以rRNA为标的的微生物定量分析方法技术

技术编号:21764772 阅读:74 留言:0更新日期:2019-08-03 19:50
本发明专利技术提供一种能够以高灵敏度并且更准确地进行检测的微生物定量、检测方法。是以在被检测体中的目的微生物rRNA量为指标的目的微生物的定量方法。

Quantitative microbial analysis based on rRNA

【技术实现步骤摘要】
以rRNA为标的的微生物定量分析方法(本申请是2014年9月5日提出的申请号为201410452701.9的同名专利申请的分案申请。上述申请号为201410452701.9的同名专利申请是2006年1月30日提出的申请号为200680003601.1的同名专利申请的分案申请)
本专利技术涉及一种以rRNA为标的进行的对微生物,特别是处于生存状态的微生物进行定量、检测的方法。
技术介绍
以往,微生物的定量方法主要使用在预先预测的选择性培养基中培养微生物,计测菌数的方法、在选择性液体培养基中培养微生物,测定混浊度或吸光度的方法。此外,在检测样本中的微生物时需要的微生物鉴定操作中,能够使用通过形态观察、革兰氏染色、需氧性、糖同化特性、在培养基中的生长状态等细菌学性质进行鉴定的方法、通过DNA-DNA同源性试验进行判断、通过微生物表面抗原的单克隆抗体进行检测的方法等。这些方法需要时间并要求熟练,从迅速性和简便性的观点出发尚存在问题。近年,以PCR法为首的基因扩增方法作为用于检测微量核酸的技术而在广泛的领域中使用,该方法不以样本中的微生物培养为必要条件,此外,能够将样本直接作为试样进行处理等,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种处于生存状态的目的微生物的定量方法,其特征在于:以被检测体中的目的微生物rRNA量为指标,由目的微生物rRNA量与目的微生物的菌数之间的相关关系求出目的微生物的菌数,目的微生物rRNA量通过测定使用能够与目的微生物rRNA特异杂交的核酸片段和被检测体试样进行的PCR反应得到的扩增产物而求得,被检测体试样中的目的微生物rRNA是固定在微生物中的rRNA,检测灵敏度为10°个以上/g·样本或10°个以上/mL·样本,从样本的RNA的提取到微生物的定量在6小时以内完成,扩增产物的测定为确定扩增产物达到一定量时的PCR循环数的测定,能够与目的微生物rRNA特异杂交的核酸片段,是由序列号2、3或...

【技术特征摘要】
2005.01.31 JP 2005-0234481.一种处于生存状态的目的微生物的定量方法,其特征在于:以被检测体中的目的微生物rRNA量为指标,由目的微生物rRNA量与目的微生物的菌数之间的相关关系求出目的微生物的菌数,目的微生物rRNA量通过测定使用能够与目的微生物rRNA特异杂交的核酸片段和被检测体试样进行的PCR反应得到的扩增产物而求得,被检测体试样中的目的微生物rRNA是固定在微生物中的rRNA,检测灵敏度为10°个以上/g·样本或10°个以上/mL·样本,从样本的RNA的提取到微生物的定量在6小时以内完成,扩增产物的测定为确定扩增产物达到一定量时的PCR循环数的测定,能够与目的微生物rRNA特异杂交的核酸片段,是由序列号2、3或5~28记载的碱基序列或与其互补的碱基序列构成的核酸片段。2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:在所述P...

【专利技术属性】
技术研发人员:辻浩和松田一乘朝原崇野本康二木胁真祐美
申请(专利权)人:株式会社益力多本社
类型:发明
国别省市:日本,JP

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