【技术实现步骤摘要】
一种贴壁细胞复苏方法
本专利技术涉及细胞培养
,具体涉及一种贴壁细胞复苏方法。
技术介绍
细胞培养技术广泛渗透于科学研究领域,细胞低温冷冻贮存、复苏是细胞培养的常规工作。贴壁依赖型细胞即贴壁细胞在培养时需要贴附于培养器皿壁,因此对贴壁细胞进行复苏时,传统的方法是将解冻的细胞转移到事先准备好的离心管使细胞重悬、离心富集细胞、弃上清、加入新鲜培养基使细胞重悬、接种到培养瓶,具体来说,传统的方法一般包括以下步骤:1)、取出冻存的细胞,将冻存管置于37℃的温水中,1分钟之内迅速融化;2)、迅速将解冻后的细胞加入预先准备好的离心管中,1000转/分钟,离心3-5分钟;3)、弃上清,加入新鲜培养基重悬细胞;4)、接种到培养瓶中,补足培养基;5)、放入培养箱培养。上述传统的方法通过离心去除死细胞和冻存细胞,操作耗时较长,尤其当接种瓶数较多时,劳动强度较大,污染概率增加。
技术实现思路
针对现有技术中存在的缺陷,本专利技术的目的在于提供一种贴壁细胞复苏方法,针对贴壁细胞传统的复苏方式进行简化处理,在保证细胞活力的同时缩短处理时间、降低劳动强度。为实现上述目的,本专利技术采用的技术方案如下:一种贴壁细胞复苏方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:S1.对贴壁细胞叠加外源刺激后,冻存细胞;S2.取出冻存的贴壁细胞,将冻存管置于温水中,迅速融化;S3.迅速将解冻后的细胞转移培养瓶中,加入新鲜培养基重悬细胞,静置于培养箱;S4.复苏一段时间后,在显微镜下观察,大约70-80%细胞贴壁后,吸去培养基;S5.加入新鲜培养基;S6.放入培养箱培养。进一步地,步骤S1的具体操作方法为:将 ...
【技术保护点】
1.一种贴壁细胞复苏方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:S1.对贴壁细胞叠加外源刺激后,冻存细胞;S2.取出冻存的贴壁细胞,将冻存管置于温水中,迅速融化;S3.迅速将解冻后的细胞转移培养瓶中,加入新鲜培养基重悬细胞,静置于培养箱;S4.复苏一段时间后,在显微镜下观察,大约70‑80%细胞贴壁后,吸去培养基;S5.加入新鲜培养基;S6.放入培养箱培养。
【技术特征摘要】
1.一种贴壁细胞复苏方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:S1.对贴壁细胞叠加外源刺激后,冻存细胞;S2.取出冻存的贴壁细胞,将冻存管置于温水中,迅速融化;S3.迅速将解冻后的细胞转移培养瓶中,加入新鲜培养基重悬细胞,静置于培养箱;S4.复苏一段时间后,在显微镜下观察,大约70-80%细胞贴壁后,吸去培养基;S5.加入新鲜培养基;S6.放入培养箱培养。2.一种如权利要求1所述的贴壁细胞复苏方法,其特征在于,步骤S1的具体操作方法为:将贴壁细胞用酒精浓度1%的培养基培养10代后,用镅-241密封放射源进行贴壁照射,细胞培养至对数期,冻存。3.一种如权利要求1所述的贴壁细胞复苏方法,其特征在于,所述贴壁细胞为人正...
【专利技术属性】
技术研发人员:张慧芳,王婧洁,刘红艳,柴栋良,任越,杨彪,林海鹏,党旭红,原雅艺,李幼忱,
申请(专利权)人:中国辐射防护研究院,
类型:发明
国别省市:山西,14
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