一种开菲尔乳杆菌M11在抑菌及作为治疗Ⅱ型糖尿病药剂的活性成分的应用制造技术

一种开菲尔乳杆菌M11在抑菌及作为治疗Ⅱ型糖尿病药剂的活性成分的应用。本发明专利技术解决了现有乳酸菌表面疏水性低以及乳酸菌抑菌能力差的问题。本发明专利技术开菲尔乳杆菌Lactobacillus kefiri M11对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用，抑菌效果好。本发明专利技术开菲尔乳杆菌Lactobacillus kefiri M11及其菌制剂均具有优异的表面疏水性和凝聚性，对肠道有很好的粘附能力，使得其在Ⅱ型糖尿病的应用中有很好的血糖调节能力，本发明专利技术对Ⅱ型糖尿病病症有明显的缓解作用。

Application of Lactobacillus kefir M11 in bacteriostasis and as an active ingredient in the treatment of type 2 diabetes mellitus

【技术实现步骤摘要】
一种开菲尔乳杆菌M11在抑菌及作为治疗Ⅱ型糖尿病药剂的活性成分的应用
本专利技术涉及一种开菲尔乳杆菌的应用。
技术介绍
乳酸杆菌是动物肠道内的共生菌，能够帮助消化，有助人体肠道的健康，含有活性乳酸杆菌的食品常被视为健康食品，通常乳酸杆菌添加在酸奶等发酵食品中，用以人体人类肠道中菌群平衡调节。在体内肠上皮细胞可以分泌某种物质(可能是一种蛋白质或脂质磷壁酸)，有利于乳酸杆菌等益生菌在肠黏膜上定植，从而形成菌膜屏障，排斥致病菌在肠壁上的粘附。同时，乳酸杆菌会产生乳酸、乙酸及细菌素，抑制多种致病菌的侵入。因此应用乳酸杆菌代替抗生素防止人类或者动物的肠道疾病已成为当前食品和饲料工业中重要的研究领域。2019年，YANG研究发现鼠李糖乳杆菌GG还可增加仔猪肠道的通透性，并通过调控抗菌肽、细胞因子和趋化因子的分泌以改善肠道的免疫屏障功能。乳酸杆菌的粘附特性是评价乳酸杆菌益生功能的重要指标之一，粘附定植是乳酸杆菌在肠道中发挥生理功能的前提和基础。有学者研究表明微生物细胞表面疏水性和自动聚集能力对菌株的粘附性起着主要的作用，疏水性和自聚能力较高的乳酸杆菌在肠道中也呈现较高的粘附性，即菌体表面疏水性和自聚能力与其对肠道上皮细胞的粘附力成正比。目前，乳杆菌潜在的防治Ⅱ型糖尿病的功能已得到动物体内及临床实验的证实和广泛认可。当机体摄入适量的乳杆菌时，能有效调节能量代谢，降低脂肪和胆固醇堆积，有效补充Ⅱ型糖尿病引起的肠道菌群缺失，建立新的肠道平衡稳态，恢复健康肠道菌群结构，降低肠道渗透性，提高肠道屏障作用，抑制炎症反应，减轻葡萄糖不耐受并提高葡萄糖耐量和胰岛素敏感性。现有普通乳酸菌的表面疏水性低，粘附性差，血糖调节能力较差，其在防治Ⅱ型糖尿病应用效果较差，另外，乳酸杆菌还需要对致病菌产生抑制作用，才能发挥其调整血糖的作用。现在有的普通乳酸菌抑菌能力较差，限制了乳酸菌在Ⅱ型糖尿病的应用。
技术实现思路
本专利技术为了解决现有乳酸菌表面疏水性低以及乳酸菌抑菌能力较差的问题。而提供了一种开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriM11在抑菌及作为治疗Ⅱ型糖尿病药剂的活性成分的应用。本专利技术开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriM11在抑菌上的应用。本专利技术开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriM11作为治疗Ⅱ型糖尿病药剂的活性成分的应用，其中所述的开菲尔乳杆菌经过冻干处理制成菌制剂，然后再作为治疗Ⅱ型糖尿病活性吃成分进行应用。开菲尔乳杆菌经过冻干处理制成菌制剂的方法为：开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriM11在MRS培养基中培养至对数生长期后离心，去上清留菌体，然后向菌体中加入脱脂乳、蔗糖、海藻酸钠混合，经过冻干处理即得到开菲尔乳杆菌菌制剂；其中，菌体与脱脂乳、蔗糖、海藻酸钠重量比为100:6～7:1～2：1～2。上述开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriM11在改善Ⅱ型糖尿病患者肠道微生物菌群中的应用。本专利技术所述的开菲尔乳杆菌(Lactobacilluskefiri)M11保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址是武汉大学，保藏日期为2019年1月24日，保藏号为CCTCCNO：M2019080。本专利技术的LactobacilluskefiriM11来源于西藏灵菇，其菌体形态为革兰氏阳性菌、中长杆菌，菌落形态为乳白色、圆形、表面光滑。本专利技术开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriM11对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用，抑菌效果好。本专利技术开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriM11及其菌制剂均具有优异的表面疏水性和凝聚性，对肠道有很好的粘附能力，使得其在Ⅱ型糖尿病的应用中有很好的血糖调节能力，同时降低了血清和肾脏中的丙二醛水平，减轻糖尿病所引起的氧化损伤，同时对致病菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌)的有很好的抑制作用，本专利技术对Ⅱ型糖尿病的病症有明显的缓解作用，另外，本专利技术开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriM11对Ⅱ型糖尿病患者肠道微生物菌群具有明显的改善。附图说明图1是LactobacilluskefiriiM11的菌落特征；图2是LactobacilluskefiriiM11的菌体特征；图3是LactobacilluskefiriiM11的总DNAPCR扩增图；图4是开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriiM11系统发育分析图；图5是保加利亚菌LactobacillusbulgaricusATCC11842的抑菌结果图；图6是开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriiM11抑菌结果图；图7为LactobacilluskefiriiM11和LactobacilluskefiriiM11菌制剂-20℃条件下储存时间对活菌数的影响；图8是LactobacilluskefiriiM11在人工胃液中耐受性结果图；图9是LactobacilluskefiriiM11在人工肠液中耐受性结果；图10是乳杆菌及菌制剂Ⅱ型糖尿病小鼠实验；图11是开菲尔乳杆菌菌制剂对Ⅱ型糖尿病小鼠血清氧化损伤结果；图12是开菲尔乳杆菌菌制剂对Ⅱ型糖尿病小鼠肾脏氧化损伤结果；图13是开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriiM11小鼠肠道菌群的影响。具体实施方式本专利技术技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。具体实施方式一：本实施方式开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriM11在抑菌上的应用。具体实施方式二：本实施方式开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriM11作为治疗Ⅱ型糖尿病药剂的活性成分的应用。具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式二不同的是：开菲尔乳杆菌经过冻干处理制成菌制剂，然后再作为治疗Ⅱ型糖尿病药剂的活性成分的进行应用，菌制剂的制作方法为：开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriM11在MRS培养基中培养至对数生长期后离心，去上清留菌体，然后向菌体中加入脱脂乳、蔗糖、海藻酸钠混合，经过冻干处理即得到开菲尔乳杆菌菌制剂；其中，菌体与脱脂乳、蔗糖、海藻酸钠重量比为100:6～7:1～2：1～2。其他与具体实施方式二相同。具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式三不同的是：冻干处理方法是菌体与脱脂乳、蔗糖和海藻酸钠的混合物在-20℃条件下冷冻1～5h，然后在冷阱温度小于-40℃、真空度大于200mtorr的条件下真空冷冻干燥，即完成了冻干处理。其他与具体实施方式三相同。具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式三不同的是：离心条件是离心转速为5000r/min、离心时间为10min。其他与具体实施方式三相同。具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式三不同的是：菌体与脱脂乳、蔗糖、海藻酸钠重量比为100:6.67：:1.67：1.67。其他与具体实施方式三相同。具体实施方式七：本实施方式开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriM11在改善Ⅱ型糖尿病患者肠道微生物菌群中的应用。本实施方式在用于开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriM11经过冻干处理制成菌制剂后在用于改善Ⅱ型糖尿病患者肠道微生物菌群。开菲尔乳杆菌经过冻干处理制成菌制剂，具体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种开菲尔乳杆菌M11在抑菌上的应用。

【技术特征摘要】
1.一种开菲尔乳杆菌M11在抑菌上的应用。2.一种开菲尔乳杆菌M11作为治疗Ⅱ型糖尿病药剂的活性成分的应用。3.根据权利要求2所述的开菲尔乳杆菌M11作为治疗Ⅱ型糖尿病药剂的活性成分的应用，其特征在于开菲尔乳杆菌经过冻干处理制成菌制剂，具体的方法为：开菲尔乳杆菌LactobacilluskefiriM11在MRS培养基中培养至对数生长期后离心，去上清留菌体，然后向菌体中加入脱脂乳、蔗糖、海藻酸钠混合，经过冻干处理即得到开菲尔乳杆菌菌制剂；其中，菌体与脱脂乳、蔗糖、海藻酸钠重量比为100:6～7:1～2：1～2。4.根据权利要求3所述的开菲尔乳杆菌M11作为治疗Ⅱ型糖尿病药剂的活...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟利，
申请(专利权)人：黑龙江大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23