抑制肿瘤的多肽类似物UBE2Z制造技术

本发明专利技术提供一种抑制肿瘤的多肽类似物UBE2Z

UBE2Z, a polypeptide analogue that inhibits tumors

【技术实现步骤摘要】
抑制肿瘤的多肽类似物UBE2Z1-330aa及其编码核酸、引物对、表达载体和应用
本专利技术涉及药物
，尤其涉及一种抑制肿瘤的多肽类似物UBE2Z1-330aa及其编码核酸、引物对、表达载体和应用。
技术介绍
c-myc转录因子是肿瘤发生的核心癌基因，几乎所有的恶性肿瘤细胞中均发生c-myc异常表达升高和不受控制的活化，进而导致肿瘤细胞的永生化、干细胞性、增殖、耐药和远端转移等肿瘤各方面的恶性行为。c-myc主要通过调控下游基因转录发挥上述活性，其在核内的表达决定了肿瘤细胞的恶性程度，因此，抑制肿瘤细胞中c-myc的表达是一种非常有效的肿瘤靶向治疗策略。近年来有研究表明，c-myc在肿瘤细胞中的异常高表达与其降解调控异常有关。肿瘤细胞中c-myc异常稳定，导致其在核内聚集并转录活化众多肿瘤恶性相关蛋白，导致肿瘤的进程。因此，促进c-myc的降解是肿瘤靶向治疗的一个有效的策略。以往的研究表明，c-myc主要通过泛素蛋白酶体通路降解，但c-myc的降解受多种因素调控，很多肿瘤细胞中c-myc发生泛素化修饰和降解通路并未发生异常，但这些细胞中c-myc的半衰期和降解水平却存在明显的异常。因此，目前还缺乏一种直接诱导c-myc降解的抗癌药物。
技术实现思路
本专利技术针对目前缺乏一种针对肿瘤细胞的核心癌基因c-myc的抗癌药物的问题，提供了一种抑制肿瘤的多肽类似物UBE2Z1-330aa及其编码核酸、引物对、表达载体和应用，所述多肽类似物UBE2Z1-330aa可直接结合c-myc基因，并促进c-myc降解，从而有效抑制癌细胞的永生化和增殖。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种抑制肿瘤的多肽类似物UBE2Z1-330aa，氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。本专利技术还提供了一种编码上述技术方案所述多肽类似物UBE2Z1-330aa的核酸分子，核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。本专利技术还提供了一种用于扩增上述技术方案所述核酸分子的引物对，其中，上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示，下游序列的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示。本专利技术还提供了一种前述技术方案所述多肽类似物UBE2Z1-330aa的表达载体，包括前述技术方案所述的核酸分子。优选的，将前述技术方案所述的核酸分子插入pCMV-N-Flag的多克隆位点，得到所述表达载体。本专利技术还提供了前述技术方案所述多肽类似物UBE2Z1-330aa、核酸分子、引物对或表达载体在制备抗肿瘤药物中的应用。优选的，所述抗肿瘤药物为靶向抑制肿瘤增殖的药物。优选的，所述抗肿瘤药物包括抗结肠癌药物、抗肝癌药物和抗胃癌药物中的一种或多种。与现有技术相比，本专利技术的有益效果：专利技术人研究表明，在肿瘤中UBE2Z蛋白可与c-myc发生相互作用，促进c-myc在肿瘤细胞中的降解。因此，利用UBE2Z活性多肽类似物促进c-myc在肿瘤细胞中的降解成为寻找抗肿瘤药物的新策略。本专利技术基于肿瘤中UBE2Z与癌基因c-myc相互作用结构域的确立，提供了一种多肽类似物UBE2Z1-330aa，氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。本专利技术提供的多肽类似物UBE2Z1-330aa为UBE2Z蛋白中具有促进c-myc在肿瘤细胞中的降解作用的330个氨基酸，能够直接结合c-myc，介导c-myc发生FAT10翻译后修饰并介导修饰后的物质迅速降解，从而有效抑制肿瘤细胞的永生化和增殖，发挥抑制肿瘤作用。可为肿瘤治疗靶点的探寻提供理论依据，对于应用于肿瘤的临床治疗具有十分重要的开发前景。附图说明图1、实施例1中UBE2Z和c-myc蛋白进行免疫沉淀的免疫沉淀复合物检测实验结果图；图2、实施例2的步骤1中重组真核表达载体图谱；图3、实施例2的步骤2中HCT116细胞系中免疫印迹证明多肽的蛋白表达实验结果图；图4、实施例3中多肽类似物UBE2Z1-330aa的荧光检测c-myc降解的结果图；图5、实施例5中免疫沉淀表明HCT116细胞系中多肽类似物可促进c-myc发生FAT10类泛素化修饰；图6、实施例6中免疫印迹表明HCT116细胞系中多肽类似物对c-myc降解的实验结果图；图7、实施例7步骤1中转染以及未转染细胞细胞培养表明细胞系中多肽类似物UBE2Z1-330aa抑制肿瘤细胞核酸掺入。图8、实施例7步骤2中转染以及未转染细胞细胞培养表明细胞系中多肽类似物UBE2Z1-330aa抑制肿瘤细胞的增殖。具体实施方式本专利技术提供了一种抑制肿瘤的多肽类似物UBE2Z1-330aa，氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。本专利技术所述多肽类似物UBE2Z1-330aa用于促进肿瘤细胞中c-myc发生类泛素化修饰和降解，从而达到抑制肿瘤增殖和生长的目的。SEQIDNO.1：MAESPTEEAATAGAGAAGPGASSVAGVVGVSGSGGGFGPPFLPDVWAAAAAAGGAGGPGSGLAPLPGLPPSAAAHGAALLSHWDPTLSSDWDGERTAPQCLLRIKRDIMSIYKEPPPGMFVVPDTVDMTKIHALITGPFDTPYEGGFFLFVFRCPPDYPIHPPRVKLMTTGNNTVRFNPNFYRNGKVCLSILGTWTGPAWSPAQSISSVLISIQSLMTENPYHNEPGFEQERHPGDSKNYNECIRHETIRVAVCDMMEGKCPCPEPLRGVMEKSFLEYYDFYEVACKDRLHLQGQTMQDPFGEKRGHFDYQSLLMRLGLIRQKVLERLHN。本专利技术还提供了一种编码上述技术方案所述多肽类似物UBE2Z1-330aa的核酸分子，核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。本专利技术提供的核酸分子可编码得到所述多肽类似物UBE2Z1-330aa，也可用于抑制肿瘤药物的制备中。SEQIDNO.2：ATGGCGGAGAGTCCGACTGAGGAGGCGGCAACGGCGGGCGCCGGGGCGGCGGGCCCCGGGGCGAGCAGCGTTGCTGGTGTTGTTGGCGTTAGCGGCAGCGGCGGCGGGTTCGGGCCGCCTTTCCTGCCGGATGTGTGGGCGGCGGCGGCGGCAGCGGGCGGGGCCGGGGGCCCGGGGAGCGGCCTGGCTCCGCTGCCCGGGCTCCCGCCCTCAGCCGCTGCCCACGGGGCCGCGCTGCTTAGCCACTGGGACCCCACGCTCAGCTCCGACTGGGACGGCGAGCGCACCGCGCCGCAGTGTCTACTCCGGATCAAGCGGGATATCATGTCCATTTATAAGGAGCCTCCTCCAGGAATGTTCGTTGTACCTGATACTGTTGACATGACTAAGATTCATGCATTGATCACAGGCCCATTTGACACTCCTTATGAAGGGGGTTTCTTCCTGTTCGTGTTTCGGTGTCCGCCCGACTATCCCATCCACCCACCTCGGGTCAAACTGATGACAACGGGCAATAACACAGTGAGGTTTAACCCCAACTTCTACCGCAATGGGAAAGTCTGCTTGAGTATTCTAGGTACA本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抑制肿瘤的多肽类似物UBE2Z

【技术特征摘要】
1.一种抑制肿瘤的多肽类似物UBE2Z1-330aa，其特征在于，氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.一种编码权利要求1所述多肽类似物UBE2Z1-330aa的核酸分子，其特征在于，核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。3.一种用于扩增权利要求2所述核酸分子的引物对，其特征在于，其中，上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示，下游序列的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示。4.一种权利要求1所述多肽类似物UBE2Z1-330aa的表达载体，其特征在于，包括权利要求2所述的核酸分子...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡宝英，万春华，李洁佳，
申请(专利权)人：南通大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32