PTH融合蛋白、其制备方法、含有其的检测试剂、试剂盒及应用技术

技术编号:21879427 阅读:39 留言:0更新日期:2019-08-17 10:25
本发明专利技术提供了一种PTH融合蛋白、其制备方法、含有其的检测试剂、试剂盒及应用。该PTH融合蛋白包括:标签序列;以及PTH 1‑84位全长氨基酸序列,其中,标签序列位于PTH1‑84位全长氨基酸序列的C‑末端或N‑末端。通过采用具有标签序列的全长PTH融合蛋白,在与抗体结合时能提供更全面的结合区域,进而提高检测准确性。在此基础上,在本申请优选的实施例中,通过选择特定种类的稳定液,并通过优化各组分之间的含量比例,筛选得到上述全长PTH融合蛋白的稳定液。上述PTH融合蛋白在该稳定液中不仅可以在常温下以液态形式存在,而且能够长期稳定存在,不仅提高了临床检测检测的准确性,而且提高了检测的便利性。

PTH fusion protein, its preparation method, detection reagent, kit and Application

【技术实现步骤摘要】
PTH融合蛋白、其制备方法、含有其的检测试剂、试剂盒及应用
本专利技术涉及免疫检测试剂领域,具体而言,涉及一种PTH融合蛋白、其制备方法、含有其的检测试剂、试剂盒及应用。
技术介绍
PTH(甲状旁腺激素)可用于诊断高、低钙血症的病因以及区分是否与甲状旁腺有关,还可监测甲状旁腺相关疾病的疗效。PTH通常与血钙联合检测,两者对于了解血钙平衡、甲状旁腺对血钙的反馈机制都有非常重要意义。若PTH与钙严重失衡或长期失衡,医生将采取治疗措施。PTH由位于甲状腺后方的4个甲状旁腺产生。正常情况下,当机体出现低血钙时甲状旁腺将分泌PTH放入血循环。随后PTH通过可三条途径使血钙上升到正常水平,分别为促进骨骼释放钙;促进肾脏活化维生素D(活化维生素D可增加肠道对钙的吸收);抑制钙从尿液排出(保钠排磷)。当血钙升高时,PTH的水平下降。当PTH由甲状旁腺释放入血液后,随即会裂解为多种片段(它的半衰期小于5分钟)。PTH是一种由84个氨基酸组成(亦称PTH(1-84))的肽类激素,在骨代谢的调节中发挥重要的生理作用。PTH的生理功能主要是刺激肾对钙的重吸收、磷的分泌和骨的重建,导致合成和分解作用。临床上如本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种PTH融合蛋白,其特征在于,所述PTH融合蛋白包括:标签序列;以及PTH 1‑84位全长氨基酸序列,其中,所述标签序列位于所述PTH 1‑84位全长氨基酸序列的C‑末端或N‑末端。

【技术特征摘要】
1.一种PTH融合蛋白,其特征在于,所述PTH融合蛋白包括:标签序列;以及PTH1-84位全长氨基酸序列,其中,所述标签序列位于所述PTH1-84位全长氨基酸序列的C-末端或N-末端。2.根据权利要求1所述的PTH融合蛋白,其特征在于,所述标签序列选自如下任意一种:MBP、NusA、TF、MysB、GST、T7、6*His+T7、TrxA、DsbC、DsbA、IF2、Sumo、3*fLag、Avi、KSI、CKS、SKP、BFR、GrPE、btuF及Ecotin。3.一种DNA分子,其特征在于,所述DNA分子包括编码权利要求1或2所述的PTH融合蛋白的DNA序列。4.根据权利要求3所述的DNA分子,其特征在于,所述DNA分子还包括分别位于所述PTH融合蛋白的DNA序列5’端的连接序列和3’端的连接序列,所述5′端的连接序列为5′端酶切位点,所述3′端的连接序列为依次连接的终止密码子和3′端酶切位点;优选地,所述5′端酶切位点为BamHI酶切位点,所述3′端酶切位点为XhoI酶切位点,所述终止密码子为TAA。5.一种重组质粒,其特征在于,所述重组质粒有效连接有编码权利要求3或4所述的DNA分子。6.一种工程菌,其特征在于,所述工程菌含有权利要求5所述的重组质粒。7.一种PTH融合蛋白的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:人工合成SEQIDNO:2所示的DNA序列;将所述DNA序列连接到带有标签序列的表达载体上,构建重组质粒;筛选阳性重组质粒,将所述阳性重组质粒转化宿主细胞,得到转化细胞;以及诱导所述转化细胞表达,得到所述PTH融合蛋白。8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,所述带有标签序列的表达载体选自如下任意一种:pET-SKP、pET-28a、pET-MBP、pET-NusA、pET-TF、pET-MysB、pET-GST、pET-21a、pET-TrXA、pET-DsbC、pET-DsbA、pET-IF2、pET-Sumo、pET-...

【专利技术属性】
技术研发人员:饶微李婷华陈城何海华李武毛龙卢东林
申请(专利权)人:深圳市新产业生物医学工程股份有限公司
类型:发明
国别省市:广东,44

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