地疫霉发酵液的制备；5) 隐地疫霉灌根及发病情况观察。

【技术特征摘要】
1.一种生物防治非洲菊根腐病的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)生物菌剂的制备：包括枯草芽孢杆菌菌液的制备；所述生物菌剂为所述枯草芽孢杆菌菌液；2)生物菌剂泥浆的制备：在所述生物菌剂中加细壤黄心土调成稀泥浆，其中生物菌剂和黄心土的配比为4:1；3)非洲菊种苗泥浆蘸根及定植；4)隐地疫霉发酵液的制备；5)隐地疫霉灌根及发病情况观察。2.如权利要求1所述一种生物防治非洲菊根腐病的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：1)生物菌剂的制备：包括枯草芽孢杆菌菌液的制备；所述生物菌剂为所述枯草芽孢杆菌菌液；所述枯草芽孢杆菌菌液的制备具体为：活化枯草芽孢杆菌菌株，然后从该菌株的菌落边缘挑取直径为5mm的菌块接种于LB固体培养基上，并置于30℃培养箱内暗培养5天；之后，挑取所述LB固体培养基上的菌落边缘直径为5mm的菌块2块，置于LB液体培养基内，在30℃、200r/min的摇床内培养2d；取所述LB液体培养基中的发酵液在5000r/min的条件下离心10min后，倒掉上清液，加水稀释菌体获得浓度为5×106cfu/mL的枯草芽孢杆菌菌液；2)生物菌剂泥浆的制备：在所述生物菌剂中加细壤黄心土调成稀泥浆，其中生物菌剂和黄心土的配比为4:1；3)非洲菊种苗泥浆蘸根及定植：将生长良好的非洲菊穴盘苗拔出穴盘，并把其根系全部放进所述生物菌剂泥浆中1～2min，待泥浆蘸均后取出，之后再将该穴盘苗定植至装有腐殖质的花盆中，以蘸清水泥浆的为对照，置于25±2℃的温室内培养，光照强度为1500±200lx，光照时间为12h/d；4)隐地疫霉发酵液的制备：活化隐地疫霉菌株，然后从该隐地疫霉菌株的菌落边缘挑取气生菌丝接种于PDA固体培养基上，于28℃培养箱内暗培养5天；之后，挑取所述PDA固体培养基上的菌落边缘直径为5mm的菌块2块于PDA液体培养基内，在28℃、200r/min的摇床内培养2天，取该PDA液体培养基中的发酵液在10000r/min的条件下离心10min后，倒掉上清液，加水稀释菌体获得浓度为3×106cfu/mL的隐地疫霉发酵液；5)隐地疫霉灌根及发病情况观察：将所述隐地疫霉发酵液对步骤3中定植1个月后获得的非洲菊种苗进行灌根处理，从处理后第2天开始观察统计发病率情况。3.如权利要求1或2所述一种生物防治非洲菊根腐病的方法，其特征在于：步骤1中，所述生...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚凤琴，林发壮，陈昌铭，钟琳珊，江斌，夏朝水，周辉明，林辉锋，陈玮婷，曹奕鸯，莫智龙，
申请(专利权)人：三明市农业科学研究院，三明市卉之源生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：福建,35