谷氨酸脱氢酶基因受抑制的类球红细菌及其制备方法和法尼醇的生产方法技术

本发明专利技术公开了一种谷氨酸脱氢酶基因(gdhA)受抑制的类球红细菌及其制备方法和法尼醇的生产方法。本发明专利技术以类球红细菌为出发菌株，运用RNA干扰技术，抑制该细菌胞内谷氨酸脱氢酶基因的表达，减少类球红细菌胞内NADPH的消耗，从而增加胞内NADPH的浓度，由此可以利用增加的NADPH强化2‑C‑甲基‑D‑赤藓糖醇‑4‑磷酸(MEP)代谢途径，增加法尼醇前体FPP的供应，从而提高类球红细菌的FOH产量。

Erythroid Bacteria Inhibited by Glutamate Dehydrogenase Gene and Its Preparation Method and Farnesol Production Method

【技术实现步骤摘要】
谷氨酸脱氢酶基因受抑制的类球红细菌及其制备方法和法尼醇的生产方法
本专利技术涉及生物
，具体地涉及一种谷氨酸脱氢酶(gdhA)基因受抑制的类球红细菌、其制备方法以及利用该类球红细菌生产法尼醇的方法。
技术介绍
FOH(1-羟基-3,7,11-三甲基-2,6,10-十二碳三烯；C15H26O)是一种无环倍半萜，广泛分布在多种植物精油中，例如寻常椴、加南芥、茉莉、玫瑰和柠檬草等。FOH具有独特的甜香味，常被用来作为化妆品、香皂、芳香油和香水的香料。它还具有信号转导、群体感应、细胞增殖等多种生物学功能。FOH还被用作胃溃疡和维生素合成药物的原料，因为其能诱导多种肿瘤细胞系的凋亡。因此，其衍生物已成为候选的抗癌药物。此外，由于其在水中的溶解性较低并具有高能量也可以作为生物燃料的替代品。随着人们对FOH的需求日益增长，且从自然资源中提取的产量极低，化学合成的纯度低，用微生物代谢工程生产FOH变得十分必要。目前，FOH的生物合成途径在植物和微生物中都已基本阐明。植物中FOH合成酶或微生物中混杂的磷酸酶可以通过法尼酰基焦磷酸盐(FPP)的去磷酸化作用生成FOH。FPP是由FPP合成酶通过一个本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种谷氨酸脱氢酶基因受抑制的类球红细菌，其特征在于，其包含能够干扰谷氨酸脱氢酶基因mRNA的至少一个片段的至少一种干扰核酸，从而降低胞内NADPH的消耗，并由此强化所述类球红细菌产生FOH的能力。

【技术特征摘要】
1.一种谷氨酸脱氢酶基因受抑制的类球红细菌，其特征在于，其包含能够干扰谷氨酸脱氢酶基因mRNA的至少一个片段的至少一种干扰核酸，从而降低胞内NADPH的消耗，并由此强化所述类球红细菌产生FOH的能力。2.根据权利要求1所述的谷氨酸脱氢酶基因受抑制的类球红细菌，其特征在于，所述干扰核酸包含SEQIDNO:5所示的序列和/或SEQIDNO:6所示的序列。3.根据权利要求1所述的谷氨酸脱氢酶基因受抑制的类球红细菌，其特征在于，所述干扰核酸包含于质粒载体内。4.一种谷氨酸脱氢酶基因受抑制的类球红细菌的制备方法，其包括：(1)构建重组质粒并转化至供体菌得到阳性供体菌的步骤；和(2)使所述阳性供体菌与类球红细菌受体菌进行细菌结合，从而将所述重组质粒转移至所述类球红细菌的步骤；其中，所述重组质粒包含能够干扰谷氨酸脱氢酶基因mRNA的至少一个片段的至少一种干扰核酸，或者所述重组质粒能够产生干扰谷氨酸脱氢酶基因mRNA的至少一种干扰核酸。5.根据权利要求4所述的谷氨酸脱氢酶基因受抑制的类球红细菌的制备方法，其特征在于，步骤(1)包括：使用第一引物对从类球红细菌的基因组中克隆第一片段，和使用第二引物对从类球红细菌的基因组中克隆第二片段；利用连接酶将所述第一片段和所述第二片段分别插入质粒pBBR1MCS2得到pBBR1MCS2-gdhAi，其中，所述第一片段具有能够形成发夹结构的片段；和将所述pBBR1MCS2-gdhAi转化至供体菌，并筛选阳性供体菌。6.根据权利要求5所...

【专利技术属性】
技术研发人员：祁峰，黄建忠，许曼，江贤章，张明亮，沈培杰，
申请(专利权)人：福建师范大学，
类型：发明
国别省市：福建,35