【技术实现步骤摘要】
利用斑马鱼胚胎Frizzled基因的相对表达量评价低剂量伽马射线辐照损伤的方法
本专利技术属于伽马射线辐照损伤评价
，具体涉及一种利用斑马鱼胚胎脑部Frizzled基因的相对表达量评价低剂量伽马射线辐照损伤的方法。
技术介绍
众所周知，核武器爆炸和核电站重大事故产生的高剂量电离辐射会引起急性辐射损伤。然而长期低剂量电离辐射诱导的生物效应，因其程度较低，观察指标多样，观察难度大等原因，目前仍有许多争议，未能建立检测和评估标准。随着辐照治疗、辐照诊断以及核技术的广泛应用，使人们越来越多地处于低剂量电离辐射中，这种辐射对健康的潜在影响引起了民众的广泛关注。因此，建立低剂量伽马射线辐照损伤的评价方法，对阐明、预测和评估低剂量电离辐射对包括人类在内的脊椎动物的影响和潜在风险，对预防和治疗低剂量伽马射线辐照诱导的人类疾病，对确定低剂量伽马射线的辐照损伤效应，对筛查低剂量伽马射线辐照生物标志物，及对保护暴露于低剂量伽马射线辐照的公众和从业人员具有重要的意义。斑马鱼（Daniorerio）是一种经典的脊椎动物模式生物，由于其饲养相对容易，生命力顽强，繁殖能力强，发育速度快，...
【技术保护点】
1.一种利用斑马鱼胚胎Frizzled基因的相对表达量评价低剂量伽马射线辐照损伤的方法，利用斑马鱼胚胎对低剂量伽马射线辐照敏感的特性，根据斑马鱼胚胎接受的辐照剂量与脑部Frizzled基因的相对表达量之间的剂量‑效应关系，通过检测斑马鱼胚胎脑部Frizzled基因的相对表达量，评估低剂量伽马射线辐照对斑马鱼胚胎的损伤，其特征在于，具体步骤是：（1）受精卵的采集；（2）受精卵的培养；（3）伽马射线辐照；（4）Frizzled基因相对表达量的检测；（5）综合评价，所述的受精卵的采集的方法是：在交配前2 d 将斑马鱼雌雄分开养在不同的饲养缸中，繁殖产卵的前夜，将1条雌鱼2条雄鱼放...
【技术特征摘要】
1.一种利用斑马鱼胚胎Frizzled基因的相对表达量评价低剂量伽马射线辐照损伤的方法，利用斑马鱼胚胎对低剂量伽马射线辐照敏感的特性，根据斑马鱼胚胎接受的辐照剂量与脑部Frizzled基因的相对表达量之间的剂量-效应关系，通过检测斑马鱼胚胎脑部Frizzled基因的相对表达量，评估低剂量伽马射线辐照对斑马鱼胚胎的损伤，其特征在于，具体步骤是：（1）受精卵的采集；（2）受精卵的培养；（3）伽马射线辐照；（4）Frizzled基因相对表达量的检测；（5）综合评价，所述的受精卵的采集的方法是：在交配前2d将斑马鱼雌雄分开养在不同的饲养缸中，繁殖产卵的前夜，将1条雌鱼2条雄鱼放入同一交配装置中，雌雄鱼之间用挡板隔开，控制光照14h，黑暗10h，之后将挡板拿开，雄鱼排精，雌鱼开始产卵，等产卵结束后，将亲鱼放回饲养缸，并用孵化液及时冲洗盒内的受精卵；所述的受精卵的培养的方法是：收集的斑马鱼受精卵冲洗干净，放入细胞培养板12孔板中培养，每孔5枚受精卵，每板10孔，共计50个胚胎，在12孔板中倒入10mL的孵化液,在28℃±0.5℃的温度条件下进行培养2小时；所述的伽马射线辐照的方法是：斑马鱼受精卵培养2小时后，收集受精卵，每组100枚，置于直径3cm的培养皿中，将斑马鱼受精卵接受辐照剂量率为0.078-0.310mGy/h的伽马射线辐照，在28℃±0.5℃的温度条件下进行培养96小时，所述的Frizzled基因的相对表达量的检测的方法是：斑马鱼胚胎辐照培养至96h时，在显微镜下切取斑马鱼头部，提取总RNA，进行RT-PCR检测，其具体步骤为，设计引物为ACCAGGAGATT...
【专利技术属性】
技术研发人员：丁德馨，赵维超，胡南，龙鼎新，李广悦，李乐，
申请(专利权)人：南华大学，
类型：发明
国别省市：湖南,43
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