拮抗瘦素受体的抗原结合蛋白制造技术

本发明专利技术提供了与瘦素受体(LEPR)结合的抗体和抗体的抗原结合片段，以及使用它们的方法。根据某些实施方案，本发明专利技术包括结合LEPR并拮抗LEPR信号传导的抗体和抗体的抗原结合片段。在某些实施方案中，本发明专利技术包括在存在或不存在瘦素的情况下结合LEPR的抗体和抗体的抗原结合片段。在其他实施方案中，本发明专利技术包括表现出对LEPR的信号传导有部分激动作用的抗体和抗体的抗原结合片段。本发明专利技术的抗体和抗原结合片段可用于治疗各种疾病，包括但不限于充血性心力衰竭恶病质、肺恶病质和癌症恶病质、自身免疫性疾病(如炎性肠病、红斑狼疮、多发性硬化症、牛皮癣)、心血管疾病、血压升高、神经退行性疾病、抑郁症、癌症(如肝细胞癌、黑色素瘤、乳腺癌)以及与瘦素信号传导升高相关或由其导致的其他疾病和病症。

Antigen binding protein antagonizing leptin receptor

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】拮抗瘦素受体的抗原结合蛋白
技术介绍
瘦素是主要由脂肪组织表达的多肽激素，参与对代谢、能量平衡和食物摄入的调节。瘦素的活性通过与瘦素受体相互作用和通过瘦素受体的信号传导来介导。瘦素受体(也称为“LEPR”、“WSX”、“OB受体”、“OB-R”和“CD295”)是I型细胞因子受体家族的单次跨膜受体，具有较大的(含有818个氨基酸)细胞外结构域。瘦素、Ob-R瘦素受体或两者的表达升高会导致多种疾病，包括但不限于厌食症或其他精神疾病进食障碍、慢性肾病恶病质、其他恶病质(如充血性心力衰竭恶病质、肺恶病质、辐射恶病质和癌症恶病质)、自身免疫性疾病(如炎性肠病、红斑狼疮、多发性硬化症、牛皮癣)、心血管疾病、血压升高、抑郁症、非酒精性脂肪肝病、神经退行性疾病、抑郁症、癌症(如肝细胞癌、黑色素瘤和乳腺癌)。用于解决高瘦素信号传导的建议性治疗方法包括使用瘦素受体肽拮抗剂和拮抗剂突变体如可溶性瘦素受体变体、竞争性的LEPR拮抗剂如抗体9F8(Fazelietal.(2006)JImmunologicalMethods312,190-200)或靶向瘦素受体的纳米抗体(McMurphyetal.,PLOSOne(2014)9(2):e89895)、纤连蛋白III结构域、促食欲物质(例如，生长激素释放肽和NPY)、阻断瘦素的下游介导物(例如，黑皮质素受体4)和/或生活方式的改变。然而，这些方法通常显示出有限的功效。因此，本领域需要替代方法来治疗瘦素抗性和与血清瘦素水平升高和/或过量的LEPR信号传导相关的其他疾病。序列表序列表的正式副本通过EFS-Web以ASCII格式的序列表与说明书同时提交，其文件名为2017_11_08_10271WO01_SEQ_LIST_ST25.TXT，创建日期为2017年11月8日，大小为约87.4千字节。该ASCII格式文档中包含的序列表是说明书的一部分，并且其全部内容通过引用并入本文。专利技术概述本专利技术提供了结合人瘦素受体(LEPR)的抗体及其抗原结合片段。本专利技术的抗体是拮抗剂抗体；即，本专利技术的抗LEPR的抗体与LEPR的结合导致细胞中瘦素受体信号传导的阻断或下调。因此，在各种实施方案中，本专利技术的拮抗剂抗体表现出较弱的部分激动剂活性。但是，本专利技术的抗体可用于例如下调个体中瘦素的生物学活性。因此，本专利技术的抗体和抗原结合片段可用于与升高的瘦素信号传导相关的疾病和病症的治疗性处理中。本专利技术的抗体可以是全长的(例如，IgG1或IgG4抗体)或者可以仅包含抗原结合部分(例如，Fab、F(ab’)2或scFv片段)，并且可以对其进行修饰以影响功能，例如，消除残余效应子功能(Reddyetal.,2000,J.Immunol.164:1925-1933)。本专利技术的示例性LEPR拮抗剂抗体列于本文的表1和2中。表1示出了所述示例性LEPR拮抗剂抗体的重链可变区(HCVR)、轻链可变区(LCVR)、重链互补决定区(HCDR1、HCDR2和HCDR3)和轻链互补决定区(LCDR1、LCDR2)的氨基酸序列标识符。表2示出了所述示例性LEPR拮抗剂抗体的HCVR、LCVR、HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的核酸序列标识符。本专利技术提供了特异性结合LEPR的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含HCVR，所述HCVR包含选自表1中列出的任何HCVR氨基酸序列的氨基酸序列，或与其基本相似的序列，所述基本相似的序列与其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。本专利技术还提供了特异性结合LEPR的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含LCVR，所述LCVR包含选自表1中列出的任何LCVR氨基酸序列的氨基酸序列，或与其基本相似的序列，所述基本相似的序列与其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。本专利技术还提供了特异性结合LEPR的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含HCVR和LCVR氨基酸序列对(HCVR/LCVR)，所述序列对包含表1中列出的任何HCVR氨基酸序列，所述HCVR氨基酸序列与表1中列出的任何LCVR氨基酸序列配对。根据某些实施方案，本专利技术提供了抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含在表1中列出的任何示例性抗LEPR抗体中包含的HCVR/LCVR氨基酸序列对。在某些实施方案中，所述HCVR/LCVR氨基酸序列对选自下组：SEQIDNO:2/10、18/10、26/10、34/10、42/10、50/10、58/10、66/10和74/82。本专利技术还提供了特异性结合LEPR的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含重链CDR1(HCDR1)，所述HCDR1包含选自表1中列出的任何HCDR1氨基酸序列的氨基酸序列或与其基本相似的序列，所述基本相似的序列与其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。本专利技术还提供了特异性结合LEPR的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含重链CDR2(HCDR2)，所述HCDR2包含选自表1中列出的任何HCDR2氨基酸序列的氨基酸序列或与其基本相似的序列，所述基本相似的序列与其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。本专利技术还提供了特异性结合LEPR的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含重链CDR3(HCDR3)，所述HCDR3包含选自表1中列出的任何HCDR3氨基酸序列的氨基酸序列或与其基本相似的序列，所述基本相似的序列与其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。本专利技术还提供了特异性结合LEPR的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含轻链CDR1(LCDR1)，所述LCDR1包含选自表1中列出的任何LCDR1氨基酸序列的氨基酸序列或与其基本相似的序列，所述基本相似的序列与其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。本专利技术还提供了特异性结合LEPR的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含轻链CDR2(LCDR2)，所述LCDR2包含选自表1中列出的任何LCDR2氨基酸序列的氨基酸序列或与其基本相似的序列，所述基本相似的序列与其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。本专利技术还提供了特异性结合LEPR的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含轻链CDR3(LCDR3)，所述LCDR3包含选自表1中列出的任何LCDR3氨基酸序列的氨基酸序列或与其基本相似的序列，所述基本相似的序列与其具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。本专利技术还提供了特异性结合LEPR的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含HCDR3和LCDR3氨基酸序列对(HCDR3/LCDR3)，所述序列对包含表1中列出的任何HCDR3氨基酸序列，所述HCVR3氨基酸序列与表1中列出的任何LCDR3氨基酸序列配对。根据某些实施方案，本专利技术提供了抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含在表1中列出的任何示例性抗LEPR抗体中包含的HCDR3/LCDR3氨基酸序列对。在某些实施本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段结合人瘦素受体(LEPR)并拮抗LEPR信号传导，同时不阻断瘦素和LEPR之间的相互作用，其中，通过体外瘦素结合测定测得所述抗体或其抗原结合片段不阻断所述相互作用超过40％。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.11.08 US 62/419,0621.一种分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段结合人瘦素受体(LEPR)并拮抗LEPR信号传导，同时不阻断瘦素和LEPR之间的相互作用，其中，通过体外瘦素结合测定测得所述抗体或其抗原结合片段不阻断所述相互作用超过40％。2.根据权利要求1所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段表现出一种或多种选自下组的其他性质：(i)通过表面等离子共振测得在25℃下以小于约10nM的KD结合单体人LEPR；(ii)通过表面等离子共振测得在25℃下以大于约5分钟的t1/2结合单体人LEPR；(iii)通过表面等离子共振测得在25℃下以小于约2.0nM的KD结合二聚体人LEPR；(iv)通过表面等离子共振测得在25℃下以大于约20分钟的t1/2结合二聚体人LEPR；(v)结合与人瘦素复合的人LEPR；(vi)在存在和不存在人瘦素的情况下结合细胞表面表达的LEPR；和(vii)在基于细胞的报告分子测定中以小于约3.0nM的IC50抑制瘦素诱导的LEPR信号传导。3.根据权利要求1或权利要求2所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中在基于细胞的报告分子测定中所述抗体或其抗原结合片段在不存在人瘦素的情况下表现出对LEPR信号传导的至少部分激活。4.一种结合人瘦素受体(LEPR)的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：(a)重链可变区(HCVR)的互补决定区(CDR)，所述重链可变区包含SEQIDNO:2、SEQIDNO:42和SEQIDNO:58所示的氨基酸序列，以及(b)轻链可变区(LCVR)的CDR，所述轻链可变区包含SEQIDNO:10所示的氨基酸序列。5.根据权利要求4所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对的重链和轻链CDR，所述氨基酸序列对选自下组：SEQIDNO:2/10、42/10和58/10。6.根据权利要求5所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，所述氨基酸序列对选自下组：SEQIDNO:2/10、42/10和58/10。7.根据权利要求6所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段拮抗LEPR的信号传导。8.根据权利要求1-3中任一项所述的结合人瘦素受体(LEPR)的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含：(...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·科洛马达，P·史蒂维斯，J·阿尔塔雷霍斯，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：美国,US