氧化降低的配制剂制造技术

本申请涉及氧化降低的配制剂。本发明专利技术提供包含蛋白质与防止该蛋白质氧化的化合物的组合的配制剂。本发明专利技术还提供用于生成此类配制剂的方法和使用此类配制剂的方法。本发明专利技术进一步提供筛选防止蛋白质组合物中的蛋白质氧化的化合物的方法和防止配制剂中的蛋白质氧化的方法。

Preparations for Reduced Oxidation

【技术实现步骤摘要】
氧化降低的配制剂本申请是申请日为2014年03月13日、中国申请号为201480006214.8、专利技术名称为“氧化降低的配制剂”的专利技术申请的分案申请。对相关申请的交叉引用本申请要求2013年03月13日提交的美国临时申请No.61/780,845和2013年11月27日提交的美国临时申请No.61/909,813的权益，在此通过述及完整收录其每一篇。专利
本专利技术涉及包含蛋白质且进一步包含防止所述蛋白质氧化的化合物的液体配制剂、用于生成和使用该液体配制剂的方法以及筛选防止蛋白质组合物中的蛋白质氧化的化合物的方法。专利技术背景氨基酸残基的氧化性降解是在蛋白质药物中常常观察到的一种现象。一些氨基酸残基对氧化易感，特别是甲硫氨酸(Met)、半胱氨酸(Cys)、组氨酸(His)、色氨酸(Trp)、和酪氨酸(Tyr)(Lietal.,BiotechnologyandBioengineering48:490-500(1995))。当蛋白质在各种加工步骤期间暴露于过氧化氢、光、金属离子或这些的组合时通常观察到氧化(Lietal.,BiotechnologyandBioengineering48:490-500(1995))。特别地，暴露于光(Wei,etal.,AnalyticalChemistry79(7):2797-2805(2007))、AAPH或Fenton试剂(Jietal.,JPharmSci98(12):4485-500(2009))的蛋白质显示出升高水平的色氨酸残基氧化，而那些暴露于过氧化氢的通常只显示出甲硫氨酸氧化(Jietal.,JPharmSci98(12):4485-500(2009))。光暴露可经由形成反应性氧种类(ROS)(包括单线态氧、过氧化氢和超氧化物)导致蛋白质氧化(Lietal.,BiotechnologyandBioengineering48:490-500(1995)；Wei,etal.,AnalyticalChemistry79(7):2797-2805(2007)；Jietal.,JPharmSci98(12):4485-500(2009)；Frokjaeretal.,NatRevDrugDiscov4(4):298-306(2005))，而在Fenton介导的反应中通常经羟根发生蛋白质氧化(Prouseketal.,PureandAppliedChemistry79(12):2325-2338(2007))及在AAPH介导的反应中通常经烃氧基过氧化物发生蛋白质氧化(Werberetal.,JPharmSci100(8):3307-15(2011))。色氨酸氧化导致众多氧化产物，包括羟基色氨酸、犬尿氨酸(kynurenine)、和N-甲酸基犬尿氨酸，而且具有影响安全性和功效的潜力(Lietal.,BiotechnologyandBioengineering48:490-500(1995)；Jietal.,JPharmSci98(12):4485-500(2009)；Frokjaeretal.,NatRevDrugDiscov4(4):298-306(2005))。与生物学功能丧失有关的单克隆抗体重链互补决定区(CDR)中特定色氨酸残基的氧化已有报告(Wei,etal.,AnalyticalChemistry79(7):2797-2805(2007))。最近关于Fab分子报告了由组氨酸配位金属离子介导的Trp氧化(Lametal.,PharmRes28(10):2543-55(2011))。该报告还援引Fab配制剂中聚山梨酯20的自氧化，其导致各种过氧化物的生成。自氧化诱导的这些过氧化物生成还可导致药物产品长期贮藏期间蛋白质中的甲硫氨酸氧化，因为蛋白质中的Met残基提示起内部抗氧化剂的作用(Levineetal.,ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesoftheUnitedStatesofAmerica93(26):15036-15040(1996))且容易被过氧化物氧化。氨基酸残基的氧化具有影响蛋白质生物学活性的潜力。单克隆抗体(单抗)可尤其如此。IgG1单抗中Met254和Met430处的甲硫氨酸氧化在转基因小鼠中潜在影响血清半衰期(Wangetal.,MolecularImmunology48(6-7):860-866(2011))，而且还影响人IgG1对FcRn和Fcγ受体的结合(Bertolotti-Ciarletetal.,MolecularImmunology46(8-9)1878-82(2009))。在药物产品制造和贮藏期间需要评估蛋白质(尤其在液体状态)的稳定性。药物配制剂的开发有时包括添加抗氧化剂以防止活性组分氧化。将L-甲硫氨酸添加至配制剂导致蛋白质和肽中的甲硫氨酸残基氧化降低(Jietal.,JPharmSci98(12):4485-500(2009)；Lametal.,JournalofPharmaceuticalSciences86(11):1250-1255(1997))。同样地，添加L-色氨酸显示出降低色氨酸残基氧化(Jietal.,JPharmSci98(12):4485-500(2009)；Lametal.,PharmRes28(10):2543-55(2011))。然而，L-Trp拥有UV区(260-290nm)中的强吸光度，使之成为光氧化期间的主要靶物(Creed,D.,PhotochemistryandPhotobiology39(4):537-562(1984))。Trp假设是内源光敏剂，增强酪氨酸(Babuetal.,IndianJBiochemBiophys29(3):296-8(1992))和其它氨基酸(Bentetal.,JournaloftheAmericanChemicalSociety97(10):2612-2619(1975))的氧依赖性光氧化。已经证明，L-Trp能在暴露于光时生成过氧化氢，而且L-Trp在UV光下经超氧化物阴离子生成过氧化氢(McCormicketal.,Science191(4226):468-9(1976)；Wentworthetal.,Science293(5536):1806-11(2001)；McCormicketal.,JournaloftheAmericanChemicalSociety100:312-313(1978))。另外，已知色氨酸在暴露于光时生成单线态氧(Davies,M.J.,BiochemBiophysResCommun305(3):761-70(2003))。与由聚山梨酯20自氧化诱导的蛋白质氧化相似，有可能的是在正常操作条件下由蛋白质配制剂中的其它赋形剂(例如L-Trp)所致的ROS生成时可发生蛋白质氧化。根据最近的研究可见，将意图稳定蛋白质的标准赋形剂(诸如L-Trp和聚山梨酯)添加至蛋白质组合物可导致出乎意料的且不想要的后果，诸如ROS诱导的蛋白质氧化。因此，仍然需要鉴定用于蛋白质组合物和开发此类组合物的备选赋形剂。专利技术概述本文中提供一种配制剂(其包含蛋白质和防止该配制剂中的该蛋白质氧化的化合物)、生成该本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种液体配制剂，其包含蛋白质和防止该液体配制剂中的该蛋白质氧化的化合物，其中该化合物选自下组：5‑羟基‑色氨酸，5‑羟基吲哚，7‑羟基吲哚，和血清素。

【技术特征摘要】
2013.03.13 US 61/780,845;2013.11.27 US 61/909,8131.一种液体配制剂，其包含蛋白质和防止该液体配制剂中的该蛋白质氧化的化合物，其中该化合物选自下组：5-羟基-色氨酸，5-羟基吲哚，7-羟基吲哚，和血清素。2.一种生成液体配制剂的方法，其包括将一定量的防止蛋白质氧化的化合物添加至液体配...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·阿拉瓦塔姆，M·马拉尼，P·格雷瓦尔，
申请(专利权)人：霍夫曼拉罗奇有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH