本发明专利技术公开了一种组织培育草莓的方法，包括取材杀菌及制备培养基、脱毒和移栽等步骤，所述脱毒，即先取草莓匍匐茎茎尖经初代培养基诱导成不定芽，再将所述不定芽经继代培养基诱导成小植株团，然后再将所述小植株团经生根培养基诱导成试管脱毒种苗，初步培养基、继代培养基是诱导草莓细胞分化的培养基，生根培养基是诱导草莓生根的营养基，所述的营养基由基础营养基MS和营养添加剂组成。此方法将草莓匍匐茎茎尖培养出来的组培苗，根系发达，不易污染，而且可直接移栽，不需要炼苗；该方法脱毒操作方便，繁殖速度快，成本低，产量高，适合规模化育苗。
A Method of Tissue Culture of Strawberry
【技术实现步骤摘要】
一种组织培育草莓的方法
本专利技术涉及草莓种苗繁殖领域，特别涉及一种组织培育草莓的方法。
技术介绍
草莓是蔷薇科草莓属宿根性多年生草本植物,为世界性浆果,其栽培面积和产量在世界浆果类水果生产中仅次于葡萄。草莓具有适应性广、栽培容易、结果早、产量高、收益好等优点，是一种经济价值较高的天然水果，因此全国各地都在积极的引种,但是由于长期的匍匐茎无性繁殖,易受病毒侵袭而使品种退化由此造成产量低，产量低的原因主要是我国草莓长期连作,草莓病菌较多很少应用脱毒苗的更新换代。目前侵袭草莓的病毒病，主要有四种，即草莓斑驳病毒、草莓皱缩病毒、草莓轻和黄边病毒、草莓镶脉病毒，莓病毒病严重影响草莓的产量，一般导致减产30％-50％。应用组织培养是防治病毒病和提高存活率的有效途径，也是加快草莓新良种繁育推广速度和脱毒健康种苗生产的主要技术手段。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种组织培育草莓的方法，该方法培养出的组培苗根系发达，不易污染，可直接移栽，不需要炼苗；脱毒方便，繁殖速度快，成本低，该方法诱导成功率高且能安全快速繁殖出优良草莓脱毒组培苗。本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的：一种组织培育草莓的方法，包括以下步骤：S1：取材杀菌及制备培养基；取材杀菌步骤：选取草莓匍匐茎茎尖3～5cm，先用流水冲洗0.5～1.5h清洗泥沙，再将茎尖浸泡在氯化汞溶液中消毒10～15min，然后再用无菌水冲洗干净，乙醇消毒30～45s，最后再用无菌水冲洗，重复这个步骤2～3次；制备培养基：制备初代培养基、继代培养基、生根培养基，在所述三种培养基中加入7-11g/L琼脂，形成固定培养基；所述的初代培养基包括：MS培养基，0.1～1.0mg/L6BA；所述的继代培养基包括：MS培养基，0.1～1.0mg/L6BA；所述的生根培养基包括：MS培养基，0.05～0.2mg/LIBA；S2：脱毒：先将杀菌后的茎尖用无菌纸吸干水分，在显微镜下解剖，剥出茎尖生长点，将其置于诱导细胞分化的初代培养基中，用封口膜封口，当不定芽长至2～4cm时，转移至另一诱导细胞分化的继代培养基中，诱导所述不定芽分化成小植株团，待小植株团长至3～5cm时将其在超净工作台中切分成单独的小植株，再转移至诱导生根的生根培养基中，培养成试管苗，即脱毒种苗；S3：移栽：将试管苗从生根培养基中取出，用脱毒水洗净试管苗根部的培养基，将其移栽进盛有灭菌基质的穴盘中，置于阴凉处培养成组培苗。所述MS培养基的配方为：大量元素：KNO31.9g/L、NH4NO31.65g/L、MgSO4·7H2O0.37g/L、KH2PO40.17g/L、CaCl2·2H2O0.44g/。微量元素：MnSO4·4H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、H3BO36.2mg/L、KI0.83mg/L、Na2MoO4·7H2O0.25mg/L、CuSO4.5H2O40.025mg/L、CoCL2.6H2O0.025mg/。铁盐：Na2-EDTA37.3mg/L、FeSO4.4H2O27.8mg/L。有机物：甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、盐酸硫铵素0.1mg/L、烟酸0.5mg/L、肌酸100mg/L。所述的三种培养基的配方分别为：初代培养基包括：MS培养基，0.5mg/L6BA；继代培养基包括：MS培养基，0.5mg/L6BA；生根培养基包括：MS培养基，0.1mg/LIBA。所述的步骤S1中，所述乙醇为75％医用乙醇。所述的步骤S1中，所述氯化汞溶液的浓度为0.1％。所述的步骤S1中，所述的无菌水为超纯水。所述的步骤S2中，在温度为25℃，遮光条件下进行初代培养，培养时间为30～35d；在温度为25℃，日光照时长12h下进行生根培养，培养时间为30～35d。所述的步骤S3中，所述灭菌基质为椰糠：珍珠岩＝2:1的混合物。本专利技术的有益效果是：1)本专利技术的方法能培养出根系发达的组培苗，所述组培苗不易污染，可直接移栽，不需要炼苗，能安全快速繁殖出优良草莓脱毒组培苗；而且其整个过程脱毒方便，繁殖速度快，成本低，产量高。2)改良了培养基的配方，采用固体培养基，在基础营养基MS内分别增加了配比合适的营养添加剂6BA和IBA，分别用来可以诱导草莓细胞的分化和诱导草莓组织培养幼苗根的发育伸长，诱导的效率高。3)该方法以匍匐茎尖为外植体，具有取材方便，病毒少，接种有效率高，遗传性稳定等优点。具体实施方式下面将结合实施例，对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域技术人员在没有付出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1一种组织培育草莓的方法，包括以下步骤：S1：取材杀菌及制备培养基；取材杀菌步骤：选取草莓匍匐茎茎尖5cm，先用流水冲洗1h清洗泥沙，再将茎尖浸泡在氯化汞溶液中消毒10min，然后再用无菌水冲洗干净，乙醇消毒30s，最后再用无菌水冲洗，重复这个步骤2～3次；制备培养基：制备初代培养基、继代培养基、生根培养基，在所述三种培养基中加入9g/L琼脂，形成固定培养基；所述的初代培养基包括：MS培养基，0.1mg/L6BA；所述的继代培养基包括：MS培养基，0.1mg/L6BA；所述的生根培养基包括：MS培养基，0.05mg/LIBA；S2：脱毒：先将杀菌后的茎尖用无菌纸吸干水分，在显微镜下解剖，剥出茎尖生长点，将其置于诱导细胞分化的初代培养基中，用封口膜封口，当不定芽长至2～4cm时，转移至另一诱导细胞分化的继代培养基中，诱导所述不定芽分化成小植株团，待小植株团长至3～5cm时将其在超净工作台中切分成单独的小植株，再转移至诱导生根的生根培养基中，培养成试管苗，即脱毒种苗；S3：移栽：将试管苗从生根培养基中取出，用脱毒水洗净试管苗根部的培养基，将其移栽进盛有灭菌基质的穴盘中，置于阴凉处培养成组培苗。所述的步骤S1中，所述乙醇为75％医用乙醇，所述氯化汞溶液的浓度为0.1％，所述的无菌水为超纯水。所述的步骤S2中，在温度为25℃，遮光条件下进行初代培养，培养时间为30d；在温度为25℃，日光照时长12h下进行生根培养，培养时间为30d。所述的步骤S3中，所述灭菌基质为椰糠：珍珠岩＝2:1的混合物。实施例2一种组织培育草莓的方法，包括以下步骤：S1：取材杀菌及制备培养基；取材杀菌步骤：选取草莓匍匐茎茎尖5cm，先用流水冲洗1.5h清洗泥沙，再将茎尖浸泡在氯化汞溶液中消毒15min，然后再用无菌水冲洗干净，乙醇消毒45s，最后再用无菌水冲洗，重复这个步骤2～3次；制备培养基：制备初代培养基、继代培养基、生根培养基，在所述三种培养基中加入11g/L琼脂，形成固定培养基；所述的初代培养基包括：MS培养基，0.5mg/L6BA；所述的继代培养基包括：MS培养基，0.5mg/L6BA；所述的生根培养基包括：MS培养基，0.2mg/LIBA；S2：脱毒：先将杀菌后的茎尖用无菌纸吸干水分，在显微镜下解剖，剥出茎尖生长点，将其置于诱导细胞分化的初代培养基中，用封口膜封口，当不定芽长至2～4cm时，转移至另一诱导细胞分化的继代培养基中，诱导所述不定芽分化成小植株团本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种组织培育草莓的方法，其特征在于：包括以下步骤：S1：取材杀菌及制备培养基；取材杀菌步骤：选取草莓匍匐茎茎尖3～5cm，先用流水冲洗0.5~1.5h清洗泥沙，再将茎尖浸泡在氯化汞溶液中消毒10~15min，然后再用无菌水冲洗干净，乙醇消毒30~45s，最后再用无菌水冲洗，重复这个步骤2～3次；制备培养基：制备初代培养基、继代培养基、生根培养基，在所述三种培养基中加入7‑11g/L琼脂，形成固定培养基；所述的初代培养基包括：MS培养基，0.1～1.0mg/L 6BA；所述的继代培养基包括：MS培养基，0.1～1.0mg/L 6BA；所述的生根培养基包括：MS培养基，0.05～0.2mg/L IBA；S2：脱毒：先将杀菌后的茎尖用无菌纸吸干水分，在显微镜下解剖，剥出茎尖生长点，将其置于诱导细胞分化的初代培养基中，用封口膜封口，当不定芽长至2～4cm时，转移至另一诱导细胞分化的继代培养基中，诱导所述不定芽分化成小植株团，待小植株团长至3～5cm时将其在超净工作台中切分成单独的小植株，再转移至诱导生根的生根培养基中，培养成试管苗，即脱毒种苗；S3：移栽：将试管苗从生根培养基中取出，用脱毒水洗净试管苗根部的培养基，将其移栽进盛有灭菌基质的穴盘中，置于阴凉处培养成组培苗。...
【技术特征摘要】
1.一种组织培育草莓的方法，其特征在于：包括以下步骤：S1：取材杀菌及制备培养基；取材杀菌步骤：选取草莓匍匐茎茎尖3～5cm，先用流水冲洗0.5~1.5h清洗泥沙，再将茎尖浸泡在氯化汞溶液中消毒10~15min，然后再用无菌水冲洗干净，乙醇消毒30~45s，最后再用无菌水冲洗，重复这个步骤2～3次；制备培养基：制备初代培养基、继代培养基、生根培养基，在所述三种培养基中加入7-11g/L琼脂，形成固定培养基；所述的初代培养基包括：MS培养基，0.1～1.0mg/L6BA；所述的继代培养基包括：MS培养基，0.1～1.0mg/L6BA；所述的生根培养基包括：MS培养基，0.05～0.2mg/LIBA；S2：脱毒：先将杀菌后的茎尖用无菌纸吸干水分，在显微镜下解剖，剥出茎尖生长点，将其置于诱导细胞分化的初代培养基中，用封口膜封口，当不定芽长至2～4cm时，转移至另一诱导细胞分化的继代培养基中，诱导所述不定芽分化成小植株团，待小植株团长至3～5cm时将其在超净工作台中切分成单独的小植株，再转移至诱导生根的生根培养基中，培养成试管苗，即脱毒种苗；S3：移...
【专利技术属性】
技术研发人员：秦燕，朱艺萌，
申请(专利权)人：成都市农林科学院，
类型：发明
国别省市：四川,51
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