基于18F-FDG检测红细胞吞噬及体内分布的方法技术

本发明专利技术提供了基于18F‑FDG的检测红细胞吞噬的方法，为检测红细胞吞噬率提供了一种新方法，18F‑FDG被吸收入红细胞内，不改变红细胞表面分子状态，更能反应真实情况下红细胞的吞噬状况。本发明专利技术还提供了基于18F‑FDG的检测红细胞体内分布的方法，可同时体外体内观察标记红细胞被吞噬，以明确输血是否有效，为辅助诊断红细胞输注无效提供了直观的证据。

Detection of erythrocyte phagocytosis and distribution in vivo based on 18F-FDG

【技术实现步骤摘要】
基于18F-FDG检测红细胞吞噬及体内分布的方法
本专利技术属于红细胞吞噬及体内分布检测领域，具体涉及基于18F-FDG检测红细胞吞噬的方法，本专利技术还涉及基于18F-FDG检测红细胞体内分布的方法。
技术介绍
人红细胞在血液循环中的寿命约120天。红细胞在循环过程中受到氧化应激、胆红素和细胞因子等刺激而逐渐受损、衰老，自身结构和组成也随之发生变化。衰亡红细胞膜表面分子发生变构或聚集，从而暴露相应抗原决定簇而被巨噬细胞识别、吞噬。通过检测红细胞吞噬率可评估红细胞表面是否吸附抗体或者在体内发生病理性变化，从而一定程度上辅助诊断及解释临床上出现的不明原因的贫血和溶血。输血作为临床常用补充红细胞数目手段对维持患者正常血容量和氧供给具有重要意义，而红细胞输注无效是常见的输血不良反应。因此，追踪输注红细胞在体内器官的分布，尤其是在肝脾的聚集程度，对判断红细胞输注无效的原因具有重要意义。检测红细胞吞噬的方法主要分为两大类，一类是基于光学显微镜的原始计数方法，通过瑞氏染色或荧光染色计数巨噬细胞内的红细胞数，计算吞噬率和吞噬指数；瑞氏染色是当巨噬细胞吞噬完红细胞后通过巨噬细胞和红细胞嗜酸嗜碱性的差本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.基于18F‑FDG检测红细胞吞噬的方法，包括如下步骤：（1）制作红细胞悬液；（2）调整18F‑FDG标记液渗透压；（3）18F‑FDG标记红细胞；（4）提前将巨噬细胞种至24孔板中，每孔中加500ul完全1640培基；（5）取10ul步骤（3）中标记过的红细胞至90ul完全1640培基中，混匀得到红细胞悬液，并取10ul上述红细胞悬液加至24孔板的一个孔中，混匀；（6）将步骤（5）中一个孔中孵育后的培基溶液收集至1.5ml EP管1中，再向每孔中加入500ul红细胞裂解液；（7）将24孔板对应孔中的巨噬细胞吹打下来并和该孔中剩余的溶液一起收集至1.5ml EP管2中；（8）将上述步骤中的溶...

【技术特征摘要】
1.基于18F-FDG检测红细胞吞噬的方法，包括如下步骤：（1）制作红细胞悬液；（2）调整18F-FDG标记液渗透压；（3）18F-FDG标记红细胞；（4）提前将巨噬细胞种至24孔板中，每孔中加500ul完全1640培基；（5）取10ul步骤（3）中标记过的红细胞至90ul完全1640培基中，混匀得到红细胞悬液，并取10ul上述红细胞悬液加至24孔板的一个孔中，混匀；（6）将步骤（5）中一个孔中孵育后的培基溶液收集至1.5mlEP管1中，再向每孔中加入500ul红细胞裂解液；（7）将24孔板对应孔中的巨噬细胞吹打下来并和该孔中剩余的溶液一起收集至1.5mlEP管2中；（8）将上述步骤中的溶液离心，将上清收集至EP管1中，用PBS重悬EP管2中的巨噬细胞沉淀；（9）检测EP管1与EP管2的放射性，并计算吞噬比例，吞噬比例=EP管2放射性/（EP管1放射性+EP管2放射性）×100%。2.根据权利要求1所述的基于18F-FDG检测红细胞吞噬的方法，其特征在于，所述步骤（1）包括如下步骤：（ⅰ）收集全血标本，将全血标本以离心，得到压积红细胞与血浆；（ⅱ）取100ul上述步骤的压积红细胞，加1mlPBS洗3遍后离心；（ⅲ）取100ul上述步骤中的压积红细胞，加入25ulPBS，得到红细胞悬液，耗糖。3.根据权利要求2所述的基于18F-FDG检测红细胞吞噬的方法，其特征在于，所述步骤（ⅰ）、（ⅱ）中离心条件均为4℃条件下离心5min，离心力为500g。4.根据权利要求1所述的基于18F-FDG检测红细胞吞噬的方法，其特征在于，所述步骤（2）为每100ul18F-FDG中加11ul10xPBS。5.根据权利要求1所述的基于18F-FDG检测红细胞吞噬...

【专利技术属性】
技术研发人员：李宁，殷雯钰，袁姣，张志敏，陈君，谭姝娜，彭芳，
申请(专利权)人：中南大学湘雅医院，
类型：发明
国别省市：湖南,43