【技术实现步骤摘要】
交叉引物等温扩增反应体系同步检测多种肉源性成分方法
本专利技术属于分子诊断
，具体涉及交叉引物等温扩增反应体系同步检测多种肉源性成分方法。
技术介绍
肉类动物来源的识别影响了食品和肉类生产加工，交易市场和餐饮业等领域。肉类食品安全层面越来越关注低价肉类如猪肉的替代品，以及牛、驴肉、羊肉等价格较高的肉类。肉类的欺诈性标签损害消费者的利益。肉类验证是动物源性食品的质量和安全的主要领域之一。基于鉴定加工和生肉物种方法的开发研究的重要性日益凸显。CPA是一种核酸等温扩增技术，最初由杭州优思达生物技术有限公司开发(WO2010/080691A1)。传统的单交叉引物CPA扩增系统依赖于具有链置换功能的DNA聚合酶和一套依据靶序列设计的引物：一条用于在每轮扩增期间引入额外引发位点扩增的交叉引物（2a1s）；两个标记的引物（2a*，3a*）参与扩增并用于检测；一对外围引物（4s，5a）分离单链序列。在适宜酶扩增的温度条件下，扩增产生具有与核酸试纸条检测线特异性结合位点结合的“抗原”产物(2a*1s3s/2s1a3a*）。已有CPA技术的研究应用于食品医药、防疫检疫领域中病毒...
【技术保护点】
1.交叉引物等温扩增反应体系同步检测多种肉源性成分方法，其特征在于包括以下步骤：1）在反应管中加入基础CPA体系：
【技术特征摘要】
1.交叉引物等温扩增反应体系同步检测多种肉源性成分方法，其特征在于包括以下步骤：1）在反应管中加入基础CPA体系：BstDNA聚合酶反应缓冲液，甜菜碱，Mg2+，BstDNA聚合酶，ddH2O；一套CPA引物系统；不同肉源DNA；2）反应管在63℃恒温水浴锅中扩增60min后取出，外加各个肉源的特异性外加标记引物6s/a-n*(n=1,2,3...)后，93℃水浴反应3min，取反应产物在胶体金核酸试纸条上测试。2.如权利要求1所述的交叉引物等温扩增反应体系同步检测多种肉源性成分方法，其特征在于所述步骤1）中CPA引物系统为：以不同肉源的相同基因片段设计的5条通...
【专利技术属性】
技术研发人员：郑方媛，冯涛，李素芳，潘家荣，周秀雯，齐苗苗，朱天梦，
申请(专利权)人：中国计量大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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