一种快速鉴定食品中绵羊源成分的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种快速鉴定食品中绵羊源成分的试剂盒，涉及生物物种鉴定技术领域。本发明专利技术首先筛选出一个绵羊源通用内标准基因calponin，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其在绵羊物种中拷贝数恒定，不存在等位基因变异，可作为鉴定绵羊源的靶基因。以该基因为靶序列设计了非对称扩增引物，非对称PCR反应产物用于DNA银纳米簇检测。非对称PCR反应结合DNA银纳米簇检测构成快速检测试剂盒，可快速、灵敏地检测食品中的绵羊源成分，检测灵敏度可达4％(w/w)。本发明专利技术非对称PCR‑DNA银纳米簇通用荧光试剂盒使用方法简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，非常适用于现场实时检测。

A Kit for Rapid Identification of Sheep-derived Components in Food and Its Application

【技术实现步骤摘要】
一种快速鉴定食品中绵羊源成分的试剂盒及其应用
本专利技术涉及生物物种鉴定
，具体的说涉及一种检测食品中绵羊源成分的非对称PCR-DNA银纳米簇快速检测试剂盒。
技术介绍
随着经济的高速发展，人民生活水平的提高，我国居民对肉类食品的需求逐年增加。尽管许多国家明确规定要求食品标签真实明确地标出肉的种类、来源，禁止掺假行为，但是市场上仍有很多肉类掺假的事件发生，例如为了降低成本，驴肉火烧中掺入了猪肉，羊肉中掺入猪肉，香肠中掺杂其他肉类等等行为。目前，对于食品掺假的检测方法主要是PCR加琼脂糖凝胶电泳的方法，最终结果的判断需要借助凝胶成像系统等大型仪器来完成，过程比较繁琐且耗时较长。因此，本专利技术目的是提供一种食品中绵羊源成分的快速灵敏检测试剂盒。目前，内标准基因已被广泛地用于鉴别食品掺假，但如何筛选出合适的内标准基因显得尤为重要。目前国内外的肉制品掺假检测技术多是针对线粒体上的基因设计特异引物来进行实时荧光定量PCR扩增，由于线粒体基因为多拷贝基因，其检测灵敏度高，但同时在区分由于销售、运输等过程所产生的无意识交叉污染与有意识的非法添加时存在困扰。另外，高拷贝数线粒体DNA的浓度无本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测食品中绵羊源成分的基因，其为内标准基因，具有SEQ ID NO.1所示的序列。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测食品中绵羊源成分的基因，其为内标准基因，具有SEQIDNO.1所示的序列。2.权利要求1所述的基因在检测绵羊源成分中的应用。3.用于检测权利要求1所述基因的特异性非对称PCR引物，包括以下两条引物，F为非限制引物，R+polyC为限制引物R的5’端连接DNA-银纳米簇激发序列polyG的反向互补序列polyC：F：AGCTGAACCCTGGAAATCA(SEQIDNO.2)；R+polyC：CCCCACCCCACCCCACCCCGAAAGCGACCAGACACTA(SEQIDNO.3)。4.如权利要求3所述的特异性非对称PCR引物，其特征在于，非限制性引物(F)与限制性引物(R+polyC)的最佳浓度为10:1。5.权利要求3或4所述的特异性非对称PCR引物组合F和R+polyC在绵羊源成分鉴定中的应用。6.一种含有权利要求3或4所述特异性非对称PCR引物组合F和R+polyC的检测绵羊源成分的快速检测试剂盒。7.一种DNA-银纳米簇探针，其特征在于，包括DNA成核序列、银离子(Ag+)和硼氢化钠(NaBH4)，DNA成...

【专利技术属性】
技术研发人员：许文涛，罗云波，黄昆仑，张超，杜再慧，马玉婷，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11